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黑曲霉木聚糖酶基因xynB的克隆及在酿酒酵母中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-18 阅读:281
从黑曲霉(Aspergillus niger)克隆木聚糖酶基因xynB,利用重叠延伸PCR法去除其中的内含子.将该基因与质粒pYES2连接,构建真核表达载体,用醋酸锂化转法导人酿酒酵母(Sacharom yces cerevisiae)INVSC1菌株表达.利用α信号肽替换基因原信号肽,以考察信号肽对表达蛋白分泌的影响.结果获得2株重组菌株,分别为xynB连接原信号肽的pYES2-xynB菌株和xynB连接α信号肽的pYES2-xynB-α菌株.木聚糖酶B成功表达,SDS-PAGE检测到约24kDa目的蛋白质条带.木聚糖酶B最适催化温度为50℃,最适催化pH值为5.0,Mn2+对酶活具有强烈的抑制作用.将α信号肽取代原信号肽使酶活达到最高的诱导时间由72h缩短为48h,但是置换信号肽使最高酶活由7.59U降低为3.97U.
本发明公开了一种白酒蒸馏装置及方法,所述蒸馏装置包括依次连通的第一蒸馏罐,第一冷凝室,第二蒸馏罐,第二冷凝室,出液装置,及第一加热装置,第二加热装置,控制器;所述第一冷凝室及第二冷凝室均包括冷凝板和由冷凝板围成的冷凝腔;所述冷凝板包括上方的上板及下方的下板,所述上板在两个冷凝罐间呈弧形连接,所述下板在两个冷凝罐间呈倾斜的直的连接,所述方法包括第一蒸馏罐内的蒸馏温度为50~70℃,第二蒸馏罐内的蒸馏温度为60~80℃。本发明可显著提升白酒生产效率及生产品质。
普通白酒勾兑成名酒香型酒技术的主要作用是把普通白酒进行除杂脱臭,并勾兑各种名酒香型的酒。本发明可以在任何环境条件下,都能把普通白酒勾兑成各种名酒香型酒。
以巨峰葡萄汁为基质,对6种酵母菌种进行发酵性能的研究,确定以As2.430果酒酵母为发酵菌种,并确定了最佳培养条件,在此条件下,酵母的活菌数达1.5×106 CFU/ml,以此培养液为发酵剂对葡萄浆进行发酵,并通过正交实验,确定最佳勾兑参数.
蛋白质含量是啤麦极其重要的品质指标之一,啤麦籽粒中的蛋白质在制麦和酿酒过程中要发生溶解,其含量多少和溶解的程度对啤酒酵母的营养、啤酒泡沫、啤酒口味、啤酒的稳定性至关重要,控制原料啤麦的蛋白质含量对制麦工艺和麦芽浸出率至关重要.
主要研究如何对酿酒葡萄进行合理分级以及对葡萄酒的质量进行客观评价的问题,结合肯德尔和谐系数法、聚类分析法、典型相关分析法和模拟退火法等方法建立了T检验模型、回归模型、最优化模型以及仿真检验模型.从而用葡萄酒的质量和酿酒葡萄的理化指标部分表示葡萄酒质量与葡萄酒理化指标之间的关系,建立了酿酒葡萄理化指标与葡萄酒理化指标之间的联系并表达出其相关度.并利用仿真验证各步骤的合理性,最终给出葡萄酒评价的新方法.

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