蒲城椽头馍种子面团中酵母菌和乳酸菌的多样性分析

为了研究蒲城椽头馍种子面团中的主要菌种酵母菌和乳酸菌的多样性,随机采取椽头馍传承人、西关椽头馍生产作坊、蒲城椽头馍厂、高阳村、九堂、石龙村、兴蒲清真食品厂及2个体户9份椽头馍种子面团进行分离、纯化、鉴定,得出酵母菌检出量在7.05×102～1.5×106 CFU/g(干基),乳酸菌为1.08×103～1.94×106 CFU/g(干基).通过26S rDNA D1/D2区和ITS区分析,54株酵母菌隶属于酿酒酵母,异常威克汉姆酵母,库德里阿兹威(氏)毕赤酵母,锁掷孢酵母.其中酿酒酵母在除高阳村外的8份样品中均有检出,且在系统发育树上聚集在一个由42株菌构成的大分支上,即优势酵母菌.7株乳酸菌通过16S rRNA序列分析,隶属于瑞士乳杆菌,戊糖片球菌,在西关椽头馍生产作坊和个体户2鉴定出5株瑞士乳杆菌,占71％,为优势菌.结果表明:蒲城椽头馍种子面团中酵母菌、乳酸菌具有一定的多样性,酿酒酵母和瑞士乳杆菌为其中的优势菌.
以酿酒葡萄品种(系)泰纳特(Tannat)、泰姆比罗(Tampranillo)和马色兰980(Marselan-980)的接穗做试材,与新引进的3种砧木进行嫁接组合试验.结果发现,Gravesac-264、RSB-109和Fercal-242做砧木,均优于常规砧木SO4,尤其是砧木Gravesac-264,与上述三品种嫁接,愈合和生根状况明显优于常规砧木SO4.其次是RSB-109,而Fercal-242表现相对较差.
为寻找适合酿造刺葡萄果酒的酵母菌株,从刺葡萄原酒、新鲜刺葡萄以及经初发酵过滤所得的刺葡萄皮渣中分离提取得到90株酿酒酵母,并对经发酵试验初步筛选出的5株酵母进行了耐酒精、耐糖、耐酸和耐二氧化硫的性能测定比较,最终筛选出l株发酵性能优良的菌株(B54).该菌株具有很高的耐酒精能力,在18％的酒精浓度条件下也能迅速启动发酵,同时在高浓度SO2(250 mg/L)条件下发酵启动最快,并能耐受2.0％浓度的柠檬酸,较其他菌株具有更强的耐酸性,因此可作为刺葡萄酿酒的专用菌株.
目的:追风除湿酒治疗骨关节炎的临床验证.方法:口服追风除湿酒(威灵仙、续断、羌活、杜仲等).结果:有效率91.7%,对骨关节炎患者的症状有较明显改善作用.结论:追风除湿酒治疗骨关节炎疗效确切,可长期服用.
以酿酒酵母为宿主菌株,重构其体内代谢途径,生物合成瓦伦西亚烯及其衍生物.该研究在酿酒酵母菌株中引入来源于纯天仙子的细胞色素P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenase,HPO)、来源于黄扁柏的瓦伦西亚烯氧化酶(valencene oxidase,CnVO),并构建了它们对应的4个突变体HPOM、CnVO-3、CnVO-4、CnVO-34,与来源于拟南芥的细胞色素还原酶(cytochrome P450 reductase,AtCPR)组合表达,通过静息细胞试验,筛选得到表达HPO和HPOM的菌株催化瓦伦西亚烯的效果最优,选取HPOM作为后续试验的基础.进一步引入来自黄扁柏的瓦伦西亚烯合成酶(valencene synthase,CnVS),过表达醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH1),截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(truncated 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase,tHMG1).最终获得1株原位生产瓦伦西亚烯及其衍生物的重组酵母菌株PK2-24,进行3L发酵罐的发酵试验,158 h后总萜产量达310.94 mg/L,较原始菌株提高了111倍.该研究为利用酵母规模化生产瓦伦西亚烯及其衍生物奠定了重要基础.
本研究对分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪日粮中的应用效果进行验证.72头21～24日龄的断奶仔猪((6.10±0.15)kg),随机分为3组(每组4个重复,每个重复6头):对照组(基础日粮+228mL·kg-1空白培养液)、空载体组(基础日粮+228 mL·kg-1空载体)及重组酵母组(基础日粮+228 mL·kg-1 INVSc1 (pYES2-Mfα-spEGF)).21 d后,每组每栏选取1头仔猪屠宰,分别测定其小肠组织形态、小肠黏膜中IgA、IgG及IgM水平,碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)的酶活力及mRNA转录水平,小肠黏膜中表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGF-R)的mRNA转录水平.结果表明,与对照组及空载体组相比,重组酵母组INVSc1(pYES2-Mfα-spEGF)能够显著提高断奶仔猪小肠各段(十二指肠、空肠及回肠)黏膜中EGF-R及消化酶(ALP、CK及LDH)的mRNA转录水平(P＜0.05),极显著提高CK和LDH的酶活力(P＜0.01),显著促进其空肠及回肠黏膜中IgA、IgG及IgM水平(P＜0.05),提高其平均日增重(ADG)及降低F/G(P＜0.05).综上,本研究获得的重组酿酒酵母INVSc1(pYES2-Mfα-spEGF)表达的EGF蛋白具有较高的生物学活性,能明显促进断奶仔猪小肠黏膜发育及其免疫功能,具有向养猪生产进一步转化的开发价值.