特异腐质酶Humicola insolens Y1耐热型木聚糖酶基因的克隆及酶学性质分析

利用简并PCR和TAIL-PCR从嗜热特异腐质霉Humicola insolens Y1中克隆得到一个新的耐热型木聚糖酶基因xynD.该基因全长l 104 bp,共编码367个氨基酸,不含有内含子,N端的22个氨基酸为信号肽.成熟蛋白在毕赤酵母中进行了重组表达,重组蛋白经超滤和离子交换柱纯化后达到电泳纯.对其酶学性质分析表明,XynD的最适pH为6.0,在pH 4.0～7.0可以保持80％以上的酶活性,在pH 5.0～10.0具有良好的pH稳定性.最适作用温度为70℃,在60℃条件下保持稳定.多数金属离子对XynD酶活力没有明显的影响.麦芽汁降解实验表明,XynD与商用β-葡聚糖共同作用可以提高麦芽的过滤速率(45.7％)并降低粘度(8.1％).因此XynD在酿酒业,特别是啤酒制造业具有潜在的应用价值.
目的:为苹果酸乳酸酶(MLE)酶制剂的生产和果酒的生物降酸提供理论依据.方法:以植物乳杆菌R23为材料,研究乳酸菌生物量、培养温度、pH值、L-苹果酸浓度、NAD+含量及供厌氧等环境条件对其产MLE能力的影响.结果及结论:植物乳杆菌R23在对数生长期内,产MLE的量及其活力随着菌量的增加而增加;产酶活力较高的时期是在细菌生长进入稳定期的4～8 h内;植物乳杆菌R23最适产酶温度35℃,pH 6.0～7.0;适量的L-苹果酸和NAD+以及厌氧发酵对其产酶和酶活力均有促进作用.
本发明提供了一种白酒制备方法，依次包括如下步骤：原料获取，小曲糖化，大曲发酵，以及小曲再发酵；所述小曲再发酵的过程为：大曲发酵后，再加入原料重量0.05％以上的小曲，同时加入原料重量1倍以上的水，继续发酵5d以上即可。本发明通过该工艺步骤的优化，能在更短的发酵时间内，不仅更好地提升发酵后的口感，还能显著提高出酒率，效果十分显著。
本发明涉及一种浓香型白酒及其生产方法，属于酿酒技术领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种浓香型白酒的生产方法，该方法所生产的白酒呈香味物质含量较高。本发明生产浓香型白酒的方法，包括酒糟拌合粮食、熟糠(熟糠是指蒸气蒸过的熟糠，一般蒸45分钟)、酒曲后入窖发酵步骤，其还包括如下步骤：a、酒糟拌合粮食、熟糠、酒曲后入窖发酵3～5个月；b、开窖，取出中上层糟醅和下层糟醅，分别加入酒尾和/或黄水，然后再加入酒曲，混匀，封窖发酵3～5个月；c、开窖，取出中上层糟醅和下层糟醅，分别加入酒尾和/或黄水，然后再加入酒曲，混匀，再封窖发酵3～5个月；d、开窖，取下层糟醅和中上层糟醅分别蒸酒，得到呈香味物质含量不同的浓香型白酒。
啤酒发酵中的超前絮凝现象(PYF,premature yeast flocculation)主要由麦芽中的多糖引起.本文将麦芽汁进行醇沉、Sevag去蛋白、超滤、DEAE-Sephadex A-25及Sephadex G-100柱层析等一系列分离,提取得到一种分子量在10000Da以上的多糖物质PYF H,酵母超前絮凝活力测定及聚集沉淀后的酵母形态均能证实该多糖能显著促进酵母絮凝.对其性质进行研究发现,该多糖为糖蛋白,糖含量和蛋白质含量分别为58.3%、3.8%.这种多糖物质的发现为进一步研究啤酒发酵中的PYF现象奠定了基础.
[目的]筛选出对酿酒酵母重组菌转化产生γ-氨基丁酸(GABA)具有影响的主要因素.[方法]利用Plackett-Burman试验设计对谷氨酸脱羧酶基因(GAD1)高效表达重组菌Saccharomyces cerevisiae D128转化产GABA的主要影响因子,如菌体浓度、底物浓度、转化温度、转速、转化时间及起始pH等进行研究,筛选出主要影响因素.[结果]试验表明,菌体浓度(P =0.012 3)、转化时间(P=0.0475)及起始pH(P=0.001 9)对转化产生GABA具有显著影响.[结论]研究可为进一步优化菌株DL28产GABA转化条件提供理论依据与实践基础.