一株低产高级醇桑椹果酒酵母的分离、鉴定

以桑椹为分离源,从其自然发酵醪液中分离得到35株酵母菌,采用杜氏小管发酵法初筛,产乙醇能力复筛,耐乙醇和SO2能力三级筛选,再与葡萄酒活性干酵母的发酵性能和高级醇产生量进行比较,得到1株发酵性能优良且高级醇产生量低的桑椹果酒酵母-S-2.对S-2菌种进行的研究表明,该菌在12 h开始产气,48 h后产生的气体充满杜氏小管,在14％乙醇和120 mg/L SO2的胁迫下仍有较好的发酵表现,该菌在正常情况下发酵产生的乙醇含量高达10.56％,且高级醇产生量为312.41 mg/L.采用18S rDNA对其进行序列鉴定,确定其与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)同源性最高,相似度达到100％.该菌完全可以取代葡萄酒酵母专门用于桑椹果酒的发酵.
通过对玫瑰发酵液的抗氧化和美白功效及皮肤安全性进行评价,探究美白机理.利用酿酒酵母发酵玫瑰获得玫瑰发酵液,检测其对自由基的清除作用以及对酪氨酸酶活性与黑色素合成的影响,利用基因芯片检测其美白机理,采用人体斑贴试验评估其皮肤安全性.结果表明,玫瑰发酵液具有较强的清除DPPH自由基能力,对细胞外酪氨酸酶活性的抑制作用与浓度呈正比,对B16细胞内酪氨酸酶活性以及黑色素合成都有一定的抑制作用;玫瑰发酵液能够抑制黑色素瘤通路上游的NGF和FGF2基因表达;人体斑贴试验显示玫瑰发酵液未引起阳性刺激反应.玫瑰发酵液具有较高的皮肤安全性,同时具有抗氧化、抑制酪氨酸酶活性与黑色素生成的功效,其通过抑制NGF和FGF2的表达发挥美白作用.
利用脉冲磁场对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌在不同介质温度、pH、初始菌落数和Na+浓度等的情况下进行杀菌试验,结果表明:介质温度越高,脉冲磁场杀菌效果越好,但该温度远低于热致死温度;介质pH越偏中性,杀菌效果越差,pH值小于5时,杀菌效果较好;微生物残留率随着Na+浓度的升高而降低,Na+浓度越高,杀菌效果越好;微生物残留率随着初始菌落数的增大而下降,初始菌落数越高,杀菌效果越好;菌种不同,残留率不同,酿酒酵母的残留率最低,枯草芽孢杆菌的残留率最高;酿酒酵母的残留率随着葡萄糖和乳糖含量的增大而上升,含量越大,杀菌效果越差;酿酒酵母残留率随着乙醇含量的增大而下降,含量越大,杀菌效果越好;酿酒酵母残留率随着蛋白胨含量的增大而上升,含量越大,杀菌效果越差;酿酒酵母残留率随着干酪素含量的增大而下降,含量越大,杀菌效果越好.
将啤酒酵母、产朊假丝酵母、克鲁斯假丝酵母和葡萄汁酵母4种酵母菌株分别接种到不同硒浓度的YEPD琼脂培养基中,观察不同酵母菌株的耐硒能力；比较4株酵母菌株在相同硒浓度下的生长情况以及有机硒的转化率,选出1株富硒能力强的酵母,并对发酵条件进行优化,确定最佳的硒添加量和添加方式.结果表明:啤酒酵母的耐硒能力和富硒能力均为最强,当硒添加量为20 μg/mL时,在发酵12,18和24h分3次添加,啤酒酵母的综合富硒效果最好,活菌数为2.74×108 cfu/mL,有机硒转化率为85.5％.
为研究缢蛏C型凝集素基因ScCTL-2的结构和功能特点,克隆了该基因的全长序列,并对其mRNA的表达模式以及重组蛋白的凝菌活性进行研究.结果显示,ScCTL-2的cDNA全长2194 bp,共编码630个氨基酸,其氨基酸序列拥有4个C型凝集素糖识别结构域和1个N端跨膜区,这一特殊的序列结构不同于任何一种已知的C型凝集素.基因mRNA在健康缢蛏肝胰腺中的表达量显著高于其他组织,在鳃中的表达量次之,而在其余组织中的表达量没有显著性差异;金黄色葡萄球菌与鳗弧菌感染能够显著上调ScCTL-2在缢蛏血细胞中的表达.ScCTL-2的重组蛋白凝菌实验显示:在Ca2+存在的情况下,rScCTL-2能够对实验所采用的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、藤黄微球菌和酿酒酵母均产生明显的凝集反应;当溶液中不存在Ca2+时,凝集反应几乎不能发生,意味着rScCTL-2的凝菌活性是严格Ca2+依赖的.研究表明,ScCTL-2可能是一种新的无脊椎动物C型凝集素类型,它具有无脊椎动物C型凝集素普遍具备的免疫活性,可能在缢蛏的免疫中具有重要作用.
宁夏贺兰山东麓地区气候、土壤条件极适宜酿酒葡萄的生长,从1997年以来酿酒葡萄基地建设得到大规模的发展,目前已基本具备了酿造优质葡萄酒的条件.但尚存在着,由于部分葡萄园土壤过于肥沃,种植密度过高,栽培管理技术不当及植株感染病毒率较高,直接影响葡萄浆果的质量.加之厂家收购中的无序竞争,技术力量缺乏,酒种单一等也影响葡萄酒质量的提高.宁夏葡萄酒产业在激烈的竞争中,要得到持续、稳定的发展,必须重视上述问题.