酿酒酵母POS5基因过表达对L-异亮氨酸合成的促进作用

L-异亮氨酸是人体必需氨基酸之一,具有很大的商业价值.在谷氨酸棒杆菌中,合成一分子L-异亮氨酸需要消耗四分子NADPH.因此,提高胞内NADPH浓度是提高L-异亮氨酸产量的重要手段之一.在乳糖发酵短杆菌JHI3-156中过量表达酿酒酵母的NADH激酶编码基因POS5△MTS,发酵48 h表达菌株JHI3-156/pDXW-10-POS5△MTS的胞内NADP+浓度增加了27μmol/L(17％),NADPH浓度增加了36 μmol/L (96％);发酵72 h后L-异亮氨酸产量是(3.02±0.52)g/L,比对照菌(1.96±0.04) g/L提高了54％.本研究表明,过表达POS5△MTS基因能提高NADPH的供应,促进了L-异亮氨酸的生物合成.
为研究新疆各产地“赤霞珠”葡萄转色后品质的动态变化及其最适采收期.以哈密、昌吉、和硕和伊犁四个产地赤霞珠葡萄为研究对象,对不同采收期的赤霞珠果实品质进行测定,并采用主成分分析法分析成熟期四个产地赤霞珠果实品质差异及各产地的最适采收期.结果 表明:四个产地赤霞珠在转色期后果实pH、百粒重和糖类含量不断上升,可滴定酸含量不断下降,且各指标不同采收期差异显著(P＜0.05).果皮多酚类含量变化趋势与糖类等变化不同,出现最大值日期与糖类也不同,各指标不同采收期差异显著(P＜0.05).主成分分析结果表示:成熟期昌吉赤霞珠果皮中多酚物质体现的较好,而和硕赤霞珠糖类物质较多.哈密赤霞珠最适采收期应为8月31日,昌吉赤霞珠最适采收期应为9月19日,和硕赤霞珠最适采收期应为9月13日,伊犁赤霞珠最适采收期应为10月5日.
本发明提供一种白酒图谱的高精度分类识别算法，通过步骤1.图谱数据的预处理、步骤2.计算核矩阵的特征值与特征向量、步骤3.映射数据到主成分(Principal Component Analysis，PCA)空间、步骤4.采用支持向量机(Support Vector Machine，SVM)进行分类、步骤5.计算各类的聚类中心与阈值、步骤6.奇异点的判断与余弦角的计算、步骤7.利用余弦角对奇异点重新聚类，实现特性微小差异的不同样品白酒的区分，对白酒的准确鉴定、白酒客观评价标准的建立有极大的推动作用。
本文简要地分析了冰厚的影响因素,研究了推求河道冰厚的方法,并分析确定了最大冰厚计算公式;并用实例予以验证.结果表明,方法可行,结果合理,具有一定精度.
为了研究菌株和接种方式对冰葡萄酒非挥发性产物和挥发性香气成分的影响,选用2株自筛非酿酒酵母——仙人掌有孢汉逊酵母(Hanseniaspora opuntiae)和葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum),分别与商业酿酒酵母DV10混合发酵.结果表明:H.uvarum与DV10同时接种混合发酵可以显著降低乙酸产量(降低26.90％);H.opuntiae与DV10同时接种混合发酵促进了酯类和萜烯类物质的合成,总量分别增产88.61％和21.40％,其中乙酸苯乙酯含量提高14.60倍,β-大马士酮增产8.85％.除此之外,感官品评结果显示H.opuntiae 与DV10混合发酵可显著增强花果香和黄油味.综合分析,认为H.opuntiae更适合应用于冰葡萄酒发酵,为冰酒混合发酵的进一步研究提供了数据基础和理论依据.
利用RT-PCR方法克隆得到β-l,6-葡聚糖酶BGN16.2的cDNA序列,并采用半定量RT-PCR法,研究以茯苓粉及病原菌细胞壁为诱导物对该基因诱导表达的影响.构建该酶基因到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上,转化酿酒酵母,用CMC糖化力法对目的基因表达产物的酶活性进行检测.克隆得到BGN16.2的cDNA基因开放阅读框长度为1 290 bp,编码429个氨基酸,推测蛋白分子量为48 kDa,预测的等电点pI为5.25.该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的β-l,6-葡聚糖酶并分泌到胞外.发酵液中的酶活在培养60 h时达到最高(2.1 U·mL-1),最适酶解温度为50 ℃,最适pH值为5.5.对该酶的一二级结构进行生物信息学分析的基础上,利用同源建模的方法完成了该酶的活性区域三级结构的建模.