钙转运蛋白Gdt1过表达对酿酒酵母蛋白酶A胞外分泌的影响

啤酒泡沫稳定性是评估啤酒质量的一个关键因素,发酵液中的蛋白酶A会影响啤酒的泡沫稳定性.通过过表达钙转运蛋白Gdt1促进蛋白酶A的液泡分选的方法,达到减弱酿酒酵母向细胞外分泌蛋白酶A的目的.以酿酒酵母菌株W303-1A为亲本菌株,通过同源重组依赖型DNA装配方法构建Gdt1过表达菌株,然后将Gdt1过表达菌株和亲本菌株在相同的低氮胁迫条件下进行发酵,测定其胞内外的蛋白酶A活力以及基本发酵性能.研究结果表明:发酵结束时,Gdt1过表达菌株的胞内蛋白酶A活力较亲本菌株提高了12.59％,胞外蛋白酶A活力较亲本菌株降低了18.81％;同时,过表达Gdt1没有影响菌株的基本发酵性能.研究揭示了一种有效的降低蛋白酶A的胞外分泌的方法,为筛选低蛋白酶A胞外分泌菌株提供了理论参考.
半乳糖激酶基因(GAL1)启动子是酿酒酵母(Saccharumyces cerevisiae)表达外源蛋白的高效诱导性启动子,其表达效率受到GAL4的调控和半乳糖的诱导,改变酵母的GAL基因型有助于提高外源蛋白的表达水平,但重组GAL菌株的菌株特性仍需要进一步研究以确保蛋白表达的稳定性.本研究分别对敲除了不同GAL1和插入不同GAL4基因拷贝数的重组GAL基因型酵母进行了生长发酵性能和遗传稳定性研究.结果表明,重组菌株的GAL基因型在传代过程中较为稳定,没有发生回复突变和遗传霉素(G418)和博来霉素(Zeocin)抗性恢复的情况;与对照原始MS-1酵母相比,重组菌株(SG1、DG115、DPG65和GQ21)的生长性能在葡萄糖培养基中的生物量略有下降.与半乳糖诱导培养基(yeast peptone galactose,YPG)相比,GAL1基因的敲除在甘油培养基(yeast peptone galactose glycerin,YPGL)中对酿酒酵母半乳糖利用的影响更为显著.其中,在YPG和YPGL培养基内,对照MS-1、SG1、DG115和DPG65利用完所有半乳糖分别需要20、20、20、26、20、44、44和68 h,而GQ21均无法利用半乳糖.GAL基因的敲除和插入没有影响酿酒酵母的热致死温度,原始菌株和重组菌株皆为54℃.本研究将为工业利用酵母表达系统大规模、低成本生产重组蛋白提供研究基础.
将啤酒酵母、产朊假丝酵母、克鲁斯假丝酵母和葡萄汁酵母4种酵母菌株分别接种到不同硒浓度的YEPD琼脂培养基中,观察不同酵母菌株的耐硒能力；比较4株酵母菌株在相同硒浓度下的生长情况以及有机硒的转化率,选出1株富硒能力强的酵母,并对发酵条件进行优化,确定最佳的硒添加量和添加方式.结果表明:啤酒酵母的耐硒能力和富硒能力均为最强,当硒添加量为20 μg/mL时,在发酵12,18和24h分3次添加,啤酒酵母的综合富硒效果最好,活菌数为2.74×108 cfu/mL,有机硒转化率为85.5％.
本发明公开了一种白酒丢糟油及其制备方法和应用，其制备方法包括以下步骤：(1)将白酒鲜丢糟低温冷冻后机械破碎，得到粉碎鲜丢糟；(2)采用提取溶剂通过超声辅助加热法对粉碎鲜丢糟进行提取，经过固液分离后得到提取液，即白酒丢糟油。在烟用爆珠中加入白酒丢糟油，可赋予卷烟自然酒香香韵，丰富烟香，柔和圆润烟气，提升抽吸舒适感效果。
通过对锦鲤鱼幼鱼进行铜、汞、镉的单一重金属积累实验和排除实验,研究了以酿酒酵母作为饲料添加剂对锦鲤鱼内脏、鳃和肉的排除作用效果.结果表明,酿酒酵母对锦鲤鱼体内脏、鳃和肌肉中积累的铜、汞、镉均有排除作用,其中对Cu的排除效果比较为肌肉＞鳃＞内脏;对Hg的排除效果比较为内脏＞肌肉＞鳃;对Cd的排除效果比较为肌肉≈内脏＞鳃.综合比较得出,酿酒酵母对鱼体内Cd和Hg的排除效果显著,可以排除鱼肉中绝大多数的重金属离子.对Cu的排除效果相对减弱.酿酒酵母对鱼体内的重金属排除效果主要体现在内脏和肌肉中,而对鱼鳃的排除效果不明显.
中国白酒作为世界四大蒸馏酒种之一,在文化底蕴和酿造技术等方面都久负盛名.但是中国白酒的出口贸易却与此盛名并不相符.本文根据我国白酒产业及世界其他三大著名蒸馏酒历年数据及资料,通过对四大蒸馏酒种国际竞争力实现的相关指标进行测算及比较分析,对我国白酒产业的国际竞争力现状给出一个较完整定位,并提出相关对策建议.