提高酿酒酵母异戊二烯产量的代谢途径的挖掘

以酿酒酵母为宿主菌株,挖掘可以提高异戊二烯产量的新的基因改造策略.该研究通过敲除线粒体丙酮酸载体(MPC2)、线粒体孔蛋白(POR2)和丙酮酸脱氢酶复合体的E1α亚基(PDA1)基因来增加细胞质乙酰辅酶A(Acetyl-CoA)的通量,并将含有白杨(Populus alba)异戊二烯合酶基因的质粒pESC-His-ispS分别转入以上3个敲除体,得到工程菌SC1、SC2和SC3.通过摇瓶发酵,SC3效果最优,比原始菌株提高了0.3倍.为了进一步增加Ace-tyl-CoA在胞质中的通量,以△PDA1菌株作为基础,进一步引入并过表达了来自Leuconostoc mesenteroide和Clostrid-ium kluyveri的木酮糖-5-磷酸特异性磷酸转酮酶基因(xylulose-5-phosphate-specific phosphoketolase)(LmPK)和磷酸转乙酰酶基因(phosphotransacetylase)(CkPTA)得到SC4,将质粒pESC-His-ispS转入SC4,得到工程菌pHB1.然后将含有大肠杆菌异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase)(IDI1)的质粒pESC-His-ispS-EcIDI1转入SC4,获得pHB2.摇瓶发酵结果表明,产量达到了54μg/L,比原始菌株提高了约1倍.该研究为后续异戊二烯的研究提供了新的研究思路,也为利用酵母规模化生产异戊二烯的奠定了重要基础.
本发明公开了一种酱香型白酒的储存工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)选择储存容器：选用以原生态石浆岩为生产原料制备的酒坛，所述酒坛具有耐酸耐碱、耐腐蚀、不浸不漏、透气性能好、吸水率低、釉面均匀；(2)灌装：将用于储存的酱香型白酒装于酒坛中，然后封闭该陶制酒坛的开口；(3)储存：将灌装好的酒放置在后山中，通过露天存放方式储存半年即可让酱香型白酒自然老熟；其中，所述后山阶梯型的栽满鲜花；由高至低依次为：桂花树、菊花和牡丹等。本发明既可以使阳光直接照射在酒坛上，加速白酒的发酵和老熟；该工艺过程中由于桂花在高处，当桂花成熟后，风吹花瓣飘落在下面的酒坛上，上时间的累积，可以给酒增香。xa0xa0
本研究以食物过敏重要的效应细胞嗜碱性粒细胞（KU812）为对象，探究高盐条件对嗜碱性粒细胞脱颗粒以及相关细胞因子表达的影响，并初步探讨其分子机制。首先利用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）和实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，qPCR）分析高盐条件下KU812细胞脱颗粒释放生物活性介质和促炎细胞因子的变化；并用qPCR分析血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1（serum and glucocorticoid-regulated kinase 1，SGK1）抑制剂和P38抑制剂对高盐条件下KU812细胞产生白细胞介素（interleukin，IL）-4的影响。结果表明，高盐条件并不能促进KU812细胞脱颗粒释放生物活性介质组胺和β-氨基己糖苷酶，但能促进其产生促炎因子IL-6和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α；高盐条件也可以促进KU812细胞产生IL-4，同时伴随着SGK1基因的高表达，并且使用SGK1抑制剂和P38抑制剂都可以显著抑制高盐条件下KU812细胞表达SGK1和IL-4。综上，高盐条件会通过P38-SGK1信号通路促进KU812细胞产生IL-4。
[目的]研究固定化酵母发酵木瓜-西番莲复合果酒的最佳工艺条件.[方法]以木瓜和西番莲果为原料,研究了初始加糖量、pH、固定化酵母接种量、发酵温度对木瓜-西番莲复合果酒残糖、酒精度和感官品质的影响.[结果]影响木瓜西番莲复合果酒发酵残糖、酒精度和感官品质的主要因素为复合果汁初始加糖量,最佳发酵条件为混合果汁起始糖度28％、pH 4.5、酵母接种量0.015％、发酵温度25℃.[结论]在最佳工艺条件下可获得色泽淡黄自然、拥有着和谐的果香与酒香、入口清爽、酒精含量约13.8％的木瓜-西番莲复合果酒.
本发明公开了一种浓香型白酒酿造工艺，所述的酿造工艺包括以下步骤：步骤一、选料；步骤二、原料酿造；步骤三、提高浓香型原酒绵爽度：辅料制备、浓香型甑桶底锅中串蒸。本发明的酿造工艺可大大提高酿造工艺的效率，降低制造成本，同时可以提高浓香型原酒绵爽度。
研究于2001年10月～2002年9月在四川省攀枝花地区葡萄园进行.对4个葡萄品种(霞多丽、佳美、梅尔诺、黑虎香)休眠冬芽进行了化学处理.处理药剂及其浓度为16.7%CaCN2、0.5%～2.0%H2CN2、0.5%～2.0%H2CN2+1%吐温80;处理时期分别为12月25日、1月10日、1月25日.结果表明:CaCN2、H2CN2、H2CN2+吐温80处理具有明显的提前萌芽效果,1月10日的处理效果最佳.不同葡萄品种对化学处理的反应有差异,霞多丽、佳美、梅尔诺、黑虎香分别提前萌芽16、13、11、4d.黑虎香的石灰氮处理出现药害现象.