小桐子磷脂二酰甘油酰基转移酶(JcPDATl)cDNA的克隆与功能鉴定

使用简并PCR结合RACE技术从能源植物小桐子种子中克隆了一个PDAT基因的cDNA全长,命名为JcPDAT1(GenBank登陆号为HQ827796).JcPDA T1全长2 869bp,包含一个长为2 013bp的开放阅读框,编码670个氨基酸.多序列比对和进化分析表明该基因编码蛋白与其他植物PDAT高度同源,具有典型的PDAT结构域.Realtime PCR结果表明JcPDAT1在种子、叶和根里面都有表达,且在种子发育过程中大量表达.酵母互补实验证实该基因编码蛋白具有PDAT酶活性.在与酿酒酵母突变体H1246α的互补实验中发现,TLC层析(薄层层析法)和尼罗红染色结果都显示JcPDAT1的表达使H1246α恢复合成TAG,说明JcPDAT1具有PDAT的功能活性.
蛋白质是所有生命体生命活动的重要参与者，对蛋白质的精确定性定量研究有助于加深对生命规律的认识。食品加工用酵母作为一类在基础研究、食品酿造和工业发酵等领域广泛应用的真核微生物，其蛋白质组的研究持续引起了许多科研工作者的兴趣，其研究结果可促使其在食品加工中得到更加广泛的应用。基于酵母中不同蛋白质之间存在理化性质各异、浓度差异悬殊等特点，质谱法已发展成为目前最有效的酵母蛋白质组鉴定技术手段之一。本文总结了近5 年来液相色谱-质谱联用技术在酵母蛋白质组学研究中的进展，探讨了“自下而上”法酵母蛋白质定量技术，重点分析了酵母蛋白质组提取、鉴定及分析技术方面的最新成果，总结了酵母蛋白质组定量技术在食品加工用酵母研究中的应用前景。
为了筛选出可以专一性降解何首乌中蒽醌类成分而不破坏其有效成分二苯乙烯苷的菌种,降低何首乌的毒副作用,我们建立了一种炮制何首乌的新方法.采用HPLC法和UV分光光度计法,对不同菌株发酵的何首乌样品及其发酵前后的化学成分进行比较分析.结果显示:米根霉(Rhizojpus oryzae)、菌株YMS-010(Mucor.sp.)发酵样品的游离型总蒽醌、大黄素、大黄素甲醚的含量均有较大幅度的降低.菌株YMS-006(Aspergillus)、黑曲霉(Aapergillus nigers)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)三株菌株发酵何首乌样品有未知成分产生,且含量较高.通过筛选发现米根霉、菌株YMS-006具有专一性降解蒽醌类成分而不破坏二苯乙烯苷的能力,获得了具有发酵炮制作用的菌株.
一种保健白酒的制备方法，具体步骤如下：将石斛、酸枣仁、夜交藤、茯神、麦冬、柏子仁、玄参加5?6倍的水文火煎煮50?60min，过滤除渣，所得滤液经喷雾干燥制成中药提取液；将大米清洗干净后在冷水中浸泡5?8h捞出晾干；将原料放入中药提取液中于18?25℃浸泡8?10h得到浸泡料；蒸料；发酵；将发酵后的酵料进行蒸馏，收集蒸馏出的中馏酒即得保健白酒。本发明的白酒通过将原料加入石斛、酸枣仁、夜交藤、茯神、麦冬、柏子仁、玄参制备而成的中药提取液中浸泡，使得制备而成的白酒具有宁心安神、增强免疫力等保健功效。
对来自成熟桑椹果实、桑叶以及桑果园土壤的酵母进行桑椹果酒专用酵母的筛选.以TTC显色法、产气初筛、大瓶复筛以及放大试验优选菌株,最终得到一株优良酵母菌株.发酵试验结果表明该酵母菌起酵快,发酵7d即可产酒11.7%(体积分数),能取代对照菌种进行桑椹果酒的发酵.通过形态观察、API生理生化试验、18S rDNA序列测定及系统发育分析对该菌进行了鉴定,结果表明:筛选到的酵母菌株呈椭球状,在产孢平板上有子囊孢子产生,在玉米粉琼脂培养基上无假菌丝产生.生理生化及分子鉴定结果表明:该菌与酿酒酵母属的Saccharomyces sp.WW-W23最为接近,相似性达到97%,故命名为桑果酵母(Saccharomyces cerevisiae Sang-guo).
为探讨培养基对活性干酵母生长及酿造果酒质量的影响，以酵母浸出粉胨葡萄糖（YEPD）培养基为对照，选取蓝莓果浆、麦芽汁等成分改良活化培养基。结果表明：葡萄糖和酵母粉含量对酵母活化影响显著，添加蓝莓果浆、麦芽汁以及葡萄糖等成分优化的培养基活化效果优于对照（YEPD）。该系列培养基上酵母能够快速生长增值，死细胞率低；与对照相比，酿造的蓝莓酒残糖和高级醇含量降低，酯类物质含量最高提升12.1%，酒香浓郁。当培养基麦芽汁浓度超过3%，活化效果不会随着麦芽汁浓度升高而显著增加。改良后的培养基在提供酵母菌所需营养的同时提高酵母对蓝莓果浆中糖类和氨基酸等物质的利用率，使酒口感和香气物质更加平衡。