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rDNA介导的菊粉酶基因整合载体构建及在K.marxianus中应用

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-08-08 阅读:190
为提高K luyverom yces marxianus(K.marxianus)发酵菊芋粉生产乙醇过程中的菊粉酶活性,以酿酒酵母rDNA为整合位点,构建菊粉酶基因的整合表达载体pFA6a-rDNA-pgk-inu.经SphⅠ线性化后,采用电击法转化K.marxianus,使表达载体整合到K.marxianus的染色体上.经PCR鉴定的阳性转化子能够分泌菊粉酶且能在无筛选压力下稳定遗传50代.重组菌K/r-2分泌的菊粉酶活力为140 U/mL,比出发菌株提高了80%.以粗菊芋粉生料为底物进行了补料发酵,重组菌株的发酵终点乙醇浓度为76.5 g/L,比出发菌株提高了5 g/L,达到理论转化率的96%.这些研究工作为非粮作物菊芋生产燃料乙醇奠定了基础.
对国内外近10年来白酒风味化学的研究情况进行综述,介绍了白酒风味研究的方法学,风味化合物,健康因子与不利成分等方面的研究进展.白酒是中国的国酒,2014年产量达到1 257.13万k L,同比增长2.5%.迄今为止,在白酒中发现的风味化合物有1 737种,其中醇类216种,酯类431种,醛类95种,酮类126种,酸类109种,缩醛类54种,芳香族化合物167种,内酯类19种,呋喃类76种,萜烯类68种,烃类81种,含氮化合物115种,含硫化合物55种,其它125种.白酒现代化生产是未来发展的大趋势.白酒风味化学研究的重点是揭示风味化合物对白酒风味的贡献及其生成途径,寻找提高白酒现代化生产风味品质的方法.
为探究丙酮酸羧化酶及微量元素Ca2和生物素对酿酒酵母积累琥珀酸的作用,敲除了琥珀酸脱氢酶编码基因(SDH2)并过量表达来自米根霉的丙酮酸羧化酶基因(RoPYC).琥珀酸产量由(0.011±0.002) g/L提高至(0.841±0.020) g/L,较表达前提高了75.45%.随后,外源添加不同浓度Ca2+和生物素考察其对琥珀酸发酵的影响,结果发现,Ca2+的添加促进了菌体的生长但不利于琥珀酸的积累,而外源添加浓度为16、32、64、96μg/L生物素时,琥珀酸产量分别提高75.04%、84.26%、69.28%、66.79%.其中生物素质量浓度为32 μg/L时,琥珀酸产量达到最大为(0.964±0.02)g/L,且丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC)酶活提高14.42%,说明PC酶活的提高促进了酿酒酵母中琥珀酸的积累.该研究为解决酿酒酵母琥珀酸合成过程中前体碳代谢流不足问题提供了新的解决思路.
以覆冰在线监测系统的预警方式为对象,提出基于覆冰增长速度的动态报警方式,根据覆冰增长速度结合气象预报推算得出覆冰达到设计值所需的预警时间,从而对覆冰进行动态预测,为启动融冰措施提供依据.
本文利用31个气象观测站30a积冰观测资料分析黑龙江省的电线积冰现状,采用极值Ⅰ型概率分布计算了各重现期最大冰厚,对黑龙江省的冰区进行了划分,初步得出齐齐哈尔、富裕一带属于冰灾较严重的地区,其余为轻冰区的结论.
本文分别从静电技术对酒和醋的人工老熟、对酱油、食品和农产品的灭菌处理、对酿酒酵母菌的诱变、静电涂敷技术在食品加工中的应用和对食品或农产品的保鲜的角度,综述了现代静电技术在食品和农产品加工中的应用.并对今后的应用提出建议.

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