在生物体内存在可催化多步连续反应的通用酶,对生物代谢过程具有重要作用.八氢番茄红素脱氢酶(CrtI)作为典型代表,可以催化多步连续脱氢反应,生成番茄红素等具有重要价值的产物.本文以酿酒酵母为底盘研究CrtI的催化功能特征.首先通过组合设计与筛选番茄红素合成路径中的三种外源酶CrtE、CrtB和CrtI,发现CrtI是主要的限制因素,且三孢布拉氏霉菌来源的CrtI (BtCrtI)表现出优异的催化功能.通过生物信息学与蛋白结构分析发现BtCrtI的S311残基是连接和稳定活性中心结构的关键.随后通过分析该位点的饱和突变结果,揭示了该位点的氨基酸残基类型对活性中心结构和功能的显著作用,为酶的设计和改造提供了新的思路.同时发现CrtI的活性差异未对合成路径中的类胡萝卜素的代谢流造成扰动,表明CrtI是番茄红素的产量和纯度的决定因素.
本论文通过详细测定酵母自溶过程中蛋白质、核酸以及各种核苷酸在产物中的变化量,研究pH、外加5'-磷酸二酯酶(麦芽根核酸酶)、外加蛋白酶等对酵母自溶的影响,从而探讨外加5'-磷酸二酯酶不能显著提高酵母自溶产物中呈味核苷酸含量的原因.研究结果显示:在自溶过程直接添加麦芽根核酸酶只能略提高酵母抽提物中呈味核苷酸的含量,但提高程度不明显;在pH8自溶的产物中5'-核苷酸和3'-核苷酸的量均显著低于在pH5自溶的产物中的量.酵母在pH8～8.5条件下自溶时,外加蛋白酶可以显著提高酵母自溶物产物中可溶性固形物含量、可溶性蛋白质和核苷酸的含量,显著降低核酸含量,产物中的5′-核苷酸含量显著比3′-核苷酸含量高.上述结果说明了酵母在外加麦芽根核酸酶条件下自溶时,核酸未能迅速降解并生成大量的呈味核苷酸的原因之一是由于酵母细胞壁的存在阻碍了细胞器中核酸的溶出,致使外加的5′-磷酸二酯酶不能很好与核酸底物接触,从而不能有效提高呈味核苷酸的产量.
自1982年英国人百利先生在青岛崂山九龙坡建立起中国第一个真正意义上的酒庄开始．华东葡萄酒公司便开始在青岛崛起。历经二十多年的积淀，如今的华东葡萄酒已成为家喻户晓的知名品牌，在中国葡萄酒行业占得一席之地。
以TBHQ、EDTA、SO2为抗氧化剂,通过模拟酒和红葡萄酒中的抗氧化试验,结果表明:在规定应用浓度下,TBHQ表现不出抗氧化性,反而加速了酒样的褐变,50～100mg/L的EDTA效果最好,同时与SO2表现出较强的抗氧化协同作用.
酵母絮凝是由絮凝基因编码的絮凝蛋白与邻近细胞的胞壁甘露糖结合形成的多细胞聚集现象.利用31篇文献综述了酵母絮凝的遗传因子和遗传工程研究进展,并介绍了无机离子、营养成分、pH、温度、酒精浓度和菌龄等因素对细胞絮凝的影响.
D-氨基酸在食品中广泛存在.研究D-氨基酸诱导的酿酒酵母细胞内的活性氧的累积及其生物损伤.实验结果显示D-氨基酸抑制细胞生长,引起细胞内H2O2含量的升高,导致细胞内过氧化氢酶和过氧化物酶的活性增强.该结果表明H2O2是D-氨基酸诱导产生的活性氧的主要类型,氧化损伤是D-氨基酸对酿酒细胞毒性的主要机制.
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