具有高胱硫醚β-裂解酶活性的葡萄酒酵母工程菌株的构建

[目的]构建具有较高胱硫醚β-裂解酶活性的葡萄酒酵母工程菌株,用于提高葡萄酒的香气品质.[方法]利用质粒pAUR123将大肠杆菌tnaA基因在中国本土酿酒酵母菌株LFP525中进行表达,得到的转化子进行酶活测定,并通过模拟汁和干白的发酵,评价其酿酒特性和产生硫醇类物质的能力.[结果]成功获得酵母工程菌株TH1和TH2,其胱硫醚β-裂解酶活性与受体菌比提高了32.25％-59.44％.模拟葡萄汁发酵显示,工程菌株中硫醇类物质的产量显著提高,是受体菌的2.8-4.3倍.工程菌株的发酵时间比受体菌略长,残糖和挥发酸显著高于宿主菌,但其含量处于正常范围.在长相思干白发酵试验中,该工程菌株的主要酿酒特性与受体菌相差不大,且硫醇类物质的产量提高了1.22倍.[结论]通过基因改造可以提高酿酒酵母胱硫醚β-裂解酶活性,应用改良菌株可进一步提高葡萄酒的香气品质.
酿酒葡萄酒泥经发酵后制成有机或有机无机复混肥,以底肥或追肥方式施用于大田作物(鲜食玉米)及果树(桃、冬枣)上,结果显示:在等养分含量下,酒泥施用效果明显优于一般复合肥(对照),鲜食玉米单穗重平均增加35 g,增重率24.3%,双穗率比对照高16个百分点,且穗长、穗粗等项指标均优于对照;冬枣单果平均增重4.32 g,增重率为30.62%,可溶性糖增加2.96个百分点;桃可溶性糖提高1.53个百分点,Vc增加10.7%.酒泥中不含有任何对人类身体有毒有害物质,是很好的绿色有机肥源.
为温和型红曲黄酒新产品的研制提供理论依据和技术支持.在红曲黄酒初酿酒中添加凉性植物配料绿茶提取物共陈酿,研究其对红曲黄酒陈酿品质及寒热性的影响.在初酿酒中添加绿茶提取物共陈酿可提高红曲黄酒的总酯、总酚含量,提高红曲黄酒总酯生成率,丰富红曲黄酒的风味复杂性;可延缓红曲黄酒的红色色素的降解,使陈酿12个月的红曲黄酒仍能保持红棕色;还可降低红曲黄酒的寒热性,提高红曲黄酒的品质.适宜的绿茶提取物添加量为质量分数3.0％,陈酿12个月后的黄酒总酯含量较传统工艺的黄酒上升107.30％,总酯增加率提高4.23个百分比,总酚含量提高158.53％,红色色价提高106.27％,寒热指数下降32.43％,差异均达极显著水平(P＜0.01).酿造的红曲黄酒新产品物性温和、口感柔和、风味独特,且不失红曲黄酒典型性风格.
着重探讨了添加大米辅料对啤酒中蛋白质疏水性和泡沫稳定性的影响.研究发现,大米辅料添加量从10％增加到30％,疏水性指数从118.86逐渐减少至103.87,而泡沫稳定性由62.14％增加到68.25％.通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)分析啤酒中来源于大米的蛋白质,发现大米啤酒中蛋白质Z含量较小而且含有一定量的RAG2蛋白,从而对啤酒泡沫稳定性形成一定的影响.
果酒的氧化褐变严重影响了果酒的质量,是果酒生产中长期存在的重要问题.因此,探讨果酒氧化褐变的机理并寻求有效防止果酒氧化褐变的方法具有重要的现实意义.本文较全面的介绍了果酒中酚类物质的种类和发生非酶氧化褐变反应的机理及其研究进展,以及防止或减轻氧化褐变的技术措施.
采用弹性基础板模型,对锥体结构上冰破坏力随不同弯曲破坏模式而变化的关系进行了定性分析,给出了由2个尺寸比表达的与3种破坏模式相对应的冰荷载表达式和1个由尺寸比定义的破坏模式图.利用这一结果揭示了弯曲破坏冰力幅值与周期大幅度变化的力学机理.板型弯曲破坏冰力是尺寸比k1的减函数;楔梁型破坏冰力是k1的增函数.这预示着最大冰力将在两种破坏模式过渡时出现.冰力周期随冰的断裂长度与其厚度之比k2增大而增长,当k2大于5时,破坏模式由板型过渡到楔梁型.该结果可在现场数据分类识别和冰力速度效应的定性分析等方面得到应用.