利用酵母建立植物抗逆基因快速筛选体系

以旱柳Salix matsudana及东南景天Sedum alfredii为实验材料,利用改进的SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术分别构建了旱柳盐胁迫和东南景天氯化镉胁迫后的全长cDNA文库,把文库包装到酵母表达载体中,转化酿酒酵母感受态细胞,通过在尿嘧啶缺陷型培养基上添加不同浓度梯度的筛选压来筛选酵母高抗转化子,并对其基因进行鉴定.结果从旱柳盐胁迫全长cDNA文库中得到了2个能耐受1.709 mol·L-1氯化钠的阳性转化子,从东南景天氯化镉胁迫全长cDNA丈库中得到了2个能耐受0.123 mmol·L-1氯化镉的阳性转化子.分别测定对照菌(转空载体重组菌INV/p YES2.1)和转cDNA重组菌在无胁迫、高盐(1 mol·L-1氯化钠)和高氯化镉(150 μmol·L-1)胁迫下的生长曲线.结果表明高耐盐/耐镉相关基因的表达对酵母正常生长没有影响.在含高盐或者高镉的培养基里,2个转基因重组菌的延滞期短于对照菌.这表明高耐盐/耐镉相关基因的表达可以提高酵母细胞的耐盐/耐镉能力.对6号耐盐转化子序列进行生物信息学和表达模式分析,发现该基因为一盐胁迫应答相关基因SMpla6(暂定名).用酿酒酵母建立了一个高效快速筛选植物抗逆基因的体系,研究结果为快速克隆植物抗逆相关基因奠定基础.
篇首:一,材料与方法 1. 实验动物和分组:雄性SD大鼠25只,6～8周龄,体重170～220g,西安医科大学动物实验中心提供.所有动物喂食含18.2%玉米油的高脂肪饲料,按体重,周龄配伍,随机分组.实验组15只,白酒灌胃6周;对照组10只,生理盐水灌胃6周.
本发明涉及浓香型白酒转排生产方法，属于酿酒技术领域。本发明浓香型白酒转排生产方法包括如下步骤：a、每2.4立方米出窖酒糟拌合糠壳20～30kg，蒸馏，冷却至环境温度，拌合中温曲药，入窖发酵25～35天；b、取出酒糟，拌合超高温曲药，再次入窖发酵25～35天；c、开窖，灌入酒尾、酒头中至少一种使窖内酒糟的乙醇质量含量为2～4％；d、封窖，继续发酵25～35天，开窖，取出酒糟蒸酒即可。
应用高光谱成像技术结合连续投影算法(SPA)实现葡萄果皮中花色苷含量的快速无损检测.采集60组样本高光谱图像,获取样本光谱曲线,并采用多元散射校正预处理方法提高信噪比.然后采用SPA选择光谱变量,将其作为多元线性回归(MLR)、偏最小二乘(PLS)模型和BP神经网络(BPNN)的输入变量,分别建立SPA-MLR、SPA-PLS和SPA-BPNN模型并与全光谱变量PLS模型相比较.结果表明,SPA-MLR、SPA-BPNN和SPA-PLS模型的预测精度均优于全光谱变量PLS模型,其中SPA-PLS模型获得了最佳预测结果,其预测相关系数Rp和预测均方根误差(RMSEP)分别为0.900 0和0.550 6.结果表明,利用近红外高光谱成像技术能够有效检测酿酒葡萄果皮中花色苷含量.
为了使酿酒废弃物酒糟得以重复利用，降低环境污染，该研究将酒糟作为发酵原料，对木醋杆菌（Acetobacter xyLinum M12）发酵产细菌纤维素进行工艺条件的优化。按照酒糟∶蒸馏水=1∶4 g/g的料液比过滤得到酒糟浸出液，并分析酒糟浸出液成分，以细菌纤维素产量为响应值，从葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、柠檬酸、Na2HPO4·12H2O、KH2PO4·3H2O、MgSO4·7H2O和接种量这8个影响细菌纤维素产量的因素中筛选出显著水平为95%以上的三因素，通过响应面设计对这3个因素进行响应面优化，得出产细菌纤维素数学模型的 R2为0.9734，并对数学模型进行了理论分析。研究表明：影响细菌纤维素产量的三因素的影响主次顺序依次为葡萄糖、接种量、柠檬酸，产细菌纤维素的二阶回归模型（P=0.0001）高度显著，决定系数R 调整2=0.9392，在此基础上得到的最优的培养基配方为：每1 L酒糟浸出液加入葡萄糖23 g，蛋白胨25 g，酵母粉25 g，柠檬酸4.5 g，Na2HPO4·12H2O 2g，KH2PO4·3H2O 1g，MgSO4·7H2O 0.2g，接种量8%，发酵温度30°C，培养周期7 d，得到细菌纤维素的预测产量为14.42 g/L。通过验证分析在此条件下细菌纤维素产量为14.44 g/L与预测值(14.42 g/L)吻合度较高，相对误差为0.14%，比优化前(6.0 g/L)提高了140.6%，研究结果为实现酒糟的综合利用提供参考。
我国90％酿酒葡萄栽培区域冬季需要埋土防寒,制约了葡萄与葡萄酒产业的发展,且不利于干旱半干旱地区的生态环境保护.本研究旨在比较不同越冬措施对葡萄品质的影响,为可代替越冬保护措施的研发提供参考.试验以“爬地龙”栽培模式的‘赤霞珠’葡萄为材料,进行了埋土防寒不挂枝和喷施可降解液态地膜加挂枝(免埋栽培措施)两种处理,分析不同越冬措施对越冬后葡萄产量与品质的影响.结果表明,免埋栽培措施延迟了葡萄的萌芽日期,对葡萄皮与籽中的各酚类物质含量均具有有利影响,提高了葡萄皮中总黄烷醇、总酚、总单宁及总花色苷的含量.并且免埋措施可降低越冬成本,提高葡萄产量,增加经济效益.