柯萨奇病毒B3型VP1基因在酿酒酵母中的表达

目的在酿酒酵母AH109中表达柯萨奇病毒B3型VP1基因,并检测VP1蛋白对报告基因的转录自激活作用.方法用乙酸锂法将重组柯萨奇B3病毒VP1基因的细菌-酵母菌穿梭载体pGBKT7-VP1转化酵母菌.通过表型鉴定、PCR法验证质粒导入宿主菌后,Western blotting验证VP1蛋白的表达,最后经营养缺陷培养基和酶底物X-α-Gal反应检测VP1基因对报告基因的转录自激活作用.结果表型鉴定和PCR法均证实pGBKT7-VP1质粒转入酵母菌成功,Western blotting证实AH109能表达VP1蛋白,营养缺陷型培养基和酶底物X-α-Gal反应结果显示VP1蛋白对3种报告基因均无转录自激活作用.结论柯萨奇病毒B3 型VP1蛋白可作为酵母双杂交系统的诱饵蛋白,为筛选与其相互作用的宿主细胞蛋白提供了基础.
为提高啤酒的抗氧化力以及改善其风味稳定性,研究糖化工艺对麦汁总酚含量和抗氧化力的影响.结果表明:糖化过程中,麦汁的总酚含量、DPPH自由基清除活性和还原力总体呈增加趋势.适当提高蛋白质休止温度,延长休止时间,可显著提高终麦汁的总酚含量与抗氧化力.糖化温度与时间对麦汁总酚含量和抗氧化力影响显著,其中糖化时间较温度的影响大.此外,总酚含量与麦汁抗氧化力评价指标之间具有显著的正相关性,说明酚类是麦汁的主体抗氧化物质.这些结果均表明糖化阶段麦汁中抗氧化物质是从麦芽中逐渐释放,而非生成的.本文为改进糖化工艺,提高麦汁的抗氧化力提供了理论依据.
目的 :观察酒客乐对酒精性肝损伤大鼠血清微量元素含量的影响.方法 :用白酒,吡唑,橄榄油的混合液制成酒精性肝损伤模型 ,酒客乐冲剂为防治用药 ,观察血清微量元素Cu,Zn,Se及Mn含量的变化.结果 :与正常组比较 ,肝损伤组血清Se,Cu,Zn含量下降 (P 0 0 1或P 0 0 5 ) ;而防治组血清Se,Cu,Zn含量得以回升 ,其中Zn含量升至 3 2± 0 2 4ug ml,明显高于损伤组 (P 0 0 1).结论 :酒客乐可通过补充酒精性肝损伤大鼠某些血清微量元素含量间接发挥清除自由基 ,稳定生物膜的作用
金属耐受蛋白MTP(metal tolerance protein)是阳离子转运蛋白(CDF)家族的重要成员，在植物重金属转运过程中发挥重要调控作用。本研究以中茶108茶树为试验材料，通过RT-PCR和RACE方法克隆到茶树重金属耐受蛋白基因CsMTP11(GenBank登录号为KX450265)，其全长cDNA为1197bp，编码398个氨基酸残基，其编码蛋白分子量为44.85kD，等电点为5.34。在线软件分析表明，CsMTP11蛋白具有5个跨膜结构域，且含有CDF家族的其他保守结构域。系统进化树分析结果表明，茶树CsMTP11与葡萄VvMTP11进化同源性最近，其氨基酸序列相似度高达90%。基因表达模式分析表明，CsMTP11基因在茶树老叶中的表达量最高，根中的表达量最低，另外，CsMTP11基因受重金属Mn和Co离子胁迫诱导表达。CsMTP11-YFP融合蛋白在拟南芥原生质体共定位试验表明，CsMTP11-YFP融合蛋白定位于质膜。CsMTP11在酿酒酵母及其突变株中的异源表达可以提高其对重金属Mn和Co离子的耐受性。综上所述，茶树CsMTP11属于Mn-CDF亚家族，可能参与茶树对重金属锰和钴的转运过程。
分别以大叶尾张蜜柑澄清果汁及带渣果汁为原料,接种酿酒酵母后以固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分别分析酿造7、14、21、28、35d后果酒中的挥发性风味物质,并采用气相色谱-质谱-嗅觉测量法描述化合物的气味性质并确定气味强度.结果表明:澄清果汁组及带渣果汁组中分别检测出78种及76种,主要包括烃类、醇类、醛类、酮类、酯类、酸类;其中酯类是最主要的风味物质,占总量的60％以上,其次是醇类物质,二者在整个过程中均占总量的80％以上.其中,辛酸乙酯、癸酸乙酯及正己酸乙酯是主要的酯类化合物;苯乙醇及1-戊醇是含量最多的高级醇类,在酿造过程中分别呈现降低和升高的趋势,澄清果汁组及带渣果汁组在酿造35 d后含量分别为10.72、59.58 μg/L和8.75、83.17 μg/L.采用气相色谱-嗅觉测量法结合质谱检测技术得出,2种不同原料对果酒的挥发性风味物质有重要的影响:以柑橘澄清果汁为原料的果酒香气做出主要贡献的特征香味的物质主要有7种,分别为甲酸异戊酯、正己酸乙酯、D-柠檬烯、苯乙醛、苯乙醇、辛酸乙酯、癸酸乙酯,占总量的68.04％;而对于以带渣果汁为原料的果酒中,分别是丙烯酸2-乙基己酯、正己酸乙酯、苯乙醛、辛酸乙酯、苯乙醇、癸酸乙酯,占总量的48.10％,略有差异.
本文结合南水北调中线工程初步设计方案及在冬季输水运行的防凌要求,根据南水北调工程中线沿线各地区的多年气候、邻近河道冰情实测资料的统计,分析并得出了沿线各渠段地区的气候、邻近河流冰情的变化与特征.应用一维热平衡方程对三个不同气温典型年即冷年、平均年、暖年,以出库水温和邻近渠道表面温度为初始条件和边界条件,模拟干渠郑州至北京段沿程的水流温度变化,预测冰花起始时间、冰流量、冰盖形成及冰盖厚度.估算出沿程各河段主要断面过冰能力、预测各渠段的冰塞发生位置,冰盖形成及稳定性和冰下过流能力,阐明了在寒冷地区冬季输水防凌的必要条件和可行性.研究并提出了冬季输水的防凌害初步运行方案及防凌措施.