酿酒酵母RAVE复合物的155kD亚基Rav1p的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化

以酿酒酵母基因组DNA为模板,根据CenBank上公布的酿酒酵母Ravlp基因(rav1)序列和表达裁体特性设计 特异性引物,PCR扩增得到4 074 bp的DNA片段,将PCR产物和原核表达栽体pET28a(+)同时进行双酶切；双酶切后的PCR产物和表达栽体进行连接,构建成重组质粒pET28a-ravl.再将pET28a-ravl转化到BL21( DE3)感受态细胞中.经IPTG 16℃低温诱导40h表达His-tag融合的Ravlp.诱导后的菌体进行超声波破碎,然后用GE healthcare公司的AKTA蛋白纯化仪和His Trap HP I mL亲和层析柱纯化目的蛋白.SDS-PAGE电泳分析和Western blot分析显示在155 kD有明显的条带,成功实现了Ravlp在大肠杆菌中的表达纯化.
以17个不同产地的红缨子高粱样品和8个其他酿酒高粱品种为样本,采用双流动相梯度洗脱(A相为0.1％甲酸溶液,B相为乙腈,柱温25℃,检测波长288 nm,流速0.5 mL/min),建立基于多酚类化合物的高效液相色谱指纹图谱,并进行相似度评价、聚类分析与主成分分析.相似度分析显示,17批红缨子高粱间具有极高的相似度(＞0.97),而其余酿酒高粱品种与红缨子高粱的相似度均低于0.90.在聚类分析和主成分分析中,红缨子高粱在判别距离为5时大部分聚为一类,得以与其他品种酿酒用高粱区分开.通过多酚类化合物高效液相色谱的指纹图谱技术能方便、高效地实现红缨子高粱与其他酿酒高粱品种的差异识别,可为红缨子高粱原料的品质监控提供指导和依据.
益生菌具有促进动物生长、提高机体免疫能力等生理功能,常用作微生态饲料添加剂.菌体SFU-9是一株蜡状芽孢杆菌,该菌株在不利环境下能够以孢子形式存在,具有耐高温、耐酸碱和耐挤压等优点,较乳酸菌、酵母菌等益生菌更能保持活菌状态,适合饲料加工业的需要.该研究以菌株SFU-9进行实验,研究发酵温度、接种量、培养基初始pH值、溶解氧等因素对菌株生长的影响,确定出最佳培养条件为:培养基初始pH值为6.0～6.5,接种量5%(相对摇瓶装液量),培养温度30～32℃,装液量28～33 mL/250 mL.发酵液中的活菌数可达1011 cfu/mL.在此基础上,采用单因子和正交实验相结合的方法,确定出最佳发酵培养基组成为:玉米淀粉2.0%,啤酒酵母1.5%,NaH2PO4 0.2%,Na2HPO4 0.2%,玉米浆2.0%.以最佳培养基配方给菌体提供营养,在最佳培养条件下培养,可以使发酵液中的活菌数高达1012 cfu/mL.
为了比较准确的掌握冰蓄冷空调系统中封装式蓄冰单元蓄冰量随时间的变化关系,以便有效地对冰蓄冷空调系统进行控制,将灰色控制理论有效地应用于冰蓄冷空调蓄冰时间的预测,建立了GM(1,1)基础模型,修正模型,建立拓扑模型并编制了相应的计算程序,实例计算结果表明:修正模型生成数列和拓扑模型生成数列准确性较高,利用其能够高效、准确地完成对达到某蓄冰厚度所需时间的预测,从而为有效控制冰蓄冷空调系统的运行提供可靠依据.
本发明公开了一种多粮食清香型白酒及其制备方法，属于酿酒技术领域。解决现有技术中清香型小曲酒存在风味不足，绵甜不足的问题。一种多粮食清香型白酒，是由下列重量份的组分组成：苦荞65～75%、大米1～10%、糯米2～12%、高粱3～13%、玉米1～10%、豌豆1～8%、胡豆1～7%，本发明还提供了上述多粮食清香型白酒的制备方法。本发明的白酒采用7种粮食酿造而得，故而乙酸乙酯和乳酸乙酯含量较高，杂醇油含量较低，其清香风味很浓，绵甜醇厚的回味更佳。
采用3个不同类型的糯大麦品种(二棱裸粒糯大麦、二棱皮粒糯大麦、多棱裸粒糯大麦),通过实验室模拟川法小曲酒生产工艺以及酒厂生产试验,与四川酿酒生产中常见谷物原料糯高粱、粳高粱、稻谷、普通青稞相比较,研究糯大麦酿制白酒的特性.结果 表明,糯大麦比稻谷、粳高粱和糯高粱吸水快,饱和含水量高,蒸粮时间短,节能约50％,出酒率高,酒质和口感具有本作物酿酒风味特点;糯大麦与非糯性普通青稞酿酒品质相当,但出酒率以及酒中的总酸和总酯含量较高.糯大麦是适合生产清香型小曲酒和青稞白酒的一种新型酿酒原料.