果糖基转移酶在酿酒酵母中异源表达及酶学性质分析

采用RT-PCR方法,获得编码黑曲霉YZ59果糖基转移酶的基因fwt,并在酿酒酵母中实现了异源表达.发酵48 h后,果糖基转移酶最高酶活力可达19.8 U/mL.纯化后,测定分析了果糖基转移酶的酶学性质.结果显示,果糖基转移酶FWT的最适湿度为55℃,在低于50℃稳定.果糖基转移酶FWT的最适pH为5.5,稳定pH范围为4.0～9.0.果糖基转移酶FWT的Km和Vmax分别为169.5 g/L和0.7 g/(L· min).Ni2+和Mg2+可显著激活果糖基转移酶FWT.
为研究竖直管道内冰浆流体流动特性,采用基于颗粒动力学理论的两相流双流体模型,通过CFD模拟研究了竖直管道内冰浆流体的等温流动过程.结果表明,在竖直管道内冰浆湍流输送过程中,流速沿管道中心轴线处近似呈对称分布.当冰浆流速较低时,管道截面处冰粒子的速度分布梯度较小,浓度分布趋于均匀,而随着冰浆流速升高,冰粒子的流场及浓度场均呈现出一定的梯级分布:管道近壁面处冰粒子浓度较低,而管道中心处冰粒子浓度较高,并在略偏于管道中心轴线位置处冰粒子浓度达到峰值.竖直管道内冰浆流体的流向变化对速度分布影响较弱,但对冰粒了浓度分布会产生一定影响,进而使得冰浆流体的管道压降在不同流向时存在着一定差异.
目的 研究酒精或扶舒清湿化面罩氧疗佐支气管肺炎患儿的临床效果,对比两者优劣性,并探讨不同年龄段宜选择的最佳酒精浓度.方法 选择2013年3月～2015年3月本院收洁的0-3岁196例经面罩氧疗的支气管肺炎患儿作为对象,随机分酒精组、扶舒清组各98例,其中酒精组又分不同浓度的三个组:20％(n=32)、25％(n=32),30％(n=34),观察并记录两种氧疗方法的有效率、显效率,分析其临床效果.结果 洒精组优于扶舒清组,P＜0.05,差异具有统计学意义;酒精组间对比无显著性差异,P＞0.05,无统计意义;酒精组不良反应发生率为2.04％.结论 本次研究分析可知,支气管肺炎患儿经面罩氧疗者其临床效果酒精组优于扶舒清组且不良反应发生率极低,不同年龄段宜选择的最佳酒精浓度:0～1岁20％,1～2岁25％,2～3岁30％.
目的 了解念珠菌性阴道炎患者疾病进展过程中阴道常见真菌分布的变化特点.方法 采用荧光定量PCR技术检测健康女性(H组)、单纯性念珠菌性阴道炎患者(SVC组)、复发性念珠菌性阴道炎患者(RVC组)阴道常见真菌菌种,分析真菌菌种分布与病程发展的关系.结果 RVC组白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌的真菌数量较SVC组和H组都显著升高(均P＜0.001),克柔念珠菌和酿酒酵母菌的数量仅显著高于H组(P＜0.05),而与SVC组比较无统计学差异.SVC组白色念珠菌、光滑念珠菌和克柔念珠菌的真菌数量较H组显著升高(均P＜0.05).白色念珠菌是各组研究对象阴道标本中检出率最高的菌种.RVC和SVC组白色念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌的阳性检出率都显著高于H组(均P＜0.05),而前两组之间光滑念珠菌和近平滑念珠菌的检出率存在统计学差异(P＜0.05).RVC组非白色念珠菌比例较其他两组显著升高(P＜0.05).结论 念珠菌性阴道炎患者阴道常见真菌菌群结构发生显著改变,荧光定量PCR技术的应用有助于念珠菌性阴道炎的快速诊断和正确治疗.
为提升野生毕赤酵母菌株BY-1产谷胱甘肽的能力，通过常压室温等离子体（atmospheric and room temperature plasma，ARTP）诱变技术得到诱变菌株BY-1-26。进一步在摇瓶培养过程中添加1,2,4-三氮唑，提高诱变菌株产量。最后将1,2,4-三氮唑作为筛选因子，利用微生物微液滴培养（microbial microdroplet culture system，MMC）仪对诱变菌株进行适应性进化，获得了1 株高产谷胱甘肽的突变株BY-2-24，并对其遗传稳定性进行研究。结果表明：出发菌株BY-1经过ARTP诱变处理、抗性梯度平板初筛、MMC适应性进化、摇瓶复筛等，可以选育高产谷胱甘肽突变株。突变株BY-2-24摇瓶产量达（312.13±2.62）mg/L，较出发菌株提高134.26%，且经过7 次传代培养，仍然具有较好的遗传稳定性。同时，生物量提高118.33%，表明诱变菌株的生长能力得到提高。研究表明，ARTP与MMC联合应用作为一种简便高效的微生物诱变方式，可用于定向诱变筛选高性能微生物菌株，为高通量选育目标菌株提供了参考。
使用存储式温度记录仪记录发酵过程中酒醅温度变化规律,并比较季节及环境温度、地缸周边土壤对酒醅温度的影响.发现酒醅温度整体趋势符合发酵工艺要求.冬季地缸中同一位置酒醅温度发酵过程中温度变化较夏季小.地缸周边土壤对酒醅温度影响较大,越接近地缸壁酒醅温度越低.酒醅温度通过影响酒醅理化指标而直接影响白酒质量.测定地缸中不同测温点酒醅中还原糖、酒度、淀粉、酸度等理化指标值,发现酒醅温度高的地方还原糖、酸度、酒度越高,淀粉含量越低.该研究为设计白酒机械化发酵设备提供了借鉴.