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突变野油菜黄单胞菌α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的整合表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-17 阅读:232
用定向进化的一种新方法,对野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)的α-淀粉酶基因(XAMY)进行PCR体外诱变后获得了一个编码的酶活性提高的突变基因,将其克隆到由rDNA序列介导的酵母整合型表达载体pHBM368上,得到重组质粒pHBM368XA.将pHBM368XA转化酿酒酵母S.cerevisiae INVScⅠ,获得了整合型分泌表达α-淀粉酶的酵母重组菌株XA01.对选择的3个工程菌α-淀粉酶表达的稳定性进行了检测,结果表明在完全培养基中连续培养80代,淀粉酶的酶活性仍然保持稳定.在淀粉酶自身信号肽引导下,胞外分泌效率可达50%.
以酿酒葡萄'赤霞珠'为试材,将其分为正常浆果、皱缩浆果、正常与皱缩混合浆果,研究浆果皱缩对葡萄和葡萄酒质量的影响.结果表明:浆果皱缩会使'赤霞珠'葡萄及葡萄酒中糖、酸含量显著增加;但对花色苷产生负面影响;皱缩会降低葡萄果实中单体酚的含量,但增加了葡萄酒中单体酚的含量和种类.与正常果实相比,皱缩浆果酿成的葡萄酒中乙酸乙酯、乙酸、1-己醇、苯甲醇和(E)-3-己烯-1-醇含量显著提高,具有更为突出的香脂味、果香味和果脯味;对混合果实进行清汁发酵,葡萄酒中的丁二酮、苯甲醛、辛酸乙酯、(Z)-2-己烯-1-醇和1-十二烷醇含量显著提高,具有较为突出的奶油味和花香味.
利用HPLC法,检测了两种蓝莓人参保健酒中主要人参皂苷Rg1、Rc、Rb2和Rd的含量.结果显示:蓝莓酒中添加人参的保健酒和蓝莓配制酒添加人参的保健酒中的Rg1和Rd含量没有显著性差异,而后一种保健酒中的Rc和Rb2含量则均显著高于前一种保健酒中的;本研究所用的检测方法可准确分析两种蓝莓人参保健酒中的主要人参皂苷含量.
为探索啤酒生产废水综合利用的方法和途径,采用液体发酵的方法,从7个酵母菌株中筛选出既能产微生物油脂和菌体蛋白,又能有效降解COD的菌株.考察了优良酵母菌株的发酵周期,并对其所产油脂的脂肪酸组成和菌体蛋白的氨基酸组成进行分析.结果表明:6#菌株——Trichosporon porosum D02、1#菌株——斯达油脂酵母Lipomyces starkeyi 1809对废水的资源化利用程度最高,6#和1#2个优良酵母菌株在发酵120 h时的油脂产量、菌体粗蛋白产量、COD降解率分别达到8.93 g/L、6.1 g/L、89.09%和4.62 g/L、4.42 g/L、81.47%.2个优良酵母菌株所产油脂的脂肪酸组成均以C16和C18系为主,含量最高的为油酸(C18∶1)和棕榈酸(C16∶0),不饱和脂肪酸指数(IUFA)分别达到80.33%和61.57%.除脯氨酸未检出外,2个优良酵母菌株菌体蛋白均含有17种氨基酸,其中8种必需氨基酸占氨基酸总量的比例分别为44.14%和44.23%,可完全充当动物蛋白饲料.
目的:观察醒脑开窍针刺法联合冰刺激对中风患者吞咽障碍的疗效.方法:60例患者按完全随机化法分为针冰组及针刺组.针刺组接受基础神经内科治疗及醒脑开窍针刺法治疗,针冰组在此基础上联合冰刺激治疗.两组患者于治疗前后进行标准吞咽功能评分(SSA)、采用洼田饮水试验进行疗效评价、吞咽等级评分.结果:针冰组总有效率93.3%,针刺组总有效率67.7%,针冰组总有效率明显优于针刺组(P<0.05);两组患者治疗后SSA评分均明显改善(P<0.05),针冰组SSA评分改善明显优于针刺组(P<0.05);两组患者吞咽等级评分均下降(P<0.05),且差异有统计学意义(P<0.05).结论:醒脑开窍针刺法联合冰刺激治疗中风后吞咽障碍确有疗效,吞咽功能可得到显著恢复,其效果优于单纯醒脑开窍针刺法治疗.
结合上海华为基地冰蓄冷系统的实例,主要介绍了外融冰系统的特点及设计要点,重点对主要设备的选型、施工及运行进行了分析.本项目通过冰蓄冷技术移峰填谷,减少制冷主机的开启容量,降低运行费用,节能效果十分显著.

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