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产纤溶酶菌株的分离和鉴定及纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-13 阅读:961
目的:从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,实现纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达.方法:通过纤维蛋白平板法从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定该菌株;通过PCR扩增豆豉纤溶酶基因,构建pYES2-DFE重组质粒,转化酿酒酵母H158感受态细胞,经β-半乳糖诱导表达后,用纤雏蛋白平板法分别检测发酵液上清和菌体破碎上清的纤溶酶活性.结果:鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);活性检测结果是酿酒酵母发酵液上清具有纤溶酶活性,而菌体破碎上清没有活性.结论:豆豉纤溶酶基因在酿酒酵母中实现了分泌表达.
观察啤酒花超临界CO2浸膏、β-酸和六氢β-酸对糖尿病小鼠血糖的调节作用.对四氧嘧啶复制的糖尿病小鼠的动物模型进行为期1w的啤酒花超临界CO2浸膏、β-酸和六氢β-酸的高、低剂量(30、15mg/kg)组和阳性药物格列本脲片灌胃治疗,观察小鼠的糖尿病"三多一少"的症状和治疗前后血糖和精耐量的变化.与模型对照组相比,治疗组糖尿病小鼠的"三多一少"症状得到明显地改善,治疗前后血糖和糖耐量的变化结果表明,超临界CO2浸膏和β-酸的高剂量组治疗后的血糖值与正常组(p>0.05)无明显差异.对治疗后小鼠的血糖值采用单一自由度正交比较的方差分析表明,正常组小鼠的血糖值与模型组有极显著的差异,模型对照组与治疗组之间也具有非常显著的差异(p<0.01):在各治疗组之间,灌胃优降糖片的小鼠的治疗效果与灌胃不同剂量的β-酸、六氢β-酸和超临界CO2浸膏样品的小鼠的总体治疗效果相当(p>0.05).啤酒花超临界CO2浸膏、β-酸和六氢β-酸对小鼠糖尿病症状均有一定的治疗作用,该作用与灌胃样品的剂量呈正相关关系.
以制备的小麦澄清蛋白处理樱桃酒,通过测定澄清前、后理化性质和稳定性的变化来分析小麦澄清蛋白对樱桃酒的澄清效果.结果表明:用50 mg/L的小麦澄清蛋白处理樱桃酒后,其浊度与澄清前相比降低了71.64%;总酚质量浓度和黄酮质量浓度与澄清前相比差异不显著(P>0.05);酒精体积分数、pH值、色价值、花色苷质量浓度、总糖质量分数和总酸质量浓度与澄清前相比变化不大.与明胶、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠相比,经小麦澄清蛋白处理的樱桃酒先于其他3 种澄清剂在139 h时达到最低浊度2.07 NTU并保持不变.用明胶作澄清剂,樱桃酒中总酚减少量最多,减少35.37 mg/L;用聚乙烯吡咯烷酮作澄清剂,色价值降低最高,降低0.30;用羧甲基纤维素钠作澄清剂,花色苷减少量最多,减少0.49 mg/L.小麦澄清蛋白处理樱桃酒的最佳条件为:小麦蛋白用量50 mg/L、搅拌速率800 r/min、搅拌时间120 min.小麦澄清蛋白具有澄清效果好、澄清速率快、安全无毒、成本低等优点,对樱桃酒的工业生产和延长货架期具有重要意义.
研究了生料发酵剂组成,料水 比,加曲量,酸度,温度等对白酒出酒率的影响.采用单因子实验和正交实验法对发酵剂配方和发酵工艺条件进行了优化 ,得到发酵剂最佳配方为 :糖化酶 73% ,淀粉酶 10 % ,蛋白酶4 % ,纤维素酶 5 % ,耐高温活性干酵母 8%.以玉米为原料 ,最佳发酵条件为加曲量 1.0 % ,料水比 1:3,发酵温度 30℃ ,发酵周期 16d ,原料出酒率 82 % (4 8度 ).
本发明涉及菠萝白酒及其酿制工艺。采用的技术方案是:将粮食和菠萝、辅料稻壳按重量比称出,搅拌后放入酒锅中,在95-105℃温度下蒸10-15min取出,冷却至18~22℃加入多粮匣曲,将混合料放入发酵窖中,分两次发酵,每次发酵周期为10天,发酵后的物料重新放入酒锅中加热蒸馏出酒。本发明用的菠萝营养价值高,酿制出的白酒更加醇香,感官指标达到清亮透明,果香突出醇和行愉,香甜适口,具有菠萝白酒特有的香型,因而满足了人们对于果粮合制,既具有果香绵长,回味果香,又营养丰富的白酒的需要,丰富了白酒的品种。
探究非酿酒酵母和酿酒酵母在混合培养时的接种顺序对酵母生长及风味物质的影响.采用柠檬形克勒克酵母和酿酒酵母混合同时、混合顺序,以及其单独发酵的方式进行脐橙全果酒的酿造,通过顶空固相微萃取-气质联用技术及主成分分析法对酒中的风味物质进行分析和比较.4种脐橙全果酒中共检测出38种香气成分,包括醇类9种、酯类11种、萜烯类9种、酮和酚5种,其中萜烯类所占比例最大(30%以上).混合顺序发酵酒中风味物质种类和含量均最高(37种,21.957 mg/L),混合同时发酵酒次之(35种,20.704 mg/L),且混合发酵酒中酯类和萜烯类显著高于单独发酵.采用混合顺序发酵的方式,使风味物质得到了改善,所得脐橙全果酒香气更浓郁,为酿造品质更佳的脐橙全果酒提供理论依据.

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