球等鞭金藻中Δ5去饱和酶基因的克隆与功能鉴定

球等鞭金藻(Isochrysis galbana)是一类单细胞海洋微藻,富含二十二碳六烯酸(DHA,22:6Δ4,7,10,13,16,19).我们利用RACE 的方法从球等鞭金藻cDNA 文库中同源克隆到一个大小为1329 bp 的cDNA 片段,编码442个氨基酸的多肽,分子量约49.9 kD.生物信息学分析表明,其编码产物N 端具有细胞色素b5 结构域,以及与电子传递有关的三个富含组氨酸的结构域,与Pavlova salina Δ5 去饱和酶同源性最高,达56%,故将该基因命名为IgD5.酿酒酵母功能鉴定实验表明,其编码的蛋白质具有Δ5 去饱和酶活性,能够将二高-γ-亚麻酸(DGLA,20:3Δ8,11,14)转化成花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14),转化效率平均为34.6%,最高可达40.3%.
在100升啤酒生产设备上,分别进行了用挤压膨化大米与未膨化大米为辅料生产啤酒的对照试验,探讨了挤压膨化大米辅料生产啤酒的可行性和优越性及麦汁发酵过程的特点.结果显示用挤压膨化大米辅料生产啤酒较传统方法有较大的优势.
SNF4基因编码的Snf4p具有调节Snf1复合体的蛋白激酶活性功能,根据已知的SNF4基因序列设计引物扩增获得S.cerevisiae YS2的SNF4基因完整序列.序列分析表明,SNF4基因的开放阅读框为969bp,编码322个氨基酸残基.应用生物信息方法预测其理化性质、疏水性、信号肽、亚细胞定位、活性位点及其高级结构.结果表明:Snf4p为具有一定亲水性的非跨膜胞内稳定酸性蛋白,功能结构域为CBS_pair superfamily结构域,二级结构主要由a-螺旋组成,空间结构是由4个CBS结构域构成两个CBS对围绕形成的二聚体.Snf4p的第一个CBS对区域的β片层结构是Snf1p、Sip2p的β发夹结构结合作用区.
目的:探讨葛洪《肘后备急方》酒方的应用.方法:从酒的种类、应用方法、作用及应用特点等方面对《肘后备急方》中酒方进行分析总结.结果:《肘后备急方》中所用之酒均为米酒,所载酒方既有内服又有外用,其中内服法包括直接酒疗法、以酒送药法、以酒制药法,外用法包括滴鼻、滴耳、外敷、外涂、外洗、洗浴、浸洗、熏洗、热熨等方法.制备工艺特点方面以热浸法的应用较为突出,其“先进”的装置设计,至今仍有应用;服药特点方面注重温凉有别,缓急有度;用药特点方面则主张少而精,量大而力专.结论:《肘后备急方》中酒的应用,内容丰富,论述独到而精细,在中国传统医药学中起到了承前启后的作用,值得进一步研究.
以酿酒酵母为模式真菌,研究不同致死浓度ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine,ε-PL)及其外源添加抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)共同作用下,细胞生长密度、形态和活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的变化及其对酿酒酵母活性的影响.结果 表明,亚致死浓度处理的细胞不光滑并凹陷,ROS迸发,出现磷脂酰丝氨酸外翻、染色质固缩、线粒体膜电位耗散和DNA损伤的荧光特征,细胞进入凋亡早期阶段.致死浓度处理的细胞粗糙凹陷并凸起,ROS减少,荧光特征明显,细胞进入凋亡后期阶段甚至死亡.添加NAC后,ROS减少,荧光特征降低.因此,说明ε-PL能够诱发ROS上升,使细胞进入凋亡阶段,抑制细胞活性,此外,NAC能够降低ε-PL的抑菌活性.
杨梅果酒是不稳定性胶体溶液,为提高其澄清度和稳定性,采用超滤膜过滤的方法,进行了单一中空纤维膜工艺和组合式中空纤维膜工艺澄清杨梅果酒的研究。以超滤压力、时间、温度和料液流速为影响因素,探讨超滤工艺条件及膜处理方式对杨梅果酒的澄清效果和品质的影响。结果表明：在温度为28℃,压力为0.08MPa,料液流速为6L/h下,用分子截留量为80000u与50000u的组合式中空纤维膜处理后得到的杨梅果酒色度值A520为0.301,澄清度T680为96%,膜通量为25L/（m2.h）,蛋白质与单宁含量明显减少,且总酸、总糖、酒精度等含量几乎无变化。