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大豆GmTIP1;1基因的克隆与表达分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-08-03 阅读:658
利用RT-PCR方法从大豆根部组织获得Glyma03g34310.1开放阅读框(ORF)全长,经测序验证、Blast比对与同源性分析发现该序列编码的蛋白质与其他植物的 TIP1;1蛋白具有较高的相似性,故命名为 GmTIP1;1基因(GenBank登录号为AK285481),该基因ORF长753 bp,编码1个包含250个氨基酸的蛋白,在ORF内部第381个核苷酸处含有1个94 bp的内含子,符合↓GT--AG↓的剪接方式;系统进化树分析发现GmTIP1;1聚类到豆科植物分支,其他不同科的植物也有规律地聚到了不同分支,推测该蛋白氨基酸序列可以作为植物分类的依据之一;半定量RT-PCR结果表明该基因在大豆的不同器官、不同器官的不同发育阶段均具较高且同等的表达水平,暗示该基因在植物的整个发育进程中均具重要作用;在盐胁迫的不同时间点其表达量有下降的趋势,但仍然保持较高的表达水平;以pYES2为酵母表达载体,转化酿酒酵母INVSc1菌株,获得重组酵母INVSc1(pYES2-GmTIP1;1),转化菌株在盐胁迫下的存活率明显高于对照INVSc1(pYES2),而在干旱胁迫下则没有显著差异,表明该基因的表达能有效地提高酵母的耐盐性.
用播前和拔节期土壤矿质氮含量(Nmm)以及拔节期植株No3--N含量可作为啤酒大麦氮肥推荐施用的指标.0~100cm土层NO3--N含量变化趋势逐渐下降,NH4+_-N变化不明显.不论施肥水平高低,还是土层深度不同,Nmm含量与NO3--N含量变化非常一致,且NO3--N含量占Nmm总量的70%~92%.氮肥施用量与拔节期植株NO3--N含量变化具有较好的一致性.高、中、低产栽培下,获得最高产量的氮肥施用量分别是249kg/hm2、324kg/hm2、182kg/hm2;同时,获得最高产量的拔节期植株NO3--N测试值分别是1706mg/kg、2045mg/kg、1733mg/kg.
基于酿酒酵母中已经报道的3个典型GPCR序列,利用Blastp以及关键词对炭疽菌蛋白质数据库进行比对、搜索,通过SMART保守结构域及遗传关系分析.结果表明:发现该菌存在4个典型的GPCR;4个GPCR在蛋白质二级结构上均含有典型的7跨膜结构域以及较高比例的α螺旋结构,均不含有明显的信号肽序列;在定位方面,4个GPCR均定位在质膜上;该菌中的GPCR与C.higginsianum、C.fioriniae等炭疽菌属中的病菌具有较高的同源序列以及较近的亲缘关系.
本试验调查了元谋野生毛葡萄(V.quinquangularis Rehd.)的生物学特性,并以欧亚种坦娜葡萄(tannat)为对照,进行常规指标、功能性成分和感官分析,以研完其酿酒特性.结果表明,元谋野生毛葡萄植株生长势强,花期4~5月,果期5-9月,果粒圆,果皮蓝黑色;野生毛葡萄酒的总酚和原花青素含量较高,酒体呈深紫红色,果香浓郁,酸度适宜,结构性强,但酒精度低.元谋野生毛葡萄是酿造红葡萄酒的特色原料,具有很大的开发潜力.
本发明公开了一种白酒生产加工用过滤装置,涉及白酒过滤技术领域,包括过滤箱,所述过滤箱的内部设置有第一滤层、第二滤层和第三滤层,所述第一滤层、第二滤层和第三滤层的两端均与过滤箱的内壁固定连接,所述第一滤层包括过滤板、第一定位装置和第二定位装置。该白酒生产加工用过滤装置,通过第一定位装置和第二定位装置能够使过滤板固定在过滤箱的内部,第一定位装置和第二定位装置之间的配合设置,能够使过滤板便于拆卸,解决了不便于清洗和更换的情况,第一滤层、第二滤层和第三滤层之间的配合设置,提高了过滤效果,保证了白酒的口感和质量。
本发明是一种白酒酿制增香新方法,该方法包括现有的原料预处理、制曲、发酵、蒸馏步骤,其特征在于至少在原料预处理步骤、制曲及发酵步骤的任意步骤中添加脂肪酶。通过脂肪酶在特定条件下的使用,脂肪酶的酯化作用可以提高己酸乙酯的产量,可以催化生成己酸乙酯和乳酸乙酯等香味成分,提高白酒品质,同时还可充分利用脂肪酶来水解酿造粮谷原料中油脂,同时使酿造粮谷原料中的淀粉充分接触酵母,加快发酵进程,缩短发酵周期,缩短贮存老熟时间,减少周转资金,降低生产成本。

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