甘蓝型油菜烯脂酰-CoA还原酶基因BnECR的克隆及功能分析

反式烯脂酰-CoA还原酶(trans-2,3-enoyl-CoA reductase,ECR)是催化超长链脂肪酸(VLCFAs)合成的脂肪酰-CoA延长酶之一.根据已报道拟南芥ECR基因设计引物.采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)方法从甘蓝型油菜中克隆ECR的全长cDNA序列和对应的基因组序列,命名为BnECR(GenBank登录号分别为FJ899705和FJ899706).序列分析结果显示,BnECR的全长cDNA序列为1 328 bp,对应的基因组序列为2 093 bp,由4个外显子组成,在ORF的上、下游分别有一个163 bp的5UTR和一个232 bp的3q3TR.根据编码区预测BnECR前体蛋白为一个310个氨基酸残基的多肽链,包含ECR蛋白的重要功能位点K144、R145及一个NAD(P)H结合基序G225SGGYQIPR/HG234.NCBI Blastn、氨基酸序列多重比对及保守域分析表明,该基因与拟南芥AtECR基因的同源性最高,是对应拟南芥AtECR的垂直同源基因.RT-PCR分析表明,BnECR基因在甘蓝型油菜根、茎、叶、花及角果中均有表达,其中在茎中的表达量最高.BnECR在高芥酸材料种子发育中后期的表达量显著高于低芥酸种子,表明BnECR可能参与甘蓝型油菜芥酸的合成.将BnECR克隆到酿酒酵母的穿梭表达载体中,分别转化野生型酵母By4743和突变体菌株YDL015c,添加半乳糖诱导表达.气相色谱分析表明,BnECR在酿酒酵母中有效表达,转化菌株中的芥酸(C22:1)di总脂肪酸含量的1.34%.比对照增加52%;对突变体的转化结果表明芥酸含量恢复到野生型水平.
以石油化工、啤酒酿造、染料化工、机械制造、纺织印染以及焦化煤气等6种工业废水为例,探讨了催化铁内电解法预处理这6种废水前后两两1:1混合COD的消减效应.结果表明,啤酒废水与染料化工废水1:1混合,其COD消减量最大,达到36%;采用催化铁内电解法预处理时,机械制造废水的COD去除率最高,达55.6%,其次是石油化工废水和焦化煤气废水1:1组合的混合废水,COD的去除率达36.7%.
目的：筛选布鲁氏菌侵染牛胚胎滋养层细胞过程中与Ⅳ型分泌系统VirB4蛋白结合的潜在靶蛋白。方法设计引物并PCR扩增布鲁氏菌的virB4基因，构建表达载体pGBKT7-VirB4，酶切鉴定，测序分析正确后，转化酿酒酵母菌感受态细胞Y187，进行自激活和毒性检测；建立布鲁氏菌侵染牛胚胎滋养层细胞模型，构建布鲁氏菌侵染牛胚胎滋养层细胞cDNA文库；采用酵母双杂交技术筛选与VirB4相互作用的滋养层细胞蛋白，实时定量PCR检测靶蛋白表达量的变化。结果成功构建了pGBKT7-virB4诱饵质粒，转入Y187后无毒性，不能自激活；获得了布鲁氏菌侵染牛胚胎滋养层细胞cDNA文库；筛选到了13个阳性质粒，其中蛋白辅酶Q10和SLC3A2在布鲁氏菌侵染后mRNA表达量均增加。结论本试验对VirB4蛋白与宿主细胞的互作研究为进一步阐明布鲁氏菌感染宿主细胞的发病机制奠定了基础。
为了明确冰温对淡水鱼糜制品品质的影响,以鲢鱼、草鱼、鲤鱼鱼糜制品为研究对象,通过测定三者在冰温贮藏后鱼糜饼的蒸煮损失率、L*值、持水性、质构特性、硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substances,TBARS)值等指标,分析冰温贮藏过程中其品质的变化.结果表明:随冰温贮藏时间的延长,鲢鱼鱼糜制品的蒸煮损失率先降低后升高,草鱼和鲤鱼鱼糜制品呈降低趋势;3种鱼糜制品的持水性均随冰温贮藏时间的延长而降低;鲢鱼鱼糜制品的L*值和剪切力均随冰温贮藏时间的延长而降低,草鱼和鲤鱼鱼糜制品的L*值、剪切力值随冰温贮藏时间的延长呈波动的变化;3种鱼的硬度、弹性、黏聚性、咀嚼度随贮藏时间的延长而呈降低.3种鱼糜制品的剪切力值差异显著(P＜0.05),鲢鱼鱼糜制品的硬度、弹性、黏聚性以及咀嚼度显著低于草鱼和鲤鱼鱼糜制品(P＜0.05).3种鱼鱼糜制品的TBARS值均随冰温贮藏时间的延长而升高.鲢鱼、草鱼和鲤鱼鱼糜制品在冰温(-1.5±0.03)℃条件下最佳的贮藏期为3周.
本发明公开一种养生白酒的酿造方法，其特征在于，包括：选取果实饱满、且表皮无破损的金桔和苹果，洗净并将皮肉分离备用；在干酵母中加入白酒，用白酒将干酵母化开；将金桔和苹果肉粉碎，自然发酵1?10小时，然后将果浆移入发酵罐中，加入糖并搅拌均匀，然后所述化开后的酵母，发酵30～60天；发酵完成后，进行压榨、过滤，过滤后制得养生白酒半成品；将养生白酒半成品再放入发酵罐中，在19～21℃的条件下密封进行乳酸发酵1～2年，即制得所述养生白酒。该方法改良了发酵的工艺流程，最大化利用了金桔和苹果果实本身的营养成分。
在玉门市潮化灌淤土上试验观察了种植密度对啤酒大麦产量及蛋白质含量的影响。结果表明,啤酒大麦产量随着播种密度的增大呈先增加后减少的趋势,以675万粒/hm2最高,其次是750万粒/hm2。综合分析,在基施N 180 kg/hm2、P2O5 180 kg/hm2的条件下,播种密度控制在600万～705万粒/hm2范围内较好。