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酿酒酵母细胞壁诱导体外培养绵羊瘤胃上皮细胞表达SBD-1的研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-13 阅读:857
旨在探究酿酒酵母细胞壁对原代培养绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素1(Sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响.本试验首先提取酿酒酵母细胞壁,并进行鉴定;再用酿酒酵母细胞壁(0、25、50、100、200、400 μg·mL-1)刺激健康绵羊的原代瘤胃上皮细胞(0、2、4、8、12、24 h)后,进行RT qPCR和ELISA试验,确定诱导SBD-1表达的最佳浓度和时间.结果表明:1)本试验提取的酿酒酵母细胞壁成分较纯,可用于后续试验;2)体外培养绵羊瘤胃上皮细胞呈鹅卵石铺路状,符合试验要求;3)使用200μg·mL-1的酿酒酵母细胞壁去刺激瘤胃上皮细胞12h,SBD1mRNA和蛋白表达量最大,与其他组相比均差异极显著(P<0.001).综上表明,酿酒酵母细胞壁能够促进绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,且酵母细胞壁最佳浓度和刺激时间分别为200 μg·mL-1和12h.
目的:分离和鉴定羊羔美酒大曲中的酵母菌,探寻酵母菌群多样性组成,为深入研究羊羔美酒的风味特征奠定基础.方法:对羊羔美酒大曲实施多点采样、混合研磨、无菌水梯度稀释、平板画线分离、挑取酵母菌单菌落.酵母菌的形态鉴定采取菌落特征和显微细胞特征结合的方法,分子鉴定采用5.8S rDNA-ITS区域限制性内切酶片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析及序列分析法.结果:从羊羔美酒大曲中共分离出474株酵母菌,传统形态学鉴定为14种形态类型,经5.8S rDNA-ITS区域RFLP分析法区分为6种分子类型.经基因序列分析,将其鉴定为分属于6个属的6种酵母菌,分别为:异常毕赤酵母(Pichia anomala)、酿酒酵母(Saccharomyce cerevisia)、阿氏丝孢酵母(Trichosporon asahii、黏质红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、浅白隐球酵母(Cryptococcus albidus)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis).结论:羊羔美酒大曲中酵母菌多样性丰富,除酿酒酵母外,还含有多种酵母菌辅助代谢产生各种风味物质,其中酿酒酵母为主要优势菌群.
本发明涉及纳米陶瓷小球用于白酒纯化的方法。该方法是按质量份数计,将100份的纳米陶瓷小球加入到20~2000份的白酒中,在温度为30~50℃条件下,静置20分钟~240小时,然后滤去纳米陶瓷小球,得到纯化的白酒。应用该方法处理白酒,处理前后的白酒的香气和口味发生了较好的变化,躁辣、冲鼻的气味及苦、酸、涩口味有一定程度的减少,而白酒甘甜口味明显增加。而且本发明处理操作方法简单方便,所用的纳米陶瓷小球已经在市场中广泛使用,原料容易得到;市场售价低,应用于白酒纯化,成本低,尤其适合香气和口感相对较差的中低档酒的纯化处理。
对以糯米为原料,采用多菌种共固定化细胞混合技术对发酵生产稠酒进行了研究.实验结果表明,固定化多菌种发酵生产稠酒的最佳发酵工艺如下:多菌种固定化细胞接种配比量为根霉:酿酒酵母:产香酵母:红曲霉=3:1:2:1;固定化凝胶粒子充填量为8%;发酵温度为20 ℃;发酵时间为96 h.
以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到蔗糖酶基因(suc 2),并将其克隆到表达载体pSE380中,将得到的重组质粒pSE-suc 2转化进E.coli BL21中,利用镍金属螯合层析方法分析测定其酶学性质.重组菌株的SDS-PAGE结果显示重组蔗糖酶基因(suc 2)有60kDa目的蛋白出现,纯化的SDS-PAGE分析得到均一的蛋白条带;重组蔗糖酶的Km值为47.73mmol/L,最大反应速率为79.59mg还原糖mg-1蛋白min-1,最适温度为42℃,最适pH值为5.5,Zn2+、Cu2+对重组蔗糖酶酶活有较强的抑制作用,Ba2+、Mg2+、Mn2+对重组蔗糖酶酶活稍有激活作用.
本实用新型涉及一种白酒蒸馏设备,包括甑锅、位于所述甑锅底部且与所述甑锅内部连通的加热装置、锅盖、位于所述甑锅一侧且与地面固接的冷却塔、连通所述冷却塔与所述锅盖的连接管,还包括连接并连通在所述连接管和所述锅盖之间的伸缩装置、位于锅盖上方用于提起所述锅盖的提拉装置、安装在所述冷却塔内的冷却管,所述冷却管一端贯穿所述冷却塔顶部与所述连接管连通,另一端连通有一抽风机。本实用新型具有可以对加酒醅过程中挥发的酒气进行收集,从而避免了浪费的效果。

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