短乳杆菌49蛋白提取及酶解条件优化

为了最大程度上获取短乳杆菌49(Lactobacillus brevis 49)的蛋白质信息,分别优化了蛋白质的提取条件与酶解条件.用正交实验法考察细胞破碎方法、蛋白酶种类、酶解时间、酶添加量4个因素对L.brevis 49的胞内蛋白提取方法以及酶解方法的影响,以质谱中检测到的蛋白质数目为参考指标进行优化;同时对培养基氮源进行优化,并分别选用TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法、平衡酚-丙酮法和超滤法提取发酵液中的胞外蛋白.结果 表明:L.brevis 49胞内蛋白最佳的提取破壁方法为超声破碎法,最佳水解酶为糜蛋白酶和胰蛋白酶共同作用,最佳的酶与蛋白质量比为1∶50,最佳酶解时间为12h,获得胞内蛋白数目527个.获得L.brevis 49胞外蛋白的最佳培养基为0.6％酵母浸粉做单一氮源的MRS培养基,最佳提取方法为三氯乙酸(TCA)法,可获得44个含信号肽蛋白.该方法有望为啤酒的安全检测提供参考.
对酿酒酵母吸附Cu2+的生物吸附规律进行了模拟研究.结果表明,酵母添加量、溶液pH、初始Cu2+浓度和吸附时间对酿酒酵母吸附Cu2+均有较大影响.各影响因素的最优组合为:pH4.5、吸附时间150 min,初始Cu2+浓度38.10 mg/L、酵母添加量0.45 g,在此最优吸附条件下,酿酒酵母吸附Cu2+的吸附量为2.44 mg/g,吸附率达到96.2％.
本发明公开了白酒加工领域内的一种白酒的加工工艺，包括以取新鲜榴莲，将果壳、果肉、果核分离，将果壳、果核粉碎后混合成基料，将果肉冻干后粉碎得榴莲末；取新鲜山竹，分离果壳、果肉，将山竹果壳一半粉碎成末一半制成活性炭粉末后混合得滤材，将山竹果肉粉碎制得果酱；将基料、果酱与高粱混合发酵后经蒸馏得到基酒和酒醅；将榴莲末加水搅拌均匀后用超声震荡处理；将步骤Ｄ中超声处理后的溶液用脱硫剂和滤材过滤得到榴莲液；将榴莲液与酒醅混合发酵后进行蒸馏得到辅酒；将基酒与辅酒按质量比3～4.5:1进行混合制得榴莲风味白酒。采用本方案制得的白酒既具有良好的榴莲风味口感，同时含有的硫化合物量低，饮用后无燥热感，不会伤害身体。
为研究适合蜂蜜酒发酵的优良工艺条件,以2批荆条蜜(白色和浅琥珀色)为原料,在酒精发酵前对发酵醪液进行加热处理,以不加热处理的样品为对照,采用酿酒酵母FX10进行发酵,发酵结束后测定蜂蜜酒的各项理化指标及挥发性化合物的含量.结果 表明,供试酒样中共检测出77种挥发性物质,其中酯类39种、醇类20种、酸类8种、萜烯类4种、羰基化合物6种.加热处理可以显著增加蜂蜜酒中香气物质的种类和含量,含量较高的香气物质有乙酸乙酯、乙酸苯乙酯、乙酸异戊酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、月桂酸乙酯、9-十六碳烯酸乙酯、异戊醇、β-苯乙醇、辛酸和癸酸.对蜂蜜酒中香气物质进行主成分分析,发现加热处理的酒样中酯类物质对酒香贡献较大;对照酒样中酯类物质对酒香贡献较小,而醇类物质是其主要挥发性成分.本研究结果为蜂蜜酒的生产提供了一定的理论依据.
在5L发酵罐中,研究了以260 g/L葡萄糖为底物,不同通气量对酿酒酵母GGSF16高浓度乙醇发酵的影响.结果表明,与厌氧条件相比,通入适当的空气是高浓度乙醇发酵过程中重要的控制参数,能够缩短发酵时间,增加酵母细胞量,提高酵母细胞的存活率和乙醇耐受性.然而,乙醇产率与单位质量的酵母细胞消耗葡萄糖和生成乙醇的能力降低.最适通气量为80 mL/min,酵母细胞干重为14.16 g/L,发酵强度为3.93 g/(L· h),比厌氧分别提高104％和70.1％,终点乙醇浓度为117.9 g/L,乙醇产率为0.452 g/g(发酵效率87.8％).
以秋刀鱼为原料,研究白酒添加量对秋刀鱼肌原纤维蛋白(Myofibrillar protein,MP)溶解度、乳化性、浊度、表面疏水性、凝胶特性和巯基含量的影响.结果表明:随着白酒添加量的增加,MP溶解度、乳化性、凝胶硬度、弹性、咀嚼性、内聚性及保水性呈先上升后下降的趋势,凝胶白度值无明显变化;浊度、表面疏水性、巯基含量呈先下降后上升的趋势.整体来看,白酒处理对秋刀鱼肌原纤维蛋白的功能特性影响较大,且在白酒添加量为5％～7％时对凝胶特性的改善效果较好.通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳研究发现,白酒能够促进蛋白质的溶解,并使溶出的蛋白质通过聚合作用形成大分子物质.