角蝾螺精子的超微结构

用透射电镜(TEM)技术研究了角蝾螺精子的超微结构.成熟精子包括头部和尾部.头部由啤酒瓶状顶体与柱状细胞核构成.顶体内含物分布均匀,电子密度稍低于细胞核;顶体下腔呈细长管状,基部扩大成喇叭形,内有颗粒状物质分布.细胞核物质致密,电子密度高;核的前、后端都有一V字形凹陷,分别为核前窝和核后窝.尾部包括中段和末段.中段由5个线粒体围绕近、远端中心粒构成;末段细长鞭状,由中央轴丝及外包的质膜组成,轴丝为典型的"9+2"结构.比较了角蝾螺精子与相关腹足类精子结构的异同,分析了角蝾螺精子在腹足类系统演化中的地位.
基于黑曲霉CBS 513.88的基因组信息,以黑曲霉CICIM F0510为出发菌株,提取其总RNA,反转录得到cDNA,成功将其3个内切β-1,3(4)-葡聚糖酶的基因(en3gA、en3gB、en3gC)在毕赤酵母中进行了克隆与表达.获得了3个重组菌GS115(pPIC-en3gA)、GS115(pPIC-en3gB)和GS115 (pPIC-en3gC).在摇瓶水平上,这株重组菌的酶活分别为1.3、8.5和10.1 U/mL.重组酶En3 gA、En3 gB和En3gC的最适作用温度分别为65、50和55.C;最适作用pH分别为5.0、5.0和3.5.此外,3种重组酶对羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethylcellulose,CMC-Na)和凝结多糖都具有典型的内切水解作用.这3个重组β-1,3(4)-葡聚糖酶具有良好的温度和pH稳定性,可为其在啤酒制造以及饲料加工过程中的应用奠定基础.
葡萄果粒在不同振动条件下的脱粒特性,可以为葡萄振动式采摘机构的设计研发提供理论依据和技术支持.为此,研制了振动式果粒脱粒试验台,主要包括振动台、高速摄影仪和单片机控制系统.通过对葡萄果粒的正交试验,得出了果粒脱粒特性与振动频率、果粒质量及振动振幅之间的关系,并通过高速摄影分析果粒在振动过程中运动规律,进而对果粒的疲劳特性进行了分析.试验结果表明:影响葡萄果粒脱粒特性唯一显著因素为振动频率,最佳频率为4~4.5Hz;振动葡萄脱粒的最大拉力应保证大于0.2N;振动频率应该选大于4Hz,振动脱粒对葡萄果粒的作功小于0.5J.
[目的]Pbs2是MAPK信号途径HOG-MAPK通路的重要成员之一,在植物病原菌渗透压调节方面发挥着重要作用.橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)是专性寄生菌,论文借助橡胶树炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),研究橡胶树白粉病菌OhPbs2的功能.[方法]采用同源克隆方法,分别以橡胶树白粉病菌基因组DNA和cDNA为模板,PCR扩增OhPbs2;利用生物信息学分析该基因的结构域,对该基因和其他真菌的7个同源蛋白序列进行系统进化分析,并利用MEGA6中最大简约法构建系统进化树来进一步分析鉴定该基因;利用同源重组和原生质体转化技术,将OhPbs2转化到缺失Pbs2的橡胶树炭疽菌突变体ΔCgPbs2中;在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇的平板上筛选转化子,同时提取转化子的基因组作为模板,用橡胶树白粉病菌OhPbs2的引物对进行PCR鉴定,选择正确的转化子ΔCgPbs2+OhPbs2进行后续表型测定;在不同培养条件下,比较ΔCgPbs2、ΔCgPbs2+OhPbs2和野生型菌株生长状态,并在橡胶树叶片接菌检测3个菌株致病力.[结果]OhPbs2基因序列全长1927 bp,cDNA序列全长1860 bp,含有一个内含子,编码一个619个氨基酸的蛋白;生物信息学分析表明该蛋白具有与CgPbs2相同的S_TKc功能域,构建系统进化树发现橡胶树白粉病菌Pbs2蛋白与烟曲霉(Aspergillus fumigatus)Pbs2蛋白亲缘关系最近,相似度为55%,与橡胶树炭疽病菌的相似度为49%,与粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)、稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)的Pbs2蛋白具有较近的亲缘关系,相似度分别为54%、53%、53%、50%;ΔCgPbs2+OhPbs2菌株能在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇培养基上长出白色菌落,ΔCgPbs2菌株不能生长,并且测序结果显示OhPbs2已成功转入ΔCgPbs2;ΔCgPbs2+OhPbs2在MM培养基上菌落呈白色,气生菌丝较短,不同于wild type菌株.在含有不同浓度NaCl、山梨醇、SDS、H2O2及咯菌腈的MM培养基上,ΔCgPbs2、ΔCgPbs2+OhPbs2和wild type菌株随着浓度增加,菌落生长速度逐渐降低,OhPbs2不仅能恢复橡胶树炭疽菌菌株耐渗透压尤其耐受山梨醇的能力以及对咯菌腈的敏感性,甚至具有增强的能力,OhPbs2互补改变了橡胶树炭疽病菌颜色,抑制了气生菌丝生长;CgPbs2可能参与了橡胶树炭疽病菌致病性,但OhPbs2互补没有恢复其致病性.[结论]OhPbs2可能参与调控病菌的营养生长、氧化应激反应、渗透压响应及细胞壁形成等,并能增强橡胶树炭疽病菌相应功能,但与CgPbs2调控病菌致病力的机制可能存在不同.
目的 观察重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗在成人中的免疫效果.方法 对HBsAg、抗HBs、抗HBc 三项指标全部为阴性、且未接种过乙肝疫苗的162 名16 岁以上人群,按照0、1、6 的免疫程序接种10μg 重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗,于全程免疫1 个月后采血,测定血清中抗HBs 水平.结果接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗的99 人,抗HBs 阳转率为94.95%,几何平均浓度为331.08 mIU/mL;接种重组(汉逊酵母)乙肝疫苗的63 人,抗HBs 阳转率为98.41%,几何平均浓度为270.79 mIU/mL.两组间抗HBs 阳转率和几何平均浓度差异均无统计学意义(P > 0.05).接种两种疫苗均未观察到明显的不良反应.结论重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗均具有良好的安全性和免疫原性.
取祁连葡萄酒产区葡萄园原料自然发酵筛选葡萄酒相关野生酵母菌株68株,利用YEPD培养基的形态观察以及WL营养培养基的聚类分析,并结合生理生化实验对其进行初步分类,结果表明,与葡萄酒相关的野生酵母菌株有假丝酵母、有孢汉逊酵母、酒香酵母、毕赤氏酵母、红酵母以及酿酒酵母,其中有孢汉逊酵母属和酒香酵母属为优势菌株.