不同葡萄酒酵母耐受性试验比较

本文以新疆和青海葡萄产区的5株不同酿酒酵母(B-4、D-1、D-2、Q-42-2、Q-50-2)为试材,在分离纯化的基础上,对这5株酵母进行不同梯度酒精度、糖度、酸度和SO2的耐受能力测定.结果表明,菌株Q-42-2和Q-50-2的综合耐受能力较强,他们能在含糖量＞250g/L、SO2含量＞400mg/L、酒度＞15%、酸度pH＜2.0的发酵基质中发酵.证明Q-42-2和Q-50-2酵母菌株具有良好的耐受性.
本发明涉及浓香型白酒及其堆积生产方法，属于酿酒技术领域。本发明所解决的第一个技术问题是提供了一种堆积发酵生产浓香型白酒的方法，该方法可以提高浓香型白酒的品质。本发明浓香型白酒的堆积生产方法，包括如下步骤：a、出窖糟醅加入粮食、糠壳，混匀，蒸馏取酒，所得糟醅降温后加入中温大曲，入窖发酵至糟醅成熟；b、将发酵成熟的糟醅取出，堆积36～96h，然后蒸馏取酒，得到浓香型白酒。
FZF1基因在酿酒酵母中对亚硫酸盐转运蛋白编码基因SSU1具有正向调节作用,但在贝酵母中尚无相关报道,本研究拟通过对该基因进行克隆和生物信息学分析为后续研究做出参考.首先对贝酵母FZF1基因进行克隆,并利用在线分析工具ProtParam、ProtScale、TMHMM、PredictProtein、Swiss-Model等软件对其编码蛋白质的基本理化性质进行分析,同时预测了该基因所编码蛋白质的二级结构和三级结构.结果表明:该核苷酸序列含有一个长900 bp的开放阅读框,可编码299个氨基酸;编码的蛋白质为在细胞核中行使调控功能的亲水蛋白,含有18个丝氨酸(S)激酶潜在磷酸化位点、一个Coil区和4个锌指结构域,与酿酒酵母FZF1基因所编码的蛋白质结构和性质极为相似.可初步认为贝酵母FZF1基因与细胞的耐硫性相关;而贝酵母FZF1基因所编码的蛋白质中仅有4个锌指,则可能是贝酵母硫耐受能力比酿酒酵母弱的重要原因.
为探求复合菌发酵液的多种功能,该试验选择具有脱氮、产酶、抑菌等优良性能的酵母菌、乳酸菌及芽孢杆菌各1株,利用已优化的HJ培养基进行共培养,实时监测发酵过程,分时段取样,对复合菌发酵液的脱氮、产酶、抑菌、培藻及诱食等功能进行研究.结果表明,酿酒酵母菌NJ-02、屎肠球菌SC-01及枯草芽孢杆菌M7-1能够在HJ培养基中进行共发酵,连续培养24 h后3株微生物活菌数量分别达到3.88×108、2.41×1010、5.38×109 CFU/mL.复合菌发酵液的脱氮、培藻性能同复合菌中枯草芽孢杆菌M7-1的活菌数相关较大,发酵至16 h其降解亚硝态氮和培藻性能最为理想,亚硝态氮降解率为89%,并使小球藻叶绿素a质量分数提升49.6%.复合菌发酵液具有同枯草芽孢杆菌M7-1相当的产酶(蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶)活性及同屎肠球菌SC-01 相当的抑菌(副溶血弧菌)活性.复合菌发酵液饲喂对虾,诱食效果明显好于对照组(P<0.05),同化学诱食剂二甲基-β-丙酸噻亭(dimethyl-beta-propiothetin hydrochloride, DMPT)差异不显著,其肠道中乳酸菌、酵母菌数目显著高于对照组及化学诱食剂组(P <0.05).该研究所制备的脱氮、培藻、抑菌及诱食功能复合菌发酵液,为可持续生态水产养殖提供了新的微生物资源和技术方法.
绿叶挥发物(green leaf volatiles,GLV)包括C6和C9醛类、醇类和脂类,是酿酒葡萄(Vitis vinifera)和葡萄酒中一类重要的香气成分.脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是合成GLV的关键酶.本研究从酿酒葡萄赤霞珠果实中克隆VvLOX1 (KF033130)和VvLOX2(KF033131)基因cDNA全长,经生物信息学分析得出,二者分别属于Ⅰ型9-LOX和Ⅱ型13-LOX.这2个基因在葡萄叶片和根中的表达显著高于卷须和茎中的表达.在葡萄果实发育过程中,VvLOX1和VvLOX2基因表达与GLV合成有关,但基因表达高峰比C6和C9物质含量高峰提前2周出现.创伤处理后VvLOX2基因表达量与C6物质含量呈显著正相关,说明该基因在植物抗逆反应中发挥重要作用.本研究结果为探讨LOX基因在葡萄香气形成中的作用机理提供基础资料.
为了赋予工业酿酒酵母对淀粉和纤维素的降解活性,提高酿酒酵母对粗木薯粉进行酒精发酵时的酒精产率；另一方面,为了解决工业酿酒酵母不适于使用营养缺陷型筛选标记对转化子进行筛选的问题,以及避免引入抗药性标记基因带来的安全性问题,构建了以抗铜蛋白基因CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体.以载体pYES2-PMF-rDNA为基础,以新的筛选标记基因CUP1替换原有的尿嘧啶Ura-基因,得到载体pYES2M.再顺序插入葡聚糖内切酶基因eg3、葡萄糖淀糖酶基因gal和β-葡萄糖苷酶基因bgl1,构建得到以CUP1为筛选标记的酵母整合型三价表达载体pYES2M-eg3-ga1 -bgl1,其中每个基因都具有独立而完整的表达盒,包括启动子、信号肽和终止子,从而实现多基因单表达载体一次转化.