茶树金属耐受蛋白基因CsMTP11的克隆及功能分析

金属耐受蛋白MTP(metal tolerance protein)是阳离子转运蛋白(CDF)家族的重要成员，在植物重金属转运过程中发挥重要调控作用。本研究以中茶108茶树为试验材料，通过RT-PCR和RACE方法克隆到茶树重金属耐受蛋白基因CsMTP11(GenBank登录号为KX450265)，其全长cDNA为1197bp，编码398个氨基酸残基，其编码蛋白分子量为44.85kD，等电点为5.34。在线软件分析表明，CsMTP11蛋白具有5个跨膜结构域，且含有CDF家族的其他保守结构域。系统进化树分析结果表明，茶树CsMTP11与葡萄VvMTP11进化同源性最近，其氨基酸序列相似度高达90%。基因表达模式分析表明，CsMTP11基因在茶树老叶中的表达量最高，根中的表达量最低，另外，CsMTP11基因受重金属Mn和Co离子胁迫诱导表达。CsMTP11-YFP融合蛋白在拟南芥原生质体共定位试验表明，CsMTP11-YFP融合蛋白定位于质膜。CsMTP11在酿酒酵母及其突变株中的异源表达可以提高其对重金属Mn和Co离子的耐受性。综上所述，茶树CsMTP11属于Mn-CDF亚家族，可能参与茶树对重金属锰和钴的转运过程。
以瓯柑、南瓜为原料,开发果酒产品.研究酶解时间、温度及酶用量对果汁果胶酶解程度的影响,酵母添加量、初始糖度、发酵时间和发酵温度对果酒发酵的影响,确定果酒酿造的最佳工艺参数.结果表明:果胶酶添加量0.015％,酶解时间2.5h,酶解温度45℃,酵母菌接种量0.265‰,发酵液初始糖度21.0％,发酵温度32.1℃,发酵时间4d,酿制的瓯柑果酒香气浓郁,具有特有的苦味,营养丰富.
为了使酿酒酵母较好地利用木糖产生乙醇,将来自Thermus thermophilus的木糖异构酶基因XYLA和酿酒酵母自身的木酮糖激酶基因XKS1,构建到酵母表达载体pESC-LEU中,导入酿酒酵母YPH499中,同时成功表达了两种酶基因.该菌以木糖为唯一碳源进行限氧发酵,木糖的利用率为9.64%,为宿主菌的4.17倍,产生2.22 mmol·L-1的乙醇.同时初步探讨了两种酶基因的表达量对酿酒酵母发酵木糖生成乙醇的影响.木糖异构酶对木糖的利用起关键性的作用,木酮糖激酶的过量表达不利于乙醇生成.
为资源化利用马铃薯薯渣与茎叶,将两者混合后,用黑曲霉、植物乳杆菌和啤酒酵母菌制成的复合菌剂进行接种,通过单因素试验研究茎叶中水分含量、营养成分及菌剂的添加、接种量三因素对薯渣与茎叶混合物发酵效果的影响,并在优化发酵工艺条件下测定了发酵前后产物的重要成分含量.结果表明:优化发酵工艺为当茎叶水分为50％时,在1 000 g按实际比例混合的薯渣与茎叶混合物中添加(NH4)2SO4 60 g、过磷酸钙95 g,复合菌剂接种量为5％,厌氧发酵20 d.与发酵前相比,优化发酵产物真蛋白含量提高328.26％,蛋白质可消化率提高172.79％,硫铵素、烟酸、叶酸、乳酸、钙、磷含量分别提高6 251.72％、755.32％、767.52％、1 812.50％、111.11％、411.11％;发酵后产品粗纤维含量降低55.53％,尿素和龙葵素残留量均在安全值范围内.因此,接种复合菌剂发酵薯渣与茎叶的混合物,不仅可改善饲料的品质,还可提高饲料的安全性.
以胡萝卜、番茄为辅料,麦芽为主料发酵酿制成格瓦斯饮料.通过L9(34)正交试验确定胡萝卜、番茄格瓦斯饮料的最佳发酵条件为:麦芽汁:胡萝卜汁:番茄汁=5:3:2,乳酸菌(L.b:S.t=1:1)和啤酒酵母菌的接入量为3.0%(v/v),乳酸菌和酵母菌的比例为2:1,温度为35℃,发酵24 h.发酵后含糖量调整为10%,pH值4.0,酒精度1.0%,巴氏灭菌65℃、30 min.
[目的]探索高粱品质与酿造清香型大曲白酒之间的关系.[方法]试验选用4个高淀粉高粱杂交种晋杂22号、晋杂23号、晋杂34号、晋糯4号进行了清香型大曲白酒酿造试验,对其出酒率和基酒挥发性香味成分进行分析.[结果]试验表明,晋杂34号酿造大曲清香型白酒品质最好,晋糯4号对于提高白酒出酒率方面有显著的作用.[结论]研究可为清香型白酒生产提供优质酿酒高粱品种.