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酿酒酵母和大肠杆菌鸟嘌呤脱氨酶基因的克隆、原核表达及活性测定

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-18 阅读:999
与植物体内合成路径不同,微生物体内合成咖啡碱存在一条以黄嘌呤为底物,利用鸟嘌呤脱氨酶催化鸟嘌呤生成黄嘌呤有效合成咖啡碱的新途径.为克隆鸟嘌呤脱氨酶的基因,构建可高效合成黄嘌呤的原核表达载体并对外源蛋白活性进行检测,分别以酿酒酵母和大肠杆菌为研究材料,根据GenBank中酿酒酵母和大肠杆菌中鸟嘌呤脱氨酶基因gud1和egud序列设计引物,聚合酶链式反应特异扩增其基因片段,将目的基因连接至pMAL-c5X载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达,并用高效液相色谱法鉴定其目的蛋白的催化活性.结果表明重组载体pMAL-gud1、pMAL-egud均可用来合成黄嘌呤,且GUD1比EGUD合成黄嘌呤的效率更高.研究结果将进一步丰富黑茶加工技术理论,同时为体外构建高效咖啡碱生物工程菌提供理论支持.
对风湿骨痛酒进行药理学实验研究,证明对中枢神经系统有明显抑制作用,常用量即具有镇静、镇痛、催眠、解热、抗惊厥作用.对大白鼠蛋清致关节炎有明显抗炎、抗风湿作用,其强度和水杨酸钠相似,在治疗量下用药安全有效,但大剂量时有一定毒性,应慎用.
针对当前啤酒次品回收自动化程度低的现状,设计了全自动的啤酒次品回收机.主要介绍了啤酒次品酒液在回收过程中倒入酒缸后,利用液位传感器,A/D转换器,译码器等电路对酒缸液位进行显示,并通过继电器、电磁阀电路对酒缸液位进行控制.该部分电路的投入使用提高了次品酒回收的自动化程度.
本发明公开了一种鲜玉米白酒,它涉及白酒酿造领域,解决白酒中缺少鲜玉米的清香味的问题。通过将鲜嫩的玉米破碎、熟制、发酵、蒸馏、陈酿等一系列加工过程,酿造成鲜玉米白酒,使白酒口感更好。本发明可广泛应用于所有能够种植青食玉米的地区。
通过异源表达木糖代谢途径,构建能高效发酵木糖产乙醇的工业酿酒酵母菌株,对木质纤维素燃料乙醇的开发具有重要意义.与氧化还原途径相比,木糖异构化途径的表达不会因辅酶不平衡而造成中间产物木糖醇的累积,因此被视为是理想的木糖代谢途径.在木糖异构途径的表达过程中,选择工业酿酒酵母作为出发菌株进行木糖异构酶途径的表达具有突出优势.同时,提高木糖异构酶基因xylA的表达效率对木糖异构菌株的构建至关重要.另外,在对XI菌株进行代谢工程改造时,GRE3的敲除、木糖转运的提升、木糖代谢途径的定向改造等均能有效改善菌株发酵木糖产乙醇的能力.除此之外,进化工程也是提升XI菌株木糖发酵效率的重要方法之一.而在相关机理阐释和改造策略的制定过程中,组学技术已显示出强大的功能.综述了近年来木糖异构酶途径在酿酒酵母中的表达研究进展,同时还对相关研究存在的问题进行了分析.
棉花新品种酒棉15号为酒泉市农业科学研究所以酒棉1号为母本、905为父本杂交,经定向选择、航天搭载系统选育而成。该品种纤维上半部平均长度30.5 mm、整齐度指数86.5%、断裂比强度29.9 cN/tex、麦克隆值4.3、伸长率5.9%、反射率75.8%、黄度7.9、纺纱均匀性指数157,在2010年甘肃省棉花新品种生产试验中,皮棉平均产量为1 953.0 kg/hm2,比对照品种酒棉8号增产10.6%,抗枯萎病。适宜于甘肃河西走廊及生态条件类似棉区种植。

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