自然发酵乳及传统开菲尔粒中酵母菌的多样性研究

研究自然发酵乳和内蒙古牧区传统开菲尔粒中酵母菌的多样性,目的是探寻酵母菌的主要菌群和种属类型,为筛选可发酵低酒度发酵乳的酵母菌奠定基础.该研究首先进行稀释涂布和划线分离出酵母菌株、然后进行菌落形态和细胞形态的初步分类,再进行5.8S rDNA-ITS区域RFLP分子鉴定,将分离到的130株酵母菌区分为10种形态类型、6种分子类型,分别为马克思克鲁维酵母菌(K lu yverom yces marxianus)、隐球酵母菌(Cryptococcus sp.)、酿酒酵母菌(Saccharo-myces cerevisiae)、热带假丝酵母菌(Candida tropicalis)、陆生伊萨酵母菌(Issatchenkia terricola)和季也蒙毕赤酵母菌(Pichia guilliermondii).其中马克思克鲁维酵母菌、酿酒酵母菌和季也蒙毕赤酵母菌为优势菌群,具有酿造低酒度发酵乳的潜力.
采用二次正交旋转组合试验方法,研究了作啤酒辅料的大麦挤压蒸煮系统的模孔孔径、套筒温度、大麦含水率、螺杆转速和模板内表面至螺杆末端端面的距离,对醪液的主要考察指标--麦汁的过滤速度、碘值、浸出物收得率的影响规律. 研究表明,挤压蒸煮大麦可以作啤酒辅料,且麦汁浸出物收得率为72.04%,高于传统不挤压大麦辅料的麦汁浸出物收得率.
探明习水县酒用高粱主产区600～1000m海拔地区适宜的高粱播种期，为当地酒用高粱高产种植提供理论依据，以高粱品种红缨子为材料，于2021年在习水县进行6个不同播种期（3月18日、3月25日、4月1日、4月8日、4月15日、4月22日）的高粱种植试验，比较不同播种期高粱的生育期、株高、穗重、千粒重、产量、抗性表现。结果表明：各播种期红缨子高粱的全生育期以处理A（3月18日播种）最长，为154d，处理F（4月22日播种）最短，为129d；株高以处理D（4月8日播种）最高，为273.0cm，处理F（4月22日播种）最低，为230.0cm；有效穗以处理A（3月18日）最多，为5360穗/667m2，处理F最小，为2040穗/667m2，其余处理（4月15日及之前播种）差异不大；穗重和千粒重，处理E（4月15日播种）和处理F（4月22日播种）低于其余处理（4月15日前播种）；产量以处理A（3月18日）最高，为295.0kg/667m2，处理F最低，为74.4kg/667m2，其余处理（4月15日前播种）间差异不大；抗倒伏和对主要病虫害的抗性各处理表现均较好。为获得较高产量并为后茬提供充足时间，可在4月15日前适期早播。
采用二维电泳(2-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术对脉冲电场(pulsed electric field,PEF)处理前后哈密瓜汁中酿酒酵母蛋白质进行检测分析,探究处理过程对酿酒酵母蛋白表达的影响.实验结果得知,所有检测出的酵母蛋白等电点均介于4.00与6.87之间,分子量分布在14.58～109.83 kDa之间;PEF处理后的酿酒酵母为免受环境变化带来的氧化损伤,细胞中硫氧还蛋白过氧化物酶、延长因子2表达上调;并且因场强影响到了细胞的遗传物质,核染色质蛋白和DNA修复蛋白表达上调;此外,细胞中Cu-Zn辅基超氧化物歧化酶和与糖原合成与代谢密切相关的磷酸丙酮酸水合酶的表达下调,反映细胞的活力下降或死亡;与细胞生存和增殖相关蛋白的表达也发生了明显的变化,如胱硫醚β-合酶、腺苷5-单磷酰胺酶、非典型蛋白Ynr034w-A亚基等.PEF处理影响到细胞代谢的相关酶类和遗传物质,可为研究PEF强化杀菌方法提供理论依据.
利用海洋生物资源进行天然抗真菌新药的开发,从冻干海参加工废液中提取了水溶性海参皂苷,并对其抗真菌活性进行了研究.采用大孔吸附树脂法提取水溶性海参皂苷,经Libermann Burchard反应等对提取物的性质进行鉴定后,利用管碟法对所得提取物的抗菌活性进行了测定,并利用琼脂稀释法测定了所得水溶性海参皂苷对6株供试真菌的最低抑菌浓度(MIC).提取物在Molish 反应、沉淀反应和泡沫实验中均为阳性,说明提取物中确含有皂苷类成分;在Libermann Burchard反应中,液体的颜色处在红色与紫色之间,显示提取物可能是1种三萜类皂苷.水溶性海参皂苷对6株供试真菌均具有显著的抑制作用,且在浓度为0.5～4 mg/mL的范围内,其抑菌活性与所用浓度之间呈明显的正相关性;在浓度为4 mg/mL时,水溶性海参皂苷对6株供试真菌抑制活性的大小依次为裂殖酵母菌、啤酒酵母菌、白色念珠菌、葡萄炭疽病原菌、黄瓜枯萎病原菌和黑曲霉,海参皂苷对6株真菌的MIC值依次分别为0.002,0.016,0.063,0.063,0.125,0.250 mg/mL.
本研究分析了不同发酵时间、发酵温度及料液比对麦麸水溶性多酚含量的影响,并比较了麦麸水溶性多酚的组成和抗氧化活性的变化.结果 表明,枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌混合发酵可以提高水溶性麸皮多酚含量,在液料比为1∶1、发酵温度37℃、发酵时间84 h条件下,水溶性麸皮多酚含量这(13.41±0.10) mg/g,较发酵前提高了294.41％.发酵可提高游离型和结合型阿魏酸含量,分别达20.22、1160.6 mg/kg,且水溶性麸皮多酚主要以结合型阿魏酸形式存在.抗氧化活性研究表明,微生物发酵处理后,麸皮多酚的还原力和DPPH自由基清除率均得到显著提高(P＜0.05),但羟基自由基的清除率却出现下降.因此,微生物发酵可以提高水溶性麸皮多酚含量,改变其组成,增强抗氧化活性,为麦麸中多酚类物质的有效利用提供了基础.