响应面优化发酵提纯角豆粉提取液D-松醇的工艺研究

以角豆粉为原料,利用酿酒酵母发酵提纯角豆提取液中的D-松醇.以总糖利用率为响应值,通过单因素实验、Plackett-Burman实验和响应面分析实验,对酿酒酵母发酵工艺进行优化.苯酚硫酸法测定发酵液总糖含量.结果表明,最佳发酵的工艺条件为:当加菌量为0.8mg/mL,发酵时间为60h,初始糖浓度为70mg/mL.此条件下总糖利用率为85.1％,与理论值86.6％接近,表明实际测量值与理论值之间拟合度良好.总糖含量由69.2％降至10.3％,且D-松醇纯度由发酵前的8.8％提高到53.9％,此研究对D-松醇的开发应用有重要意义.
本发明公开了一种白酒醇香味茶干及其制备工艺，其各原料组分之间的重量配比为：黄豆150-200、白酒15-20、马齿苋3-5、曲曲菜4-6、木瓜汁8-10、胡萝卜5-7、桑叶1-3、向日葵根1-3、酱油3-5、冰糖3-5、茶叶4-6、八角2-4、桂皮1-3、甘草3-5、茴香1-3。本发明工艺中，在黄豆磨浆前进行了一次浸泡、冷冻、烘干和二次浸泡的处理过程，大大降低了黄豆原本的浸泡时间，提高了茶干的制备效率；加入了马齿苋、胡萝卜等原料，为茶干增添了更多的维生素，白酒直接加入到豆浆中，做出的茶干具备了白酒的醇香，口感更独特。
目的:为了降低在葡萄酒酿造过程中酿酒酵母的乙醇产量.方法:将编码NADH氧化酶的Spnox基因过量表达于酿酒酵母T73中,构建胞内异源NADH氧化途径.结果:与出发菌株酿酒酵母T73/pY26相比较,重组菌株酿酒酵母T73/pY26-Spnox胞内总NADH氧化酶活性提高49％,胞内NADH/NAD+比率降低了9％;酿酒酵母T73/pY26-Spnox发酵模拟葡萄汁所获得的乙醇产量及醇类物质总量分别降低了7％和13％,挥发酸增加了4.5％,挥发性物质种类和含量略有增加.结论:过量表达NADH氧化酶可使葡萄酒在发酵条件下,酿酒酵母合成乙醇或其它醇类物质的能力降低,为进一步优化葡萄酒发酵条件生产降醇葡萄酒打下基础.
本研究通过给小鼠注射0.01 mL/（g mb·d）质量分数0.2%的角叉菜胶建立血栓形成模型，分析以0.2 mL/（g mb·d）不同浓度（1×108 CFU/mL和1×109 CFU/mL）发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）CQPC04（以下简称LF-CQPC04）菌悬液干预10 d对小鼠凝血情况、氧化应激水平、炎症水平及肠道微生物组成的影响。分别采用生化试剂盒、苏木精-伊红染色切片观察、定量聚合酶链式反应分析小鼠血清和组织的相关指标，并通过高通量测序分析小鼠肠道微生物组成。结果表明，LF-CQPC04干预可以缩短血栓性小鼠的黑尾长度、凝血酶原时间、凝血酶时间，同时减少血液中纤维蛋白原质量浓度，延长血栓性小鼠的活化部分凝血活酶时间。LF-CQPC04干预还可降低血栓性小鼠血清中丙二醛、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α、白细胞介素（interleukin，IL）-6、核因子（nuclear factor，NF）-κB和IL-1β的水平，并提高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶（catalase，CAT）的活力。尾组织病理学观察结果表明，LF-CQPC04可减少尾静脉血栓形成的组织损伤。LF-CQPC04可下调血栓性小鼠结肠组织中NF-κB p65、IL-6、TNF-α和γ-干扰素的mRNA表达，并上调铜锌超氧化物歧化酶、锰超氧化物歧化酶和CAT的mRNA相对表达水平。LF-CQPC04还可以下调尾静脉血管组织中NF-κB p65、细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1和E-选择素的mRNA相对表达水平。肠道菌群分析结果表明LF-CQPC04干预增加了norank_f_Muribaculaceae、Lactobacillus、Bacteroides、Lachnospiraceae NK4A136、unclassified_f__Lachnospiraceae等有益菌属的相对丰度。综上，LF-CQPC04可以抑制小鼠血栓形成，降低血栓性小鼠的氧化应激并缓解肠道炎症，同时调节肠道菌群，其中高剂量的LF-CQPC04显示出更好的效果，且效果与药物肝素接近。
根据裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶的基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从裂殖酵母中提取总RNA,然后反转录扩增得到β—葡萄糖苷酶基因（bglA）,把该基因连接到表面展示质粒载体pYD1上,成功构建了重组质粒pYD1-bglA,并转化用于表面展示的酵母EBY100菌株中,得到酵母转化子,提取酵母菌的DNA通过PCR扩增证实了β-葡萄糖苷酶基因已整合到酵母基因组中.以不含载体和含空载体的酵母菌为对照,加2％ (w/v)的半乳糖诱导48h后,利用免疫荧光法在荧光显微镜下检测到了来源于裂殖酵母的β—葡萄糖苷酶展示在酵母菌细胞表面,并对其酶学性质进行分析研究.
一种酿造白酒与酒精勾兑白酒的鉴别方法，该方法包括如下步骤：(一)运用库仑阵列高效液相色谱分析并分别建立酿造白酒与酒精勾兑白酒的指纹图谱，获取酿造白酒与酒精勾兑白酒的指纹图谱数据；(二)建立酿造白酒与酒精勾兑白酒的指纹图谱统计模型；(三)将待测白酒样品以上述相同方法分析、取得库仑阵列高效液相色谱数据，通过指纹图谱模型进行鉴别。本发明使用HPLC－ECD进行白酒品质分析，并运用多元统计软件对酿造酒和酒精勾兑酒建立指纹图谱模型，建立一种全新的白酒品质控制方法，并可针对不同浓度、不同品质原酒进行细化区分，检测灵敏度高，结果直观。通过本发明方法可进一步建立各种不同类型白酒的指纹图谱模型，形成白酒指纹图谱库。