绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅰ基因的克隆与表达

采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅰ(EGⅠ)的cDNA序列,测序后构建到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上,转化酿酒酵母,转化子用2%的β-D-半乳糖进行诱导,用Northern杂交、刚果红染色法和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测.结果表明,EGⅠ的cDNA基因开放阅读框长度为1 377 bp,编码459个氨基酸,推测蛋白质分子量为48.1 kD.刚果红染色显示,转化子可产生明显的水解圈;CMC酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EGⅠ并分泌到胞外.发酵液中的酶活在培养60 h达到最高0.06U/mL,最适酶解温度为50℃,最适pH值为5.4.
头孢菌素C(CPC)酰化酶可用于一步酶法合成7-氨基头孢烷酸(7-ACA).对来自Pseudomonas sp.Strain SE83的高活性CPC酰化酶突变基因进行基于毕赤酵母偏好密码子优化,获得基因SECA.选取毕赤酵母内源信号肽DSE4,构建表达菌G/DSECA,首次在毕赤酵母中分泌了CPC酰化酶.与酿酒酵母α-交配因子前导肽(α-factor)相比,DSE4介导SECA的分泌表达效果更优,其介导SECA表达的胞内、外单位体积酶活分别比α-factor高65％和44％.分别以DSE4和α-factor为信号肽构建β-半乳糖苷酶表达菌G/DSEL与G/MFL,进一步考察DSE4介导异源蛋白的分泌效果,G/DSEL的胞内外单位体积酶活也均高于G/MFL.
本发明涉及一种以核桃、大枣、枸杞、大米、糯米、玉米为原料的营养白酒及其制造方法。由于核桃、大枣、枸杞含多种维生素，营养价值高且具有保健之功效使得此种白酒的品质大大提高。其优点是口感好，营养价值高。长期饮用具有滋阴壮阳、益智、健脑、强肾之功效。
为了探索以贝达为砧木的几个酿酒葡萄品种在焉耆盆地的生态气候适应性及其应用价值,从而为该地区酿酒葡萄筛选适宜的砧穗组合提供理论依据,用以贝达为砧木的9个酿酒葡萄栽培品种为试验材料,研究贝达砧木对不同酿酒葡萄品种生长势、光合特性和叶绿素荧光参数的影响.结果表明,酿酒葡萄品种中维代尔的穗砧比为1.05,最接近于1,且坐果量最高,达到15.00穗/株.赤霞珠、梅鹿辄、维代尔、北红有较高的净光合速率(Pn)、最大光化学量子产量(Fv/Fm)、PSⅡ的潜在活性(Fv/Fo)、PSⅡ实际光化学效率(ΦPSI)及较低的非光化学猝灭系数(NPQ).通过主成分分析进一步发现不同酿酒葡萄生长情况由强到弱的顺序为:梅鹿辄>维代尔>北红>赤霞珠>烟七三>黑比诺>北玫>白雷司令>霞多丽.综合分析认为以贝达为砧木的梅露辄、维代尔、北红和赤霞珠具有较强的亲和性,光合性能良好,对当地环境条件适应性强.
啤酒花（European hop）又名酒花、忽布、蛇麻、蛇麻花、酵母花、香蛇麻、蛇麻草、啤瓦古丽（维吾尔族语）。
目的:建立一种从酿酒酵母突变库中快速筛选低产乙醇酵母菌株的方法.方法:以转录因子spt15随机突变酿酒酵母文库为研究模型,以高生物量产率作为低产乙醇酿酒酵母的筛选标记,利用24孔板对spt15突变酵母文库进行初筛.对初筛获得的目标菌株,以乙醇产量作为筛选标记进行复筛,最终获得乙醇合成能力较低且生物量较高的酿酒酵母菌株.结果:(1)利用易错PCR技术构建了spt15随机突变文库,并将其转化至酿酒酵母YS59,获得酿酒酵母YS59 spt15突变文库;(2)经初筛,获得14株生物量产率≥70％的酿酒酵母YS59 spt15突变菌株;(3)通过复筛,筛选出编号712的低产乙醇突变菌株,其乙醇合成量降低了28.1％;(4)通过序列比对,发现spt15-712上有9个碱基发生突变,分别是A161G,T426C,T462C,T493A,A506G,T546C,T622C,T658C,A750T9.结论:成功建立了一种高通量筛选低产乙醇酿酒酵母的方法,并利用这种方法筛选出乙醇合成量降低28.1％的低产乙醇突变菌株.