酿酒酵母脂滴代谢突变体中细胞自噬缺陷检测条件的比较

[目的]以探讨参与脂滴代谢途径的一些基因缺失是否会影响细胞自噬为出发点,比较不同自噬检测方法所获得的试验结果的差异,用于优化自噬检测条件.[方法]首先用GFP标记自噬标志性蛋白Atg8以及mCherry标记脂滴蛋白Erg6并构建代表性自噬缺陷菌株,然后用普通荧光显微镜和激光共聚焦显微镜分别观察Atg8和Erg6的共定位情况.其次,利用生长表型检测和台盼蓝染色来检测磷脂基因相关突变体经氮饥饿处理后的细胞活性情况.最后,采用免疫印迹法检测磷脂合成突变体菌株cds1-DAmp经饥饿处理不同时间后细胞中GFP-Atg8的降解和prApe1的成熟情况.[结果]在营养丰富以及饥饿条件下,用普通荧光显微镜拍摄所统计出的mCherry-Erg6与GFP-Atg8定位重叠结果高于用激光共聚焦拍摄所统计出的结果.长时间氮饥饿条件下,用生长表型检测和台盼蓝染色均能检测到与脂滴形态相关基因CHO1、MRPS35、CDS1缺失会显著影响细胞的存活率;但用生长表型检测发现CAX4缺失菌株存活显著低于野生型时,用台盼蓝染色检测发现CAX4缺失细胞存活率却与野生型无显著性差异.用免疫印迹法检测CDS1缺失菌株中自噬缺陷时,通过检测GFP-Atg8的降解,氮饥饿大于4h时的CDS1缺失菌株中GFP-Atg8的降解能力显著低于野生型,但通过检测prApe1的成熟,CDS1缺失菌株中prApe1的成熟缺陷在各个时间段均可检测到.[结论]验证了酵母脂滴代谢途径中以CDS1为代表的相关基因参与了细胞自噬.不同的检测条件、方法等因素对检测结果产生较大影响,甚至会出现相反结论,建议在酿酒酵母中进行类似的自噬检测时需要同时结合多种试验方法与手段来获取数据,以便用于结论与分析.
[目的/意义]分析台湾农村酒庄的发展历程、组织推动、产业升级和政策引导等产业融合案例, 有助于学习台湾农村产业融合的发展经验, 为大陆农村产业融合发展提供借鉴.[方法/过程]选取了信义乡梅子梦工厂、大湖草莓酒庄、雾峰酒庄和大安酒庄等4个发展各异的农业组织型农村酒庄, 从产业升级、资源整合、产品创新和创意、产业链延伸等产业融合的核心措施进行比较分析, 探讨台湾农村产业融合的特征、措施和成效.[结果/结论]研究认为, 影响酒庄发展的重要因素包括当局扶持、先天资源、后天努力等.因此, 推进大陆农村产业融合发展应加强政策引导与扶持, 并结合当地资源、创新思维, 还要引导产学研相结合、加强人才培养.
本发明公开了一种具有余热回收功能的白酒蒸馏系统，包括蒸酒锅、第一换热器、第二换热器和净化塔；所述蒸酒锅的顶部设有排气口Ⅰ；所述第一换热器包括管壳及换热管，所述管壳内部设有换热腔，所述换热管呈蛇形且两端分别设有第一进水口和第一出水口；所述第二换热器包括隔板以及隔板分割成的互不相通的上腔和下腔，所述上腔和下腔平行设置；所述净化塔的内腔底部设有进气口Ⅴ，净化塔的内腔设有用于喷淋弱碱性溶液的喷淋管，净化塔内腔的底部设有用于盛装弱碱性溶液的溶液腔；本发明能够对白酒蒸馏废气进行妥善处理，节约热能损耗。
为确定新疆啤酒大麦优质高产栽培的适宜播种期,选用甘啤4号、垦啤7号、新啤4号、新啤8号作为试验材料,设置4月9日、14日、19日、24日、29日5个播种期,研究不同播种期对4个品种啤酒大麦产量与蛋白质含量的影响.结果表明:甘啤4号、垦啤7号、新啤4号、新啤8号这4个品种在4月份播种均能正常成熟,播种早的生育期长,播种晚的生育期短.从生育期天数来看,新啤4号＜新脾8号＜甘啤4号＜垦啤7号,随着播种期的推迟产量逐渐降低,蛋白质含量逐渐升高.建议甘啤4号和垦啤7号等中晚熟品种适期进行早播.
研究芦柑酒生产过程不同脱苦工艺的效果.结果表明,在果汁中添加0.4%β-环状糊精进行包埋,控制发酵温度在20+2℃,发酵后的酒再经过聚醚砜微孔过滤膜过滤,基本上能脱除芦柑酒的苦味.
目的：探讨膳食丙烯酰胺暴露对2型糖尿病大鼠病程进展的影响。方法：对糖尿病模型GK大鼠给予低剂量丙烯酰胺（2 mg/（kg mb·d））8 周后，研究其对大鼠空腹血糖、空腹糖耐量和胰岛素敏感性等血糖代谢相关指标的影响，同时测定血清生化指标、氧化和炎症因子水平，并对肝脏、肾脏、胰腺和腓肠肌进行苏木精-伊红染色，观察病理变化情况，分析丙烯酰胺暴露对GK大鼠脏器组织功能的影响。最后采用气相色谱-质谱联用仪对大鼠血清和尿液中的代谢物进行检测，筛选膳食丙烯酰胺暴露对GK大鼠造成影响的主要差异代谢物，分析其关联的代谢通路。结果：与对照组（灌胃去离子水）相比，膳食丙烯酰胺暴露进一步通过损伤GK大鼠胰腺、促进氧化炎症应激、影响胰岛β细胞功能和磷酸戊糖代谢通路等作用，导致糖尿病模型GK大鼠血糖代谢紊乱加重，具体表现为空腹血糖水平明显上升、空腹糖耐量受损和胰岛素敏感性降低。此外，膳食丙烯酰胺暴露的GK大鼠体内显著改变的差异代谢物有L-酪氨酸、肌醇、马尿酸、柠康酸、苯乙酰甘氨酸、N-乙酰基亮氨酸、喹啉酸、L-色氨酸以及5-羟甲基色胺等，与精氨酸和脯氨酸代谢、色氨酸代谢、磷酸肌醇代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢等氨基酸代谢有关，这些受影响的代谢物和代谢通路被认为与肝脏功能和神经组织功能异常相关。结合血清生化和病理分析证实，膳食丙烯酰胺暴露对GK大鼠肝脏、腓肠肌及神经组织造成了不同程度的损伤。结论：膳食丙烯酰胺暴露对糖尿病模型GK大鼠的健康造成严重不良影响，加剧血糖代谢紊乱，影响脏器组织功能。