酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1（SBD-1）基因表达的影响

【目的】探索益生性酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1（sheep beta-defensin-1, SBD-1）表达的调节作用，为在分子水平上揭示益生菌对防御素的调控机理提供一定的理论基础及依据。【方法】首先将新鲜的绵羊瘤胃组织用 PBS 和抗生素处理后进行瘤胃上皮细胞原代培养，当原代细胞数量长到细胞培养瓶的85%以上时，将细胞传于12孔板用于细胞刺激试验。同时将活化并纯化后的酿酒酵母菌25℃、180 r/min有氧培养48 h后，进行5次平行平板计数试验，根据平板计数的数据处理方法，得到浓度为5.2×108 CFU·mL-1的酿酒酵母菌液，再通过倍比稀释把所得菌液依次稀释成浓度为5.2×107、5.2×106、5.2×105、5.2×104 CFU·mL-1的菌液，用以上不同浓度（5.2×104—5.2×108 CFU·mL-1）的酿酒酵母菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞分别进行不同时间（2、4、8、12、24 h）的刺激，并设置对照组用DMEM/F12培养基代替酿酒酵母菌。然后提取总RNA，逆转录为cDNA后，利用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测瘤胃上皮细胞中SBD-1表达差异。最后用SAS 9.2软件对数据进行相关差异性分析。【结果】荧光定量PCR结果表明，在各时间组内SBD-1 mRNA的表达量随着菌液浓度的增加均呈先升高后降低的趋势，当菌液浓度为5.2×107 CFU·mL-1时表达量达到最大，并与对照组和其他浓度组相比差异极显著（P＜0.01）。当菌液浓度一定时，SBD-1 mRNA的表达量先是随着刺激时间的延长而呈上升趋势，刺激时间为12 h时SBD-1 mRNA表达量达到峰值，之后呈下降趋势。因此，当浓度为5.2×107CFU·mL-1的菌液刺激瘤胃上皮细胞12 h后，SBD-1基因的表达量达到最高，且与此浓度下其他时间组的表达量相比差异极显著（P＜0.01）。ELISA检测结果显示，SBD-1蛋白表达趋势与SBD-1 mRNA检测结果基本一致。不同浓度的菌液分别刺激绵羊瘤胃上皮细胞2、4、8、12、24 h后均能提高共培养上清中SBD-1蛋白的表达，且与对照组相比存在极显著差异（P＜0.01）。在菌液浓度为5.2×107CFU·mL-1刺激瘤胃上皮细胞12 h后SBD-1蛋白分泌水平达到最高，与此浓度下各时间组相比差异极显著（P＜0.01）。【结论】酿酒酵母菌能够提高绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达，且菌液浓度为5.2×107 CFU·mL-1刺激瘤胃上皮细胞12 h后，SBD-1的表达量达到最高。
本文介绍了葡萄酒和果酒中甲醇的主要来源和危害,国内外对果酒中甲醇的限量规定;阐述了降低葡萄酒、果露酒中甲醇含量的研究现状.提出通过应用健康原料和预处理技术,选用恰当的果胶酶种类并在使用中进行纯化与活性抑制技术,选择良好的酒基和蒸馏措施,均能降低果露酒中甲醇含量.
为了构建巴斯德毕赤酵母通用表面展示载体,本研究利用DNA重组技术从酿酒酵母EBY100中克隆了与酵母细胞壁共价连接的甘露糖蛋白PIR的N端重复序列(pir-N),体外连接到毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K中,得到新型巴斯德毕赤酵母表面展示的通用载体pPIC9K Pir-N,并将β-葡萄糖苷酸酶基因与pir-N端融合.结果表明β-葡萄糖苷酸酶已成功展示到巴斯德毕赤酵母细胞表面,使巴斯德毕赤酵母细胞具有了β-葡萄糖苷酸酶催化活性,研究成果为其他生物催化剂的酵母表面展示提供技术平台.
为开发葡萄渣作为饲料以及其实际应用研究提供线索.以葡萄渣为主要底物分别接种复合酵母菌、饲料酵母和酿酒酵母进行发酵,对照组不接种,发酵时间为30h.结果表明复合酵母菌组的葡萄渣粗蛋白、灰分、钙、磷极显著(P≤0.01)高于其他组,而NDF、ADF与其他各组相比极显著(P≤0.01)降低.
本实用新型涉及白酒酿造领域，公开了一种移动式白酒发酵箱，包含发酵箱体和发酵箱盖，发酵箱的箱体内壁和箱盖内壁均有可拆卸的窖泥夹板。发酵箱体顶部有酒糟进口，酒糟进口四周有水封凹槽，发酵箱体内部有网孔式酒糟存储箱，发酵箱体底部有黄水收集箱和底座。发酵箱盖上有无线温度传感器、呼吸阀。本方案的移动式白酒发酵箱运输便捷，可保证表层酒糟也能与窖泥接触，有效提升酒糟发酵质量，并可实时监控发酵温度，提升了白酒酿造的信息化水平。
针对新疆产区研究砧木对接穗影响的研究较少,探讨不同砧木对马瑟兰葡萄生长势、光合特性和果实品质的影响,旨在为新疆玛纳斯河流域生产上选择适宜的酿酒葡萄砧穗组合提供理论依据.以2 a生马瑟兰/5BB、马瑟兰/SO4砧穗组合为处理,马瑟兰自根为对照,测定不同砧木马瑟兰的生长势、光合与叶绿素荧光参数及果实品质,并用主成分分析方法综合评价砧穗组合的优劣.结果表明:马瑟兰/5BB的节间粗度、节间长度、SPAD值、坐果量显著高于马瑟兰自根苗.马瑟兰/5BB净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)及PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ)最大,胞间CO2浓度(Ci)、非光化学猝灭系数(NPQ)最小.马瑟兰/SO4穗质量、果皮厚度、种子数量均最大,而葡萄皮总单宁含量最小.马瑟兰/5BB总糖含量、葡萄皮总类黄酮含量、葡萄皮总花色苷含量最大,而种子质量最小.根据主成分分析的综合得分由高到低依次为:马瑟兰/5BB>马瑟兰/SO4>马瑟兰自根苗.研究发现,砧木5BB的适应性优于SO4,且马瑟兰/5BB砧穗组合的亲和性高、生长势强、光合作用效率高、果实品质优,为新疆玛纳斯河流域适宜的砧穗组合.