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酿酒酵母pdc基因缺陷菌株的构建及其丙酮酸发酵特性

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-14 阅读:821
丙酮酸是一种重要的有机酸,在聚合物、化妆品、食品添加剂、医药等领域具有广泛应用.酿酒酵母被认为是丙酮酸生产的潜在最适微生物,但其糖酵解过程产生的丙酮酸会在胞质内的丙酮酸脱羧酶催化作用下降解为CO2和乙醛,造成碳代谢流的损失.为将更多的碳代谢流引向丙酮酸合成,该研究通过敲除丙酮酸脱羧酶的3个结构基因(pdc1、pdc5和pdc6),显著地促进了丙酮酸积累,但也造成突变菌株XY-156生长缓慢.与进化之前相比,采用适应性进化策略驯化得到的菌株XY-156A,在细胞生长、葡萄糖消耗以及丙酮酸积累方面均获得显著提高;进一步利用2 L发酵罐进行批次补料发酵试验,发酵76 h丙酮酸产量可达105 g/L,生产强度为1.38 g/(L·h),得率为0.5 g/g葡萄糖.结果表明,采用失活丙酮酸脱羧酶与适应性定向进化相结合的策略改造酿酒酵母,能够实现其高效积累丙酮酸,可为生物基丙酮酸工业化生产奠定坚实的基础.
为了研究浓香型白酒发酵过程中糟醅金属多元素的变化,采用微波消解结合ICP-MS技术测定了不同发酵时间糟醅中Na、K、As、Pb、Cd、Ti、Mg、Fe、Cu、Mn、Zn、Ca、Al、Ni、Cr和Ba 16种金属元素的含量与变化规律.糟醅中各金属元素的含量与分布与糟醅的空间层面分布和发酵时间均有显著关系.中下层糟醅中金属元素含量显著高于中上层糟醅,且随着发酵时间延长,糟醅中金属元素含量先快速增加,然后增速变缓达到稳定.中上层糟醅中对应金属元素增加速率低于中下层糟醅,前者在发酵28~35 d达到稳定,后者在发酵28 d左右增速降低.不同空间层面糟醅中多种金属元素的含量和变化差异可能与发酵产生的黄水的渗透与迁移有关.本研究表明白酒发酵中间代谢产物会显著影响糟醅中的金属多元素组成,影响了酿酒原料中的金属元素向成品白酒转移效率.
[目的]以烟台地区的3个酿酒葡萄品种为材料,分析葡萄与葡萄酒中的农药残留,比较农药残留对葡萄酒发酵过程及其质量的影响.[方法]分别采用气相-火焰光度检测器( GC-FPD)和气相-电子俘获检测器( GC-ECD)对样品中有机磷和有机氯农药进行检测.[结果]在烟台地区4个地块的赤霞珠和霞多丽葡萄品种中,均存在三唑酮,平均浓度71.09 μg·kg-1;地块1的霞多丽、地块3的赤霞珠中检测出六六六,浓度分别为2.23 μg·kg-1和4.86 μg·kg-1;地块2和地块3的2个葡萄品种中均检测出三氟氯氰菊酯,浓度在2.36-7.51 μg·kg-1,平均浓度为4.28 μg·kg-1.农药百菌清对供试的蛇龙珠葡萄酒发酵过程抑制作用最明显,当浓度高于0.20 g·kg-1时,其酒精发酵后期将出现停滞现象;供试的赤霞珠发酵结束后,葡萄原料中农药残留六六六、三唑酮、百菌清、三氟氯氰菊酯到葡萄酒中的转移率分别为32.14%、0.67%、0、0.[结论]烟台地区酿酒葡萄原料的农药残留较低,均符合中国相关标准要求;农药残留对葡萄酒的发酵过程具有一定影响,并给葡萄酒的感官质量带来不良影响;在葡萄酒酿造过程中,从葡萄原料引入的农药残留种类和含量均减少,不同种类农药残留的转移率不同.
本发明涉及浊香白酒的生产方法,尤其涉及一种利用多种原粮,根据不同配比,采用特殊窖泥生产浊香白酒的方法。其原料为小麦、高粱、豌豆、神谷米(即为小米)、玉米(优选粘玉米)、脱脂芝麻、脱脂花生、脱脂黄豆中的一种或几种,采用传统固态酿造工艺,在酵泥的培养过程中根据香型的不同加入精选的不同中药材,从而使得微生物群的培养和有效成分能过发挥最佳的效能。由此本发明的固态发酵池发酵所生产的白酒质量稳定,口味醇厚,回味悠长,有饮时舒畅、轻松,口感绵软,浓而不列,柔而不寡,不易醉、醒酒快,舒筋活血、延年益寿之功效。
利用项空固相微萃取-气相色谱-质谱技术,建立了一种同时检测啤酒酿造大米中16种风味物质的定量分析方法.通过研究不同因素对风味物质萃取效果的影响,最终确定顶空固相微萃取最佳萃取条件为:使用50/30 μmDVB/CAR/PDMS萃取头、40℃条件下萃取60 min.质谱的采集使用选择离子监控模式.该方法的线性良好(R2>0.99),准确性高(16种物质的加标回收率在85.7%~118.0%之间),稳定性强(相对标准偏差均低于9.98%),操作过程简便,能准确检测啤酒酿造大米中16种风味物质的含量,对啤酒风味和质量控制具有一定作用.
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