内蒙古乌海地区果园及发酵醪液中酿酒酵母菌的筛选

为筛选本土优良酿酒酵母菌种,从内蒙古乌海地区的果园土壤、葡萄表皮及发酵醪液中分离纯化得到了13株酵母菌株,通过复筛得到1株菌株KX3,对其进行了26S rDNA D1/D2区测序,鉴定为酵母菌属(Saccha-romyces)的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae),对照商业酿酒酵母菌进行耐受性及产品感官评定测定,菌株KX3的耐乙醇体积分数为16％,耐SO2质量浓度为400 mg/L,耐高糖质量浓度为500 g/L,耐pH值为2.5,与商业酵母CSM和CECA相比,菌株KX3生长特性良好,具备商业发酵耐受性的要求,发酵的产品在果香浓郁、酒体丰满程度方面优于商业酵母CSM和CECA,具有典型性,可用于葡萄酒的酿造.为本土酿酒酵母开发提供了理论支持.
以酿酒酵母和粟酒裂殖酵母的融合株--自絮凝颗粒酵母SPSC01为研究对象,选择搅拌式反应器为模式系统,利用聚焦光束反射测量仪(FBRM)在线检测了絮凝酵母颗粒的弦长频率分布.研究表明,在含有絮凝缓冲液的模拟系统中,自絮凝酵母颗粒粒径分布符合对数正态分布.粒径分布的特征参数(M)与搅拌转速(r)之间的关系可用对数方程表示,从而简化了絮凝酵母颗粒粒径分布的定量表征.在真实的乙醇连续发酵过程中,细胞代谢生成的CO2对测量体系产生了干扰,利用建立的自絮凝酵母颗粒粒径分布的在线检测和定量表征方法,在数据处理过程中排除了这种干扰,得到了自絮凝酵母SPSC01絮凝颗粒的粒径分布.
SSR(Simple Sequence Repeat,简单序列重复)标记技术被广泛应用于葡萄的品种鉴定和遗传多样性研究.本研究选取43份葡萄种质,采用6对SSR引物对供试品种遗传多样性进行了分析,构建了DNA指纹图谱,并根据遗传相似系数,采用非加权平均法(UPGMA)进行聚类分析,以期为品种鉴定和亲缘关系分析提供参考依据.结果表明,6对SSR引物共扩增出64个多态性位点,观测杂合度在0.74~0.84;利用获得的DNA指纹图谱,可以实现对葡萄品种的区分;聚类分析表明,在遗传相似系数为0.13时,全部供试品种被分为3大类,可以区分酿酒品种和鲜食品种,并能区分欧亚种和欧美杂种.研究结果表明,SSR标记可以从分子水平上有效区分葡萄品种和分析其亲缘关系.
根据凡纳滨对虾抗菌肽 Lvcrustin－B的核酸序列，采用 PAS（PCR－based Accurate Synthesis）的方法合成Lvcrustin－B基因，通过双酶切及T4连接酶技术将Lvcrustin－B插入表达载体pYE－GAPα，获得重组酵母表达载体pYE－GAPα－Lvcrustin－B。 pYE－GAP α－Lvcrustin－B经限制性内切酶AVr II线性化后，通过电穿孔法转化至毕赤酵母细胞GS115，并使用Zeocin进行抗性筛选，从而获得高拷贝转化子，筛选出的酵母菌转化子经扩大培养后使用YPD培养基进行诱导表达。 PCR检测结果表明Lvcrustin－B基因被稳定整合至毕赤酵母染色体。 SDS－PAGE电泳及WB实验显示，目的重组蛋白Lvcrustin－B可在毕赤酵母中表达，分子量大小为19．4 kD，且表达方式为可分泌性表达，重组菌最佳培养温度为30℃。
本实用新型涉及白酒酿造技术，特别涉及一种白酒酿造容器。本实用新型的白酒酿造容器包括槽体，所述槽体上端开口，其底部向下突出设置并形成黄水存放仓，所述槽体内部的下部位于所述黄水存放仓上方的位置水平设有黄水槽筛板，所述黄水槽筛板上端的中间位置沿前后方向竖直固定有至少一个散热壳，所述槽体前后侧侧壁上分别开有与所述散热壳内部连通的散热孔，所述黄水存放仓底部设有排放口。优点：结构设计简单、合理，能够有效避免容器中心物料温度偏高而影响发酵的现象，同时，利于黄水的排放。
从上海奉贤、上海崇明、上海松江、湖北武汉、浙江绍兴、山东菏泽、辽宁铁岭等地葡萄园土壤中,经过分离纯化,得到4株酵母.通过26S rDNA D1/D2区域序列比对及构建系统发育树分析,结果表明:S1、S2、S3为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),S4为异常威克汉逊酵母(Wickerhamomyces anomalus).采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用,进一步对4株酵母菌的发酵香气化合物进行测定,并以商业酵母发酵酒作为对照.结果表明,4株酵母菌在葡萄糖酒发酵中的挥发性香气成分有所差别,相对于商业酵母,S1发酵酒中独有的香气化合物有十四酸乙酯、2-甲基丁醇、壬醛、癸醛、苯乙酮、1-十八烷烯等7种,S2发酵酒中独有的香气化合物有十四酸乙酯、十六酸乙酯、丙三醇、正己醇、2-甲基己醇、右旋柠檬烯等10种,S3发酵酒中乙醇含量明显高于商业酵母,S4发酵酒中苯乙醇和乙酸含量明显高于商业酵母.综合评价,S1、S2发酵酒的花香和果香更加突出,S3发酵酒具有较高的乙醇含量,S4发酵酒的乙酸含量最高.