木糖异构酶在酿酒酵母细胞表面的展示

将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus的木糖异构酶基因xylA,与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)a-凝集素表面展示载体pYD1的Aga2p亚基C端序列融合.编码融合蛋白的基因序列前接上半乳糖诱导型启动子.用LiAc完整细胞法转化酿酒酵母EBY100.含重组质粒的菌株EBY100/pYD-xylA经半乳糖诱导表达外源融合蛋白,免疫荧光显微镜结果显示外源蛋白被锚定在细胞壁上,木糖异构酶活性测定结果表明,细胞壁上酶活测定值为1.52U,木糖异构酶在酿酒酵母细胞壁上得到活性表达.
为研究不同酵母对甘蔗果酒的发酵影响,以新鲜的甘蔗压榨汁为原料,常温下选用葡萄酒高活性干酵母、耐高温高活性干酵母和发利干酵母三种商业活性干酵母进行液态发酵酿制甘蔗果酒.研究探讨了三种酵母菌的生长曲线、凝聚性、发酵度、发酵力、酸化力和产酒精能力等酿酒发酵特性.结果表明,三种酵母菌作用甘蔗汁的发酵过程中,酵母菌生长曲线趋势基本一致,三种酵母菌的凝聚值F＜ 20％,均为非凝聚性酵母.三种酵母菌的发酵力基本相当的,最终产酒精的能力差距不大,其中葡萄酒高活性干酵母最终产酒精为12.2％ vol,耐高温高活性干酵母和发利干酵母均为12.0％ vol.从三种商用酵母菌对甘蔗汁酿酒的各发酵特性来看,葡萄酒高活性干酵母略优于耐高温高活性干酵母和发利干酵母.研究结果为甘蔗汁发酵酿制风味甘蔗果酒提供了技术参考.
果蝇是为害酿酒葡萄的重要害虫之一,且较难防治.为了明确酿酒葡萄园中果蝇的发生规律及不同颜色的粘虫板对果蝇的防治效果,本研究对山东省烟台地区'蛇龙珠'和'白玉霓'两个葡萄园中的果蝇发生情况进行了调查,并悬挂不同颜色的粘虫板进行防治效果分析,观察采收期虫果率的变化.结果表明,两个葡萄园中果蝇数量没有显著差异,且优势果蝇种类为黑腹果蝇,均在6月下旬开始出现,9月下旬至10月上旬达到高峰,分别可诱集到53.80±8.32和59.60±9.43头/诱捕器;其次为斑翅果蝇和叔白颜果蝇,发生期早于黑腹果蝇且数量不多.另外,蓝色和黄色粘虫板对果蝇的防治效果最好.因此,在'蛇龙珠'和'白玉霓'的栽培过程中,可在9月上旬开始悬挂蓝色和黄色粘虫板对果蝇进行防治.
良种良法配套是保证作物高产稳产的关键条件，由于浙江省晚季水稻收获普遍推迟，稻茬田种植大麦受到诸多主客观条件的制约，优质、高产、富硒啤酒大麦新品种“浙啤33”是浙江省大麦主导品种，需要针对浙江省农业生产特点推广“浙啤33”免耕节本高产栽培技术。2008至2009、2009至2010和2010至2011年度在嘉兴秀洲区和嘉善县建立“浙啤33”高产示范方6个，平均产量6555kg／hm^2，相对于嘉兴市大麦平均单产增幅为29．1％，辐射带动了全省大麦增产增收，增加了农民收益。
以废啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为原料,通过稀酸与稀碱处理获得碱不溶性酵母 β-葡聚糖(SCBG),进而在低温强碱/脲水溶液中氧化降解得到水溶性酵母β-葡聚糖(SCBGs),再经层析柱分离得到4个纯化组分(SCBGs-0-1,SCBGs-1-1,SCBGs-1-2和SCBGs-1-3).利用高效液相色谱、 高效凝胶渗透色谱与十八角激光光散射联用技术、核磁共振波谱及与刚果红结合实验等对4个纯化组分的单糖组成、 分子量及化学结构进行了分析,并通过其对巨噬细胞RAW 264.7吞噬能力及NO和TNF-α释放量的影响评价其免疫活性.研究结果表明,各纯化组分均由单一的葡萄糖构成,是一类以β-1,3-D-葡聚糖为主链且在主链C6位羟基上具有分支的β-1,3/1,6-葡聚糖,其分子量依次为198000,960000,270000和18700,除SCBGs-1-3外,其余3个组分均具有超螺旋结构,且4个组分均能显著增强RAW 264.7的免疫活性.
基于多重连接探针扩增（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）技术建立了一种六重过敏原成分检测方法，可实现食品中大豆、芝麻、花生、杏仁、榛子和核桃6 种成分的同时检测。选取多拷贝ITS基因为靶标基因，设计并合成6 组特异性杂交探针。探针经杂交、连接和聚合酶链式反应得到扩增片段，经毛细管电泳分析扩增片段大小可明确区分6 种过敏原成分。该体系经20余种相关植物、动物及微生物DNA验证显示其特异性良好，经模拟参考样品验证其检出限为5 mg/kg。30 份不同种类市售食品MLPA检测结果表明，该方法性能满足实际样品的过敏原的多重检测。因此，本研究建立的基于MLPA技术的六重过敏原检测方法特异性强、灵敏度高，能够为食品过敏原评估、标识管理和风险控制提供技术支撑。