222团发展酿酒葡萄的气候条件分析

根据葡萄的生物学特性及其对气候条件的要求,对222团的气候资源进行初步分析,结合3年葡萄生产的实际,提出本地区适宜酿酒葡萄的生长.
【目的】研究目的基因YBR 019C 缺失对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）菌株糖代谢和乙醇发酵的影响。【方法】以酿酒酵母野生菌 NF1002为出发菌株，选择2号染色体上的基因 YBR 019C 为目的基因，以质粒pUG6和 pUG66为模板进行 PCR，构建带有 Cre/loxP 系统的酿酒酵母YBR 019C 基因敲除组件，并转化酿酒酵母 NF1002，利用筛选标记 Kan r和 Ble r与YBR 019C 基因进行同源重组，筛选YBR 019C 双倍体缺陷型菌株。利用蔗糖和甘蔗糖蜜为碳源，对突变菌进行发酵特性的研究。【结果】成功获得YBR 019C 双倍体缺陷型菌株 NF-ybr。碳源同化实验表明，突变株和野生菌均能利用葡萄糖和蔗糖，不能利用乳糖和木糖；但相比野生菌，突变株利用棉子糖和麦芽糖的能力有所下降，而且完全不能利用半乳糖。蔗糖发酵实验表明：突变株 NF-ybr 与野生菌株相比，在发酵终点乙醇浓度提高10．7％，发酵周期有所延长。按目前甘蔗糖蜜乙醇生产的发酵工艺，突变株在30℃发酵72h 的醪液乙醇含量为12．52％，低于野生菌的13．89％。【结论】YBR 019C 基因的缺失影响了菌株对糖份的利用，导致乙醇发酵能力不及野生菌。本研究为菌株高效快捷的基因改造提供了参考。
[目的]优化麦芽的糖化工艺条件,探究麦芽的水解作用规律,获得发酵优良的麦汁.[方法]以还原糖、总糖、α-氨基氮和可溶性蛋白质的含量为指标,探究麦芽蛋白质休止温度、糖化的温度、时间、初始pH等工艺参数对麦芽淀粉和蛋白质水解的影响.[结果]糖化温度是影响麦芽淀粉水解的主要因素;蛋白质休止温度、时间及初始pH是影响麦芽蛋白质水解的主要因素.麦芽糖化工艺优化结果:50℃蛋白质休止1 h,65℃糖化40 min,72℃糖化20 min,初始pH为5.0.该工艺制备的麦汁15℃发酵的酒精度达6.2％,实际发酵度达75.3％.[结论]该研究可为不同类型啤酒酿造制备特定的麦汁提供生产依据.
从园地选择与处理、苗木选择和栽植、葡萄架搭建、整形修剪、病虫害防治和越冬管理等方面介绍了酿酒葡萄的栽植管理技术.以期为当地酿酒葡萄的连片种植提供技术指导,从而促进农业结构调整.
香叶基香叶醇(geranylgeraniol,GGOH)是生产香料、药物、维生素A和E的重要中间体,其生物活性构型为(E,E,E)-GGOH.为了提高酿酒酵母的(E,E,E)-GGOH产量,在表达了香叶基香叶基焦磷酸合酶-法尼基焦磷酸合酶融合酶(BTS1-DPPl)和香叶基香叶基焦磷酸合酶-二酰基甘油二磷酸磷酸酶融合酶(BTS1-ERG20)的初始菌株(产34.85mg·L-1GGOH)的基础上,本实验进一步利用代谢工程的手段对法尼基焦磷酸(FPP)代谢节点处进行代谢流重排.一方面,过表达了来源于红法夫酵母的香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)合酶突变体(CrtE03M),增加了前体物质GGPP的供应,从而将GGOH产量提高了1.6倍,达到56.04mg·L-1;另一方面,利用葡萄糖诱导性弱启动子PHXT1对竞争支路关键酶角鲨烯合酶(ERG9)进行下调,从而使GGOH产量提高4.5倍,达到156mg·L-1.同时,通过敲除GAL80基因构建了葡萄糖调控的GAL体系,用以控制GGOH的合成,与PHXT1控制的角鲨烯合成支路一起,构成了顺序表达体系,最终,以十二烷为有机相,在摇瓶中进行两相发酵,培养72 h后获得GGOH产量183.07mg·L-1,与初始菌株相比提高了5倍.本工作对其他FPP下游途径的代谢调控具有借鉴意义.
为获得适用于高酸果汁发酵的酵母菌,本文从蓝莓和红树莓自然发酵的果汁中,分离筛选出2株在pH2.3、pH4.8时生长良好的酵母菌,经形态学、生理生化及分子生物学鉴定,编号J-23为季也蒙有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora guilliermondii),编号L-6为酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae).在pH2.3、pH4.8酸环境下,以市售果酒酵母菌和葡萄汁有孢汉逊酵母菌为对照菌株,对J-23、L-6酵母菌的耐酸适应性进行研究,利用扫描电子显微镜(SEM)和透射电子显微镜(TEM),分别对细胞膜、细胞壁及胞内结构进行观察,并对酸胁迫中过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力进行测定,结果显示:J-23和L-6酵母菌菌体形态无明显的凹陷、褶皱等现象,细胞结构清晰,且液泡变大;当pH2.3时,J-23酵母菌与对照菌1、L-6酵母菌与对照菌2中SOD酶活力分别为790.98、768.71、795.02、772.15 U/mL;CAT酶活力分别为389.81、370.85、385.17、373.31 U/mL.J-23和L-6菌株中2种酶活力均显著高于对照菌株,抗氧化能力增强,使菌株可以更好地适应酸胁迫环境.