酿酒酵母葡聚糖的研究进展

论述了酿酒酵母葡聚糖的结构特点和生物活性,介绍了葡聚糖的提取工艺和衍生化方法,并综述了葡聚糖在工业中的各种应用前景.
应用表面表达技术对来自Trichoderma reesei的β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母表面的表达及后期性质进行了研究.实验结果表明酵母表面表达酶有活性,该酶的最佳诱导时间为24 h,最适温度是70 ℃,而酶活的最适pH是5.5.使异源表面表达了Bgl1的酵母在以纤维二糖为唯一碳源的培养基中生长,发酵结果表明纤维二糖被明显利用了,但在培养186 h后,发酵液中仍残留一定量的纤维二糖.这种技术对纤维素发酵系统中纤维二糖酶活性低的现状有所帮助.
为了探讨大球盖菇黄酮类化合物提取工艺及其抑菌效果,通过正交试验确定了大球盖菇黄酮类化合物的优化提取工艺条件;采用大球盖菇黄酮类化合物对大肠杆菌、青霉菌、啤酒酵母进行抑菌试验.结果表明,优化后的提取工艺为:乙醇体积分数95%,物料比为1:90,温度60 ℃,时间120min,提取率为7.94‰.40 g/L的大球盖菇黄酮类化合物溶液对大肠杆菌和青霉菌有抑制作用;20 g/L和10 g/L的溶液只对大肠杆菌有抑制作用,对青霉菌没有抑制作用;大球盖菇黄酮类化合物对啤酒酵母没有抑制作用;对大肠杆菌的抑制作用要强于对青霉菌的抑制作用.
酰基-CoA—二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是微藻等植物三酰甘油(TAG)合成过程中的关键酶.为了解析缺刻缘绿藻TAG合成代谢的途径,在该藻转录组测序数据库中,通过同源搜索,发现了1个编码DGAT2的cDNA全长序列.该序列长1 997 bp,其中5'-非翻译区(UTR)长44 bp,3 '-UTR长897 bp,开放阅读框(ORF)长1 056 bp,编码1个含有351个氨基酸的蛋白质,预测的分子量为39.43 ku,等电点为9.46.基于缺刻缘绿藻和其他物种相应的DGAT基因编码蛋白序列所构建的Neighbor-Joining(NJ)系统进化树,结果表明该基因与DGAT2聚成一支,显著不同于DGAT1和DGAT3.氨基酸序列比对发现,该基因编码产物含有DGAT2所具有的HPHG这4个氨基酸所组成的高度保守特征序列.因此,将该基因命名为MiDGAT2.将它的cDNA与其DNA序列进行比较后发现,MiDGAT2含有6个内含子,其剪接位点均符合“GT-AG”规则.为进一步了解其功能,利用反转录PCR克隆了该基因的ORF序列,然后将其亚克隆到表达载体pYES2中,成功地构建了重组表达质粒pY-MiDGAT2.通过电穿孔法将该重组质粒转入酿酒酵母TAG合成缺陷株H1246中,经筛选与序列验证得到含有重组质粒pY-MiDGAT2的酵母转化株.酵母转化株在用SC培养基并加入半乳糖诱导表达培养后,其脂类的薄层色谱分析结果表明,所转的MiDGAT2基因能使酵母转化株恢复TAG合成的能力,从而证实了MiDGAT2基因具有DGAT的功能；利用荧光染料Bodipy对酵母细胞的染色结果显示,MiDGAT2基因能使酵母转化株的细胞重现油滴,尽管重建的油滴大小明显比野生型酵母的小.
为探究大球盖菇干燥前后风味成分轮廓数据及影响其良好风味的关键成分因子，对鲜品和4 种干制样品（热风干燥（hot-air drying，HAD）、真空冷冻干燥（vacuum freeze drying，VFD）、微波干燥（microwave drying，MWD）和自然干燥（natural drying，ND））中香气和滋味成分进行分析，共检出118 种香气化合物，经干制后香气丰富度提升显著（P＜0.05），VFD可大程度保留鲜品香气品质；提取19 个共有香气成分，作为大球盖菇特征成分轮廓，其中醛类化合物个数和含量优势明显，以正己醛（呈青草味）尤为突出。HAD较鲜品可溶性糖和游离氨基酸总量显著升高，VFD则呈味核苷酸损失最少，由此2 种干制方式等鲜浓度值（equivalent umami concentration，EUC）优势显著（P＜0.05）。风味感官综合评分VFD＞HAD＞ND＞鲜品＞MWD，基于评分和成分数据建立偏最小二乘回归模型，前3 个主成分R2X为79.4%，R2Y为98.9%，Q2为0.974，载荷信息显示2 种感官间交互影响明显；变量投影重要度分析显示，甜味氨基酸、1-辛烯-3-醇、丁基-2-辛烯醛和EUC，对大球盖菇良好特征风味呈现至关重要。本研究结果将为后续样品前处理方法筛选和风味相关产品开发提供理论依据。
覆冰过程中沿绝缘子串形成的未桥接冰棱和桥接冰柱是造成融冰期绝缘子串发生闪络的主要因素.为此,根据融冰物理过程,研究了冰棱相变过程中水滴喷射对未桥接冰棱闪络的影响.研究发现:水滴喷射过程缩短了冰板间距,改变了冰棱前端的电场分布,是诱发冰板间隙电弧的重要原因.未桥接冰棱受耐受电压值影响,其闪络过程存在沿冰面放电和冰内放电两种形式.桥接冰柱的初始电弧通常出现在冰柱内部气隙处,其融冰闪络路径沿冰柱内部形成贯穿通道.试验结果表明:桥接冰柱发生闪络需要更多的融冰能量来形成贯通通道,而完成击穿过程,因此桥接冰柱的闪络电压值较未桥接冰棱略高.110 kV全尺寸玻璃绝缘子覆冰闪络试验进一步证明,融冰时液滴喷射会形成沿冰棱和水滴路径的闪络通道.综合以上结论认为,融冰滴水是导致未桥接冰棱较桥接冰柱更易发生闪络的重要因素.