有机钙转化微生物的筛选、鉴定及其富钙研究

以从自然界筛选具有钙富集转化能力的微生物为目的,为今后获得具有安全、廉价、绿色的新型有机补钙剂提供参考.通过搭建钙富集微生物筛选的研究平台,用EDTA络合滴定法考察微生物对钙的富集量;通过不同来源石灰性土壤中放线菌、细菌和真菌类微生物的筛选,结合形态、生理生化、16S rRNA序列同源性和系统发育分析对其进行鉴定,并评价不同因素对其生长和钙富集的影响.本文成功建立了从自然环境中钙富集微生物筛选的研究平台,获得具有钙富集能力的放线菌11株,细菌12株,真菌30株;最终确定了的性状优良的两株菌T-1和T-HH,并初步鉴定为季也蒙毕赤酵母和胶红酵母,二者对钙的耐受量较啤酒酵母钙耐受量增加近100倍,达200 mg/mL,其中T-1和T-HH的最适pH值分别为5.0和6.0;最佳生长时间分别为54 h和78 h;最适的钙富集质量浓度分别为50 mg/mL和110 mg/mL,最终T-HH显示较好的钙富集性状,富钙率达60.97mg/g.
本试验旨在研究酿酒酵母和芽孢杆菌对育肥猪养分表观消化率、肠道形态结构和肠道免疫的影响.选取72头体重(62.50±0.83)kg的"杜×长×大"育肥猪,将其随机分为3组,每组4个重复,每个重复6头猪(公母各占1/2).对照组饲喂基础饲粮,酿酒酵母组饲喂基础饲粮+0.5 g/kg活性干酵母制剂(酵母菌活菌数1.0×1010 CFU/kg),芽孢杆菌组饲喂基础饲粮+0.1 g/kg芽孢杆菌制剂(芽孢杆菌活菌数1.0×109 CFU/kg).试验期56 d.结果表明:1)与对照组相比,芽孢杆菌组育肥猪钙和磷的表观消化率显著提高(P<0.05),酿酒酵母组钙的表观消化率显著提高(P<0.05);2)与对照组相比,酿酒酵母组育肥猪空肠隐窝深度极显著降低(P<0.01),空肠绒毛高度/隐窝深度值极显著提高(P<0.01);3)与对照组相比,芽孢杆菌组育肥猪空肠和回肠分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量均极显著上升(P<0.01).由此可见,饲粮中添加酿酒酵母和芽孢杆菌均可改善育肥猪对营养物质的消化吸收,其中酿酒酵母对育肥猪肠道形态结构具有一定的改善作用,而芽孢杆菌可提高肠道中的SIgA含量,提高肠道免疫水平.
以N-乙酰氨基葡萄糖和苯甲酰氯为原料,进行酯化反应,合成了苯甲酸乙酰氨基葡萄糖酯,用红外光谱、液质联用证实了其分子结构,并分析了产物的溶解性、熔点及抑菌活性.结果表明,在反应温度0℃、反应时间3h,苯甲酰氯/N-乙酰氨基葡萄糖摩尔比为4:1时,经提纯得到合成产物,合成产物主要为三酯.该产物在多种有机溶剂中都具有良好的溶解性;其熔点温度为171～175℃;抑菌活性随浓度升高逐渐增强,在pH3.5～7.5范围内均有较好的抑菌效果,在不同pH时,其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、黑曲霉的最低抑菌浓度(MIC)范围分别为2.4～ 2.6、1.4-1.6、2.0-2.2、1.8～2.0 g/L.
因柑橘中类黄酮化合物含量丰富,具有多种生理活性功能而被广泛应用于食品、药品、化妆品等行业.类黄酮主要从柑橘等植物中提取,少量通过化学合成或结构修饰.近年来,在大肠杆菌、酿酒酵母等宿主菌中构建代谢通路异源合成类黄酮的微生物方法已进入研究阶段,其具有安全性高,绿色环保,可持续发展的特点.本文简述了柑橘中类黄酮的合成代谢途径,微生物合成柚皮苷、橙皮苷、圣草次苷等类黄酮的研究进展及技术思路,对宿主菌代谢负荷大、基因表达效率偏低、碳通量流向不平衡等问题,提出优化宿主菌株选择、微生物共培养、表达体系优化及碳通量重定向等解决方案,以期对目前柑橘类黄酮的微生物合成研究提供参考.
研究了浸入式固相微萃取检测(DI-SPME)中国白酒风味成分的方法.对DI-SPME使用的条件进行了优化.其最佳检测条件是:将白酒酒精度调整到14%vol,采用PDME萃取头,在搅拌状态下,先将样品于30℃预热15min,再插入萃取头萃取30min.然后进行样品的GC-MS分析.对一种中国白酒样品进行了定量分析,发现DI-SPME的方法特别适合于中国白酒微量成分的检测.检测结果表明,浓香型酒中酯的含量约占整个微量香味成分含量的91%.一次检测出52个微量香味成分.
冰葡萄酒酿造过程中主要化学组分发生显著变化,尤其在主发酵期间糖分消耗和乙醇的产生,这些变化对冰葡萄酒的品质具有重要影响.本研究以威代尔(Vidal)冰葡萄汁为实验材料,接种酵母菌(ST)进行发酵酿制,利用HPLC-ELSD法测定冰葡萄酒发酵及陈酿过程中糖分含量的变化,同时检测乙醇浓度变化,酿造完成后进行微生物检测及感官风味评定.研究结果表明,冰葡萄汁中主要糖类为葡萄糖和果糖,在发酵过程中,葡萄糖含量从180.56 g/L下降至53.24 g/L,其中在第7d到第28 d下降最快;果糖含量从223.65 g/L下降至160.54g/L;乙醇浓度变化与葡萄糖含量变化呈负相关.最终成品的酒精度为11.0％ v/v.冰葡萄酒在橡木桶中进行陈酿过程中,葡萄糖含量下降至47.64 g,/L,果糖含量下降至151.25 g/L,酒精度下降至9.8％,微生物检测及感官评定均符合标准.本研究结果可为冰葡萄酒酿造提供理论依据,同时也为快速鉴定冰葡萄酒的真伪奠定了基础.