重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化及部分酶学性质研究

[目的]研究重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的性质.[方法]由重组大肠杆菌制备重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶发酵液,经乙醇分级沉淀和DEAE-650M离子交换层析分离纯化后进行SDS-PAGE纯度鉴定,最后分析纯化后重组酶的酶学性质.[结果]SDS-PAGE分析表明纯化后得到了较纯的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶,比活力达13 437 U/mg,纯化倍数为19.85倍,回收率这20.60%,分子量约30 kDa.纯化后重组酶的最适pH值为6.0,pH值4.5～6.0较稳定;最适温度为50℃,40～50℃较稳定;Cu2+和Fe2+对其活力有显著的抑制作用,Mg2+、Zn2+和Mn2+对其活力有抑制作用,比较适合在啤酒酿造上使用.[结论]该研究为重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的工业化应用奠定了基础.
黑龙江啤酒大麦基地无论是科研、生产及基地建设都取得了重大进展,4年共审定推广8个啤酒大麦新品种.其中垦啤麦7号经两年区试,平均比垦啤麦3号增产11.53%,一年生产试验平均增产12.65%.经连云港两年化验蛋白质含量比垦啤麦3号低1.4%,麦芽无水浸出率比垦啤麦3号高3.2%(82.65%).产量和品质都好于垦啤麦3号.4年共获得农垦总局一等奖两项、省科技进步三等奖两项.大麦种植面积和种植范围都不断扩大,由黑龙江东部种植扩大到全省以及辽宁、吉林和内幕的呼盟地区,2002年达到历史最高92万hm2以上.生产面积和范围扩大的同时,生产形式也发生变化,由原来单调的农户生产变为90%以上定单生产,逐步形成了产业化生产模式.随着品种和种植技术的不断推广以及生产体制的不断完善,东北啤酒大麦基地的形势会非常乐观.
目的:考察了过氧化氢和混合氨基酸前体对突变株YF(ZnClr2,Ethr)生产谷胱甘肽的影响.方法:在不同的摇瓶培养阶段分别添加不同浓度的过氧化氢和混合氨基酸前体,测得细胞干重及GSH浓度.结果:当发酵9h时添加12mmoL/L的混合氨基酸,GSH浓度提高了99.6%;而过氧化氢对细胞积累GSH几乎没有影响:当发酵12h时添加0.3mmol/L H2O2和18mmol/L混合氨基酸,GSH浓度提高了114%.结论:混合氨基酸能显著促进酵母谷胱甘肽的合成,而混合氨基酸和过氧化氢对细胞合成GSH具有协同促进作用.
目的：探讨膳食丙烯酰胺暴露对2型糖尿病大鼠病程进展的影响。方法：对糖尿病模型GK大鼠给予低剂量丙烯酰胺（2 mg/（kg mb·d））8 周后，研究其对大鼠空腹血糖、空腹糖耐量和胰岛素敏感性等血糖代谢相关指标的影响，同时测定血清生化指标、氧化和炎症因子水平，并对肝脏、肾脏、胰腺和腓肠肌进行苏木精-伊红染色，观察病理变化情况，分析丙烯酰胺暴露对GK大鼠脏器组织功能的影响。最后采用气相色谱-质谱联用仪对大鼠血清和尿液中的代谢物进行检测，筛选膳食丙烯酰胺暴露对GK大鼠造成影响的主要差异代谢物，分析其关联的代谢通路。结果：与对照组（灌胃去离子水）相比，膳食丙烯酰胺暴露进一步通过损伤GK大鼠胰腺、促进氧化炎症应激、影响胰岛β细胞功能和磷酸戊糖代谢通路等作用，导致糖尿病模型GK大鼠血糖代谢紊乱加重，具体表现为空腹血糖水平明显上升、空腹糖耐量受损和胰岛素敏感性降低。此外，膳食丙烯酰胺暴露的GK大鼠体内显著改变的差异代谢物有L-酪氨酸、肌醇、马尿酸、柠康酸、苯乙酰甘氨酸、N-乙酰基亮氨酸、喹啉酸、L-色氨酸以及5-羟甲基色胺等，与精氨酸和脯氨酸代谢、色氨酸代谢、磷酸肌醇代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢等氨基酸代谢有关，这些受影响的代谢物和代谢通路被认为与肝脏功能和神经组织功能异常相关。结合血清生化和病理分析证实，膳食丙烯酰胺暴露对GK大鼠肝脏、腓肠肌及神经组织造成了不同程度的损伤。结论：膳食丙烯酰胺暴露对糖尿病模型GK大鼠的健康造成严重不良影响，加剧血糖代谢紊乱，影响脏器组织功能。
本文从近年我国白酒行业的市场结构谈起,详细分析了白酒行业SCP范式,并对白酒行业的发展趋势作了分析.
为了改善玉竹Ploygonatum odordatum炮制品的质量,提高玉竹在药用或保健食品等方面的应用价值,在兼顾多糖、皂苷、总黄酮、醇溶物、水溶物和水分各指标的抗氧化活性和含量基础上,采用多指标综合评分法、层次分析法和正交试验法优化了玉竹的酒蒸炮制条件.玉竹最佳酒蒸炮制工艺为:酒润时间2.0 h,料液比100:20(玉竹:黄酒),酒蒸温度60℃,酒蒸时间1.0 h,其中料液比对各指标综合得分影响最显著.该方法操作简单、经济,有效提高了玉竹的利用率.