运用实时荧光定量PCR法研究榨菜腌制过程中细菌和真菌数量变化

为突破部分微生物在榨菜高盐环境难培养的局限,建立一种准确定量榨菜腌制过程中细菌和真菌数量的方法,并探讨动态变化过程.植物乳杆菌ATCC 8014的16S rRNA基因和酿酒酵母ATCC 9763的ITS基因分别与质粒载体连接作为标准参照物构建标准曲线,建立实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)方法,检测3个腌制时期腌制汁液中的细菌和真菌数量,同时检测理化指标.结果表明,所得qPCR标准曲线相关系数R2>0.99,扩增效率E均在95％ ～105％.腌制过程中,细菌和真菌分别在108.10～1010.43和105.29～107.75 copies/μL内变化,细菌在3个腌制阶段都有明显增殖,真菌仅在第3腌制阶段有明显增殖;腌制汁液中,pH值不断下降,NaCl的质量浓度和酸度主要在第2、3阶段先升高后下降.该结果为榨菜微生物过程控制提供参考数据.
民以食为天,水稻在我国有着极其广泛的种植范围,目前世界上有近一半人口,都是以大米为主食.水稻主要分为籼稻和粳稻、早稻和中晚稻,糯稻和非糯稻.水稻的果实即稻谷,将稻谷进行去壳处理后就是大米、稻米.对于水稻而言,不仅有食用功能,还能用于酿酒、制糖等工业.现如今,东北地区、长江流域以及珠江流域是我国水稻的主产区,是直接经济作物.本文中,笔者将就如何促进高海拔地区水稻增产增收提出相应的思路和具体措施.
一种微量元素饮用白酒的制造方法，将含有天然人体必需的微量元素的蜂花粉液加入白酒中，充分搅拌均匀后，经脱碳和高分子过滤器进行加压过滤制成，使白酒辛辣味大大减少，增加多种微量元素，提高白酒的保健功能。本发明比传统白酒除好饮外，能提高人体的免疫力、增强人体造血功能，防治心血管疾病，与长寿有着密切联系。
目的:为需埋土防寒的酿酒葡萄确定一个适宜的架式.方法:以白葡萄爱格丽为试材,以传统的独龙干形架式(independent long-stem pruning,ILSP)为对照,以单爬地龙架式(single crawled cordon training,SCCT)为研究对象,3个不同采收期采收的葡萄酿酒后,固相微萃取结合气相色谱-质谱联用(SPME-GC-MS)测定其香气成分.结果:爱格丽干白葡萄酒中共被检测出30种香气化合物,含量为3.9 μg～1.531 1 mg,共计14.0407 mg.ILSP有利于酯类的积累(除了花后80 d的乙醇酯).提前采收的SCCT葡萄酒能够积累更多的高级醇、乙醇酯和有机酸含量.推迟采收的ILSP葡萄酒能够赋予葡萄酒更复杂的风味.结论:SCCT能够促进葡萄酒香气化合物的较早积累,从而保证葡萄酒产量和品质的稳定性,有利于葡萄酒产业可持续的发展.
目的:制备人自身抗原细胞色素P4502D6(CYP2D6)257-351位氨基酸片段融合蛋白作为自身抗原,探讨ELISA检测抗LKM-1抗体的敏感性和特异性.方法:以肝脏的cDNA混合文库为模板作PCR,将PCR产物与真核表达载体pEGH共同转化酿酒酵母Y258,碱裂解法进行质粒制备,PCR扩增鉴定.表达载体构建成功后,在半乳糖的诱导下表达产生重组融合蛋白,经GST亲和层析法进行纯化后,免疫印迹法鉴定抗原性,ELISA检测抗LKM-1抗体阳性血清及部分其他结缔组织病患者血清中的抗LKM-1抗体.结果:重组融合蛋白在宿主菌中获得表达,免疫印迹法鉴定表明其能与标准抗LKM-1抗体阳性血清反应,而与正常血清、其他抗血清无反应.在26份抗LKM-1抗体阳性血清中,6份抗HCV抗体阳性血清用重组多肽ELISA检测有5份呈阳性,其余20份血清用重组多肽ELISA检测均呈阳性;20份其他结缔组织病患者血清用重组多肽ELISA检测均为阴性.结论:重组的257-351位氨基酸片段是CYP2D6抗原的主要抗原表位区域,以重组多肽为基质ELISA检测抗LKM-1抗体的敏感性较高,为进一步研究抗体水平与临床病情变化的相关性奠定了基础.
本发明涉及固体发酵装置，公开了一种白酒发酵设备，包括座体、蓄水池、料槽、酒液集料筒、搅拌装置和密封箱，蓄水池设置在座体下方，座体下端固定有支架，料槽和酒液集料筒均置于支架上，酒液集料筒设于料槽下方；所述密封箱为双层结构并置于蓄水池中，且料槽设于密封箱内，密封箱外层与内层之间为膨胀腔，密封箱内腔与膨胀腔连通；密封箱下部设有与膨胀腔连通的排气管，排气管上设有压力控制开关；搅拌装置包括驱动轴和转动连接在料槽内的搅拌器，驱动轴与密封箱固定连接，驱动轴与搅拌器通过相互配合且螺旋角大于55o的螺纹进行连接。在发酵时，该设备可对原料自动进行搅拌，并提高原料的散热效率。