小菜蛾p38 MAPK基因的克隆与生物信息学分析

小菜蛾(Plutella xylostellaL)是一种危害十字花科植物的世界性害虫,研究其基因功能为寻找新的小菜蛾防治方法具有重要意义.本研究克隆了小菜蛾p38 MAPK基因的开放阅读框(ORF),并根据其DNA序列推导出了蛋白一级结构,发现该基因编码一个含有349个氨基酸残基的蛋白.通过SMART网站分析发现该蛋白在第20 ～304位氨基酸残基区域存在着一个典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域,说明它是一个潜在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶.Blast比对发现Pxp38基因与家蚕Bmp38基因、酿酒酵母ScHOG1基因、人类Homo sapiens p38基因在蛋白一级结构上的相似性分别是91.7％、51.6％和78.6％,说明p38 MAPK基因在进化上具有较高的保守性.
[目的]建立一种超高效液相色谱法测定青稞酒中阿斯巴甜的检测方法.[方法]将青稞酒10.0 g在平行蒸发仪上减压蒸发至近干再用超纯水定容至10 mL,待分析.采用艾杰尔C18柱分离,在220 nm波长下检测.以0.02 mol/L的乙酸铵缓冲液和甲醇(V/V=87/13)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温40℃,进样量10μL.[结果]阿斯巴甜在10～200μg/mL线性良好(R2=0.9998),检出限为5μg/mL,加标回收率为93.0％～102.5％.[结论]此方法前处理简单、操作简便,具有较好的准确性和重复性,可用于青稞酒中阿斯巴甜的检测.
本发明公开了一种酱香型白酒的酿造方法，包括以下步骤：原料制备：将高粱及少量的小麦及小麦麸皮混合制备成原料；下沙；糙沙；轮次取酒；再经过馏酒，勾兑，储存后即可，所述下沙步骤中，下沙粉碎度为27～30%，加水量为所述原料总量的50％～52％，加入的水的温度为95°C～100°C；所述糙沙步骤中，糙沙粉碎度为37～40%，加入水量为所述原料总量的50％～52％，加入的水的温度为95°C～100°C；所述馏酒的温度是30°C～35°C。本方法与现有技术相比，可以解决现有的酱香型白酒生产工艺的粮食利用率低，出酒率不高的问题。
目的复方黑故纸酒剂的研制,用于治疗白癜风.方法拟定其酒剂的处方、制备方法及其使用方法.结果该制剂对白癜风的治愈率为82.23%,无明显不良反应.结论采用紫草加黑故纸配成酒剂对白癜风有疗效,可能与其所含有效成分有关,加之酒有助长药效的特点,所以效果很好.
高级醇含量高是制约液态法白酒发展的主要因素之一.为了降低液态法白酒中高级醇含量,本研究在传统液态法白酒发酵工艺的基础上,采用酵母、酶制剂和大曲协同发酵生产液态法白酒.系统地研究了酿酒原料、酵母菌种、酵母接种量、酶制剂(糖化酶、酸性蛋白酶)用量、酵母与大曲用量对液态法大曲酒中高级醇含量的影响.结果表明:酵母菌种、酵母接种量、酸性蛋白酶用量和大曲用量对液态法大曲酒发酵过程中高级醇含量影响较大,而酿酒原料和糖化酶用量对液态法大曲酒高级醇含量的影响相对较小.从酵母菌种看,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)A-3产高级醇总量最高(512.82 mg/L),酿酒酵母A-2产高级醇总量最低(441.51 mg/L),二者相差71.31 mg/L;随着酵母接种量从2×106 mL-1增加到12×106 mL-1,高级醇总量从376.52 mg/L增加到444.64 mg/L;酸性蛋白酶的用量为4 U/g时,高级醇总量为431.29 mg/L,比对照下降7.80％;大曲用量为原料的40％时,高级醇总量为207.73 mg/L,比对照下降59.98％.在优化后的条件下发酵,高级醇总量对比初始发酵条件降低了52.18％.
设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件.转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆子.半乳糖诱导表达Cre酶切除Kanr基因,在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,在原ORF处留下一个loxP位点,获得ADH3单倍体缺陷型菌株.利用同样的方法再次敲除双倍体的另一个等位基因.最终获得ADH3双倍体基因缺陷型突变株YS3-ADH3.