家蚕肽聚糖识别蛋白L1参与Imd信号通路

[目的]肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRP)作为一个重要的模式识别受体,在家蚕Bombyx mori的先天免疫中发挥重要的作用.本研究主要探讨家蚕PGRP-L1基因的功能及其所参与的免疫信号通路.[方法]本实验通过RT-PCR扩增获得家蚕PGRP-L1基因.利用微生物诱导实验对5龄起蚕分别注射大肠杆菌Escherichia coli、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis和PBS,12 h后取体壁和头部提取RNA,然后采用RT-PCR和凝胶电泳技术测定BmPGRP-L1基因的表达水平;利用RNA干涉实验向5龄起蚕注射PGRP-L1 dsRNA或PBS,6h后再分别注射3种灭活的微生物或PBS,然后检测家蚕体壁及头部的免疫相关转录因子(Rel,Cactus和Relish)以及家蚕多个抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)基因(攻击素基因Attacin,Moricin和葛佬素基因Gloverin)的表达情况.[结果]微生物诱导实验显示,注射大肠杆菌的实验组比注射PBS的对照组BmPGRP-L1基因转录水平显著上调,而注射酿酒酵母和枯草芽孢杆菌的实验组BmPGRP-L1转录水平没有变化.利用RNAi技术成功敲低BmPGRP-1表达,对BmPGRP-L1敲低的5龄起蚕注射灭活的微生物,敲低实验组relish因子表达低于正常对照组,相应地抗菌肽基因的表达也有不同程度的下调.[结论]结果提示,BmPGRP-L1基因参与家蚕对革兰氏阴性菌大肠杆菌的免疫响应;BmPGRP-L1基因在家蚕的体壁和头中参与Imd信号通路.
RAVE（ regulator of the H＋?ATPase of the vacuolar and endosomal membrane）由Rav1p、Rav2p和Skp1p3个亚基组成，是V ATP酶活性调节机制中一个关键的多亚基复合物调节因子； Leu1p能够与RAVE相互作用。通过融合PCR、同源重组分别构建了酿酒酵母BY4742的Rav1、Rav2、Leu1和Vma2缺陷型菌株。进一步研究重组菌株对pH及CaCl2的耐受能力发现：Leu1缺陷型菌株（3异丙基苹果酸异构酶（Leu1p）缺失）的生长状况与Rav1、Rav2缺陷型菌株的生长状况基本一致，表明RAVE对V ATP 酶的活性调节极有可能需要通过与Leu1p结合才能实现。笔者所在实验室为进一步研究RAVE与Leu1p的相互关系及其对V ATP酶的活性调节提供了重要依据。
5月29日,上海红酒交易中心在中信广场37楼举办了新址开业仪式。上海市政协副主席周太彤、上海市商务委党组纪检组长胡文君、虹口区政协主席管维镛、区副区长李国华、上海市酒类专卖管理局局长卢荣华等领导及交易中心众多高端客户与国内外媒体近百人汇聚交易中心的亚洲第一个专门红酒交易大厅
花色苷作为一种天然色素及抗氧化剂,广泛应用于食品、制药以及化妆品行业.据相关部门统计,2007年我国酿酒葡萄年产量超过200万t,其中大约70%用做酿造红葡萄酒,而酿酒葡萄的出渣率约在10%左右,其中33%为葡萄皮渣,即每年大约有4.6万t的葡萄皮渣被丢弃.本文探索了利用超声波细胞破碎机对酿酒葡萄皮渣中花色苷辅助提取的工艺影响,考查了影响提取率的主要因素,通过正交实验优化了提取工艺.采用分光光度法对花色苷产品进行分析.试验结果表明,最优的工艺条件为:乙醇浓度50%,温度40℃,超声时间20min,超声功率260w.在此条件下,所得最终产品的花色苷的提取率可达90.69%,未经纯化的色素浓缩液的色价为6.78.
以杨梅果汁为主要原料,将不同基酒(食用酒精、清香型白酒、杨梅蒸馏酒)与其混合调配,分别采用全二维气相色谱飞行时间质谱联用及超高效液相色谱对其挥发性成分和单体酚进行分析.结果 表明,杨梅蒸馏酒与食用酒精处理利口酒中单体酚的种类与含量均没有显著差异,清香白酒处理利口酒中单体酚含量则显著低于上述2种利口酒;此外,杨梅蒸馏酒处理得到的利口酒中香气化合物的检出数量与相对含量均要高于其他2种处理;偏好分析结果表明,青年学生群体最喜欢杨梅蒸馏酒和杨梅果汁调配的利口酒.该研究明确了不同基酒处理对杨梅利口酒品质的影响,为杨梅利口酒酿造工艺的进一步开发及优化提供基础数据与理论依据.
目的:研究川麦冬酒制前后化学成分的变化,建立酒制川麦冬中甲基麦冬黄烷酮A的含量测定方法.方法:取川麦冬生品和酒制品,用水提取,将提取液进行高效液相色谱分析,Waters Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.2％磷酸水梯度洗脱;检测波长:296 nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min;进样量:20 μL.比较川麦冬生品和酒制品的色谱图.结果:以进样浓度为横坐标,色谱峰面积的积分值为纵坐标,绘制标准曲线,计算得甲基麦冬黄烷酮A的回归方程为Y=15828p+ 42675,r=0.9998,线性范围为4.25～ 42.5μg/mL.甲基麦冬黄烷酮A峰面积的RSD值为0.85％.表明该测定方法精密度良好.测得甲基麦冬黄烷酮A含量的RSD值为0.67％,结果表明该方法重复性良好.甲基麦冬黄烷酮A的平均回收率为97.31％(RSD1.54％).加样回收率在95％～105％范围内,符合要求.川麦冬经酒制后甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B的含量明显提高.酒制品川麦冬化学成分发生了明显的量和质的变化.结论:川麦冬酒制品药性的显著变化正是其化学成分整体变化所导致的,有效成分整体增加,为麦冬的质量评价提供理论依据.