木霉T88 β-l,6-葡聚糖酶(BGN16.2)的基因克隆、表达及同源建模

利用RT-PCR方法克隆得到β-l,6-葡聚糖酶BGN16.2的cDNA序列,并采用半定量RT-PCR法,研究以茯苓粉及病原菌细胞壁为诱导物对该基因诱导表达的影响.构建该酶基因到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上,转化酿酒酵母,用CMC糖化力法对目的基因表达产物的酶活性进行检测.克隆得到BGN16.2的cDNA基因开放阅读框长度为1 290 bp,编码429个氨基酸,推测蛋白分子量为48 kDa,预测的等电点pI为5.25.该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的β-l,6-葡聚糖酶并分泌到胞外.发酵液中的酶活在培养60 h时达到最高(2.1 U·mL-1),最适酶解温度为50 ℃,最适pH值为5.5.对该酶的一二级结构进行生物信息学分析的基础上,利用同源建模的方法完成了该酶的活性区域三级结构的建模.
分析了现有输电线路覆冰增长模型在预测中的不足以及神经网络对非线性映射变量表达的优越性，提出了一种基于Levenberg—Marquardt学习算法的BP神经网络的覆冰增长预测模型。通过实验获取的覆冰增长数据样本训练BP网络，利用收敛的网络进行输电线路覆冰增长的预测，仿真实验误差1mm以下的有7组数据，远高于对比模型makkonoe模型的3组，验证了模型有效性，对输电线路的覆冰研究和预防有重要意义。
为揭示桑椹果酒主发酵过程中主要理化指标的变化情况,在糖度150g/L、柠檬酸添加量1g/L、温度26℃、酵母接种量2 g/L条件下,对不同发酵阶段桑椹果酒pH、总酸、挥发酸、酒精度、总糖、干浸出物、有机酸和感官形态进行了分析.结果表明,在主发酵过程中,pH先下降后上升,总酸先升高后降低,挥发酸、酒精度、干浸出物逐渐升高,总糖逐渐下降,发酵6d时,理化指标趋于稳定.发酵结束后,理化指标分别为:pH4.22、总酸4.31 g/L、挥发酸0.72 g/L、酒精度7.22％vol、干浸出物20.15 g/L、总糖1.55 g/L;有机酸含量中,酒石酸、乳酸、柠檬酸含量较高,分别为2.184、2.303、1.115g/L;通过感官评价,发酵6d后,桑椹果酒感官达到最佳,主发酵结束.
为提高工业啤酒酵母重组菌BJ X12-URA5发酵产尿嘧啶核苷酸的产率,采用响应面法优化对其发酵条件进行了研究.首先考察不同水平的温度、转速、初始pH、接种量以及Mg2+质量分数对尿嘧啶核苷酸产率的影响,在此基础上确定温度、初始pH、Mg2质量分数对尿苷酸产率影响较为显著,然后利用Design Expert8.05软件针对上述3个因素进行响应面优化试验并建立二次回归模型.最终确定的最佳参数为:发酵温度31℃、起始pH值8、接种量10％、转速200 r/min、Mg2+质量分数1.17 g/L.此条件下尿苷酸产率为0.76 g/L,较优化前提高了40％.
本文从结果习性、果实品质、栽培方式等方面,较详细地报道了冰酒葡萄品种威代尔在吉林省集安市的引种栽培试验结果,提出了该品种在我国寒冷地区适宜的栽培区域和栽培管理方式.
采用酿酒酵母催化苯乙酮酸甲酯不对称合成D-扁桃酸甲酯,其过程的最佳转化pH值为7.0左右.酵母生长代谢环境中的温度和氧水平对底物转化均有较大影响.采用固定化细胞填充床反应器转化苯乙酮酸甲酯,每克酵母湿菌体进料负荷为0.2 mmol/d,成功运行25 d,转化率保持在80%以上,D-扁桃酸甲酯ee值达95%以上.