RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用

目的应用RD-PCR技术分离酵母基因.方法首先提取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总RNA,纯化mRNA;然后,反转录成双链cDNA;再用限制性内切酶Sau3AI酶切,在酶切片段上加上接头后,用通用引物U进行第一次PCR扩增,以这一产物为模板用选择性引物(在通用引物的3'端延伸两个碱基)作第二次PCR扩增.5%PAGE胶分离基因片段,选择单带割胶回收,做第三次PCR扩增,与载体连接,最后进行测序分析.结果采用这种方法分离得到的基因片段,经Blast检索分析,确为来自酿酒酵母基因的cDNA片段或表达序列标签(EST).结论 RD-PCR技术可以有效地分离EST,可用于酵母基因表达调控的研究.
采用PDA培养基和麦芽汁固体培养基对孝感凤窝酒曲中的酵母菌进行分离,得到16株酵母菌.经显微形态观察和API 20C AUX菌种鉴定系统鉴定,将得到的酵母菌归属,其中9株属于酿酒酵母菌属,另外7株为假丝酵母菌属,并对其发酵特性进行了初步的研究.
本文以黄羊滩常规酿酒葡萄生产、玉泉营高档酿酒葡萄生产和玉米生产为例，研究在投入、产出与经济效益方面的差异，力求对酿酒葡萄生产的规律有更加深刻的认识。研究表明，酿酒葡萄生产是一项劳动和技术密集度高的产业，宁夏贺兰山东麓规模化酿酒葡萄基地必须重视葡萄园机械应用，葡萄酒企业坚持走“高端、优质、优价”的发展方向，酿酒葡萄基地和企业才能实现可持续发展。
本试验旨在研究不同配比复合益生菌制剂对爱拨益加(AA)肉鸡生长性能、屠宰性能和免疫指标的影响.选用320只1日龄健康雄性AA肉仔鸡,随机分为4组,每组4个重复,每个重复20只鸡.对照组(Ⅰ组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组饲粮分别在基础饲粮中添加1000 mg/kg不同配比复合益生菌制剂.试验期42 d.结果表明:1)1~42日龄时,Ⅲ组肉鸡的平均日采食量和平均日增重最高,料重比最低,与Ⅰ组差异显著(P<0.05).2)Ⅲ和Ⅳ组的胸肌率显著高于Ⅰ组(P<0.05).3)21和42日龄时,Ⅲ组肉鸡的血清免疫球蛋白A含量显著高于Ⅰ组(P<0.05).由此可知,饲粮中添加复合益生菌制剂可不同程度提高肉鸡的生长性能,改善屠宰性能,提高血清免疫球蛋白含量,其中以添加1000 mg/kg配比为1:2:1:1(枯草芽孢杆菌:酿酒酵母:嗜酸乳杆菌:乳双歧杆菌)的复合益生菌制剂效果最好.
为探究啤酒大麦新品种垦啤麦10号的最佳施肥量,研究了不同施肥量对垦啤麦10号产量和品质的影响.结果表明:垦啤麦10号的最佳施肥水平为270 kg·hm-2,即磷酸二铵135 kg·hm-2,尿素135 kg·hm-2.此时,垦啤麦10号的小区产量最高,为5.835 3 kg,蛋白含量最佳,为12.5％.
研究了不同培养条件对冰核活性细菌冰核活性和菌体生物量的影响.结果表明:培养时间、温度、低温诱导和培养基pH值对培养液中冰核活性细菌的总活性有不同的影响.研究确定的最适发酵条件组合为培养温度18℃,培养基pH6.5,培养时间32h.