振兴承德酒用高粱产业模式探讨

通过对“科研单位+酿酒企业+乡镇农业站+种植农户”模式的探讨，寻找出适合承德地区酒用高粱生产之路，从而实现企业和农民双赢。
目的:测试橄榄提取物对食品生产、加工和贮藏中常见的腐败菌的抑制作用,寻找橄榄抑菌作用的活性部位.方法:采用抑菌圈法测试橄榄提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、啤酒酵母、黑曲霉、黑根霉、青霉等细菌,酵母菌,霉菌的抑制作用,橄榄三个提取部位对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌的抑制作用.结果:橄榄提取物对测试菌种中的细菌和酵母菌有一定的抑制作用,但对霉菌几乎没有抑制作用.橄榄乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌有较强抑制作用.结论:橄榄提取物对细菌和酵母菌有一定的抑制作用,乙酸乙酯部位为橄榄抑菌活性部位.
以15个酿酒葡萄及砧木品种为试验材料,采用田间统计及生理生化指标测定的方法对干旱生境下不同酿酒葡萄品种的抗逆性进行研究。结果表明：在干旱生境下,各参试品种的越冬平均发芽率依次为‘SO4’〉‘520A’〉‘Ln33’〉‘5BB’=‘山河系’〉‘贝达’〉‘101-14’〉‘品丽珠’〉‘110-R’〉‘黑比诺’〉‘凤凰51’〉‘LDP294’〉‘威戴尔’=‘梅鹿辄184’〉‘梅鹿辄347’;可溶性糖和脯氨酸含量的大小顺序基本一致,并且与越冬发芽率顺序相近;SOD活性与可溶性糖和脯氨酸含量大小及越冬发芽率顺序差异较为明显。研究认为,通过统计越冬发芽率、生长状况及测定可溶性糖、脯氨酸含量,可以有效地筛选抗逆性较好的酿酒葡萄优良品种。
采用基因工程方法对酿酒酵母进行代谢改造，使酵母产生乳酸代谢途径。将来源于 L． mesenteroides和E?coli的D 乳酸脱氢酶基因，分别插入带有G418抗性的酵母穿梭质粒pYX212 kanMX上，电转化酵母，得到2株生产D 乳酸的酿酒酵母重组菌S? cerevisiae WE1510和S? cerevisiae WB1186。进一步摇瓶发酵试验表明：重组菌S? cerevisiae WB1186在YEPD培养基、20 g／L糖、pH 5的条件下生长条件最好，并具有更好的产乳酸能力。经3 L发酵罐条件下验证，S． cerevisiae WB1186分批发酵96 h，最终乳酸积累量达到18?0 g／L；发酵条件为培养基YEPD，接种量10％，溶解氧（DO）30％，转速150 r／min，初始葡萄糖质量浓度10 g／L，控制pH 5?0，通气量3 L／min，OD600最大值转为厌氧发酵。
观察和测定了6个啤酒大麦品种在陇中丘陵沟壑区的性状表现及品质变异情况.结果表明:甘啤2号、甘啤3号、甘啤4号和9303等4品种对当地环境具有良好的适应性,法瓦维特和Aspen表现较差.6品种收获籽粒蛋白质含量均超国家啤酒大麦标准,不适用于啤酒酿造.陇中丘陵沟壑区发展啤酒大麦种植,必须立足当地自然条件,培育适宜的专用品种.
目的将水蛭素基因转入酵母系统中进行表达,以评价人工合成基因在真核系统中表达的可行性和探讨影响表达水平的因素.方法根据水蛭素变异体1(HV1)的氨基酸序列,选择酿酒酵母偏爱的密码子,设计了HV1基因.将HV1基因分12个寡核苷酸片段,进行人工合成,并连接成一个完整的水蛭素基因.经PCR扩增后,将扩增产物连到克隆载体pBS-SK(+)上并进行DNA序列分析.用正确的HV1基因与酵母α因子信号肽基因相连,并一起插入酵母表达载体pYC-DE,经鉴定表明,获得正确的重组表达质粒.将后者转入酿酒酵母BJ1990细胞进行初步表达.结果在筛选出的阳性克隆的培养上清中,检测出的水蛭素活性为30抗凝血酶单位(ATU)/ml.所表达的量高于HV2在酵母中和HV1在原核系统的表达水平.N末端氨基酸序列与天然水蛭素一致.结论采用人工合成的HV1基因和较强的启动子在酵母中进行表达是一较好途径.