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工业酿酒酵母重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶部分酶学性质的研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-18 阅读:632
用刚果红法测定β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶活力,研究重组酿酒酵母(S.cerevisiae)菌株SC-βG分泌表达的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的部分酶学性质,并与出发菌株枯草芽孢杆菌(B.subtilis)表达的原始酶的性质进行比较.结果表明,重组酶保持了与原始酶相同的底物专一性.重组酶的最适反应温度为35℃,而原始酶为55℃.重组酶的热稳定性也发生了改变,40℃热处理20min只保留63.4%的最初酶活力,但温度再升高时对热处理敏感度降低,70℃的热处理20min仍保留45.9%的最初酶活力;而原始酶50℃时稳定,60℃以上的热处理酶活力损失很大.与原始酶相比,重组酶的最适pH值下降为pH5.0,而原始酶为pH6.5;相比原始酶在pH7.0有最大稳定性,重组酶在pH5.5时有最大稳定性.重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的最适反应条件与原始酶相比更接近啤酒的实际生产条件.
目的:研究酒制牛膝的微波炮制工艺.方法:采用正交试验设计,以总皂苷、齐墩果酸和β-脱皮甾酮的含量为评价指标,优选最佳的微波炮制工艺.结果:酒牛膝最佳炮制工艺为20%黄酒闷润60 min,60%微波3 min.结论:该方法操作简单、可控,为酒牛膝的炮制提供了参考.
应用八种苏木精染色液和三种伊红染色液配制法,对组织石蜡切片进行了染色比较试验,试验结果表明,Harris苏木精液、Mayer苏木精液、Gill半氧化苏木精液、碘化钠氧化苏木精液和1%伊红复制液、1%伊红酒精液的染色性能稳定,能长期使用,氧化膜较薄,结晶析出较少,配制方法简便,染色效果良好.
目的 比较两种不同的NIH 小鼠种群基因组DNA中H-2q单倍型的百分比,对重组基因乙型肝炎疫苗 (酿酒酵母)、重组基因乙型肝炎疫苗 (CHO)、重组基因乙型肝炎疫苗 (汉逊酵母) 和治疗性乙型肝炎疫苗 (乙克) 免疫应答的影响.方法检测乙肝疫苗免疫效力用酶标法,测定乙肝疫苗的ED50值,再通过微量细胞毒法和PCR方法检测小鼠的H-2单倍型,计算不同品系小鼠H-2q的百分数,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性.结果经验证,经1号NIH小鼠检测结果证实,重组基因乙型肝炎免疫效力依次为CHO>汉逊>酿酒,疗性乙型肝炎疫苗 (乙克) 效力检测合格,但经2号NIH 小鼠检测结果显示除CHO疫苗合格外,其他三种疫苗检测结果均为不合格.基因检测结果为,1号种群NIH鼠含有H-2q型基因的百分比是96%,而2号种群NIH 小鼠含有H-2q型基因基因百分比为30%,因此不同的q型基因百分比导致了不同的检测结果. 结论根据本研究结果表明虽然NIH鼠的H-2单倍型中有q型基因,但不同来源的小鼠种群之间会存在差异,经不同的环境饲养后,小鼠的基因会发生不同的变化,因此在进行生物制品检定时,要注意不同品系小鼠及同一品系小鼠不同种群之间的差异对试验本身的影响.建立一种"动物免疫"的概念.
以广西某啤酒厂废水为基质,有效体积10L的UASB为反应器,利用驯化后的污水厂脱水污泥为种泥进行发酵产氢.批式试验结果表明,温度和pH值对发酵产氢影响显著,产氢的最佳温度为37℃,最佳pH=5.5,最大产氢速率达到3.41mL/(L·h),产气中氢气的含量达到50.2%.连续流试验表明,在T=37℃、pH=5.5条件下,最佳HRT=8.0h,最大产氢速率达到3.29 mL/(L·h),最大氢含量达49.3%.
为进一步丰富我国酿酒酵母资源,从贺兰山东麓葡萄酒产区的6个不同品种的成熟期酿酒葡萄果实上分离获得9株野生酿酒酵母,以商业酿酒酵母F15为对照,对分离所得菌株分别进行酒精、SO2、葡萄糖、pH和高渗等耐受性以及β-葡萄糖苷酶活力和果糖利用率影响因素的研究.结果表明,菌株B-1比较适合用于酿造葡萄酒,且β-葡萄糖苷酶主要存在于酿酒酵母细胞外;酿酒酵母的PFK及HK的活性与果糖利用率无相关关系.

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