整合过表达嘌呤代谢途径关键酶基因提高酿酒酵母菌株环磷酸腺苷产量

调控嘌呤代谢途径关键酶基因表达水平,会影响经AMP→ ADP→ ATP而生成的cAMP(cyclic adenosine mnophosphate,cAMP)产量.将酿酒酵母编码磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷酸激酶基因ADK1,分别置于磷酸甘油酸激酶基因PGK1的启动子PGK1p和终止子PGK1t控制下,利用整合载体YIplac211,在菌株GA125中进行整合表达,通过摇瓶实验考察所得菌株的环磷酸腺苷产量.结果表明,在加腺嘌呤条件下,120 h时的cAMP产量分别为(5 380.5±1.91)、(5 189.4±1.72)、(5 131.8±2.05)和(5 199.9±1.62) μmol/L,较菌株GA125分别提高9.8％、5.9％、4.8％和6.2％;此外,ADK1过表达导致一定的生长抑制,所有菌株的腺嘌呤消耗量在(0.399±0.01)～(0.447±0.02) g/L,葡萄糖利用和乙醇产生上彼此没有呈现明显差异.
以豆奶为原料,经微波辅助处理后加酶水解,用水解液发酵酸酒.探讨了微波辅助处理功率、时间、加酶量、水解温度和时间、水解液pH等对豆奶水解效果的影响.结果表明,豆水质量比为1:10的豆奶,在微波功率180 W下处理20s,加入2%木瓜蛋白酶,60℃下水解3 h,控制水解液pH值7.0,得到氨基酸含量丰富的豆奶水解液;在此基础上通过正交试验,得出豆奶水解液发酵制酒的工艺条件为:接种0.025%酵母,加入18%蔗糖,控制酶解液pH值3.3,在22～24 ℃发酵9 d,发酵液中加入0.3%复合稳定剂,20～23 MPa压力均质,所得产品风味好、口感细腻、稳定性高,不仅含有大豆的营养物质,还有发酵酒的芳香.
综述了PCR技术在啤酒腐败细菌鉴定方面的应用及最新进展;介绍了3种PCR技术,特别讲述了利用这些技术对啤酒中乳酸菌的鉴定;并分析了PCR技术的局限性,对其应用前景进行了展望.
为了筛选适宜的简化防寒方法以替代树体下架埋土防寒，采用温湿度实时监控技术，检测了泰安地区最低气温情况，并对比研究了泰安地区冬季最冷时段葡萄园在简易覆盖和埋土防寒情况下土壤温度和湿度的变化特点。结果表明，1月所监测葡萄园冬季最低气温达到-15～-16℃；与埋土防寒相比，各种覆盖方式均能显著提高不同深度土层温度的最低值和平均值，保温效果依次是双毡+膜＞双毡=单毡＞埋土。其中，单层毡布覆盖操作简易，价格低廉，其地下5 cm、10 cm、20 cm及40 cm土层极低温度分别为0.91℃、1.28℃、1.69℃、2.80℃，均在0℃以上，明显优于埋土防寒的-2.95℃、-0.45℃、0.66℃、1.80℃；覆单毡后地下20 cm土层的相对湿度为76.47%，较埋土防寒提高23.4%，利于葡萄度过干旱的冬季；覆单毡后赤霞珠的物候期比埋土防寒推迟7d；但发芽率和坐果率没有显著差别。本研究表明，在冬季最低气温不低于-16℃的泰安或类似地区，采用覆毡的简易防寒方式有替代埋土防寒的可行性。
以野生型苹果酒酵母菌为出发菌株,利用离子注入对其进行诱变.结果表明,对苹果酒酵母菌的最佳离子注入剂量为8×1015/cm2 N+,此时致死率为70.4%. 用此剂量诱变后的一些菌株菌落特征和形态发生了变化.对菌株进行发酵试验比较,获得一株酒精产率较高的菌株,发酵至第十天时,酒精产率最高,可达到9.0%(φ酒精),比出发菌株高出10.7%.
以豆粕为原料,米曲霉、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌为菌种发酵豆粕,通过酸溶性蛋白含量的变化评价发酵效果.通过单因素试验研究了接种顺序、接种比例、接种量、含水量、发酵时间和发酵温度对酸溶性蛋白含量影响的趋势.在此基础上运用响应面分析得出最佳发酵工艺条件:接种量10％、含水量60％、发酵温度32℃.在最佳条件下发酵豆粕酸溶性蛋白的含量为20.73％.