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重组酿酒酵母5-氨基酮戊酸合酶在大肠杆菌的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-16 阅读:855
以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶(第一个氨基酸残基为Asn63)的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),在0.5 mmol·L-1的IPTG诱导下,SDS-PAGE显示分子量约为49 kD的特异条带.重组菌在紫外灯下显示红色荧光,表明酶在大肠杆菌体内活性表达.体外反应表明,在浓度超过0.1 mmol·L-1的IPTG诱导下,酶活力下降,培养基的初始pH值约为6.5,5-氨基酮戊酸产量达最大,且主要分泌到胞外.
本发明涉及一种糯米甜酒与白酒混合酒的制备方法,包括以下工艺步骤:第一步:选用糯米作主料经过高温蒸熟,加入甜酒药曲拌均匀,再加入25~35℃的水,置于容器内密封发酵,发酵温度控制在25~35℃,时间控制在24~36小时,有容器边见缝,且口感有甜味,即开封,在常温下保养3天以上,制成糯米甜酒中间体,其中各组份的投料重量比为:糯米100份,甜酒药曲0.6~1份,水60~100份;第二步、在糯米甜酒中间体中加入48~60°纯白酒,每100重量份糯米甜酒加入100~120重量份白酒,搅拌,置于密封容器内,经过二度发酵,发酵时间三个月以上,再经过滤,沉清,即可罐装制成混合酒成品。此酒酒质纯和香味丰满,色泽淡黄,口感和醇,略有甜味,营养丰富,经常饮用有健脾、胃、补肾活血之功能。
本试验选用杜洛克、长白、大约克三元杂交仔猪80头,采用四处理两重复对比饲养试验:前期(25~50 kg),试验组B、C、D日粮分别添加鲜啤酒糟10%、15%、20%,后期(50~105kg),试验组日粮分别添加鲜啤酒糟15%、20%、25%,对照组A(CK)全期饲喂基础日粮.经过100天(全期)试验,结果为:试验组B、C、D日增重分别为730.52g、675.78g、626.46 g,对照组A(CK)组为729.14 g,饲料报酬B、C、D组分别为3.21、3.27、3.33,A(CK)组为3.23,每头猪经济效益B、C、D组分别为138.06元、112.91元、103.54元,A(CK)组为101.61元.
以酿酒酵母为研究材料,采用酵母全基因组表达谱芯片,分析超氧化物歧化酶SOD1基因缺失( sod1Δ)对酵母细胞应答真菌细胞壁抑制剂钙荧光白( CFW)全基因组转录表达谱的影响,为揭示植物病原真菌细胞壁调控机制以及植物抗真菌基因工程改造提供新的理论基础. 结果表明:CFW (10 μg/mL)处理1 h后,与野生型酵母细胞相比,sod1Δ酵母细胞中211个基因发生了显著差异表达(97个基因表达上调、114个基因表达下调). 随机选取5个差异表达基因采用定量PCR验证,结果与芯片分析结果一致. 差异表达基因功能主要涉及细胞壁、细胞代谢、蛋白质合成、细胞防御以及大量功能未知蛋白. 以上结果表明, SOD1 基因缺失可显著改变酵母细胞应答真菌细胞壁抑制剂CFW胁迫的全基因组转录表达谱.
输电线路的覆冰及其引起的各类冰害事故严重危害电力系统的安全运行,根据2015年11月中旬辽宁电网发生的重大冰害事故,对辽宁电网冰害事故的特点及原因进行了分析和总结,以期为提高电网的安全可靠性、增强电网防冰减灾和防止其它类似自然灾害的能力提供参考.
无细胞生物传感器是一类基于无细胞系统设计的微量物质检测工具,解决了早期活细胞生物传感器无法检测有毒物质、响应时间长、受活细胞控制、操作不便等问题。近年来,无细胞生物传感器以其检测范围广、响应速度快、灵敏度高和便携性好而受到广泛关注。本文按照构建无细胞传感器平台进行分类,并对不同类型无细胞传感器的构建和特点进行综述,进一步介绍其在金属离子、农药与兽药残留等领域检测的研究进展,并对其应用前景进行展望。

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