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酿酒酵母HAL1基因的克隆及植物表达载体的构建

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-15 阅读:524
HAL1基因是酵母中重要的耐盐基因.以酿酒酵母 AS2.375菌株的DNA为模板,根据已发表的序列设计引物,经PCR扩增得到约900bp的HAL1基因片段,连接到pMD18-T载体上,转化大肠杆菌JM109,筛选重组质粒进行酶切分析和序列测定,结果显示已克隆到完整的可读框,该基因的序列与已知序列同源性达99%.将HAL1基因从T-载体上切下连接到AM194载体上构建了HAL1基因的植物表达载体,用于烟草的转化获得了耐盐性提高的转化植株.
为了提高产酶能力,采用常压室温等离子体(ARTP)与紫外(UV)复合诱变技术对酿酒酵母G13、G21菌株进行递推式复合诱变,经过一轮ARTP诱变两轮UV诱变,摇瓶培养筛选到两株高产β-葡萄糖苷酶的菌株Dea-G13D1Z2、Dma-G21D1Z2,经连续5代发酵生产试验,产酶水平可分别稳定在240.93和173.38 U/mL,是出发菌株G13、G21酶活的4.61倍和3.59倍.递推式ARTP-UV是一种有效的微生物突变育种的方法,可有效应用于微生物育种工作.
膨润土是一种重要的化工原料,由于其独特的晶体结构,具有较大的表面积、较强的膨胀性、吸附性及脱色能力,经提纯或改性后广泛用于食品工业中如油脂、酿酒、饮料和调味品等的脱色澄清处理.本文介绍了膨润土的晶体结构、基本特性及吸附脱色机理,同时,重点综述了其在食品工业中的应用研究,并展望了其应用前景,为膨润土产品的研发及应用领域的拓宽提供了依据.
2018年,我国风力发电机组新增约2200万kW,累计装机容量达到2.1亿kW,占全国各类发电装机容量的9.7%,但是由于各种原因,全年弃风电量达到277亿kW·h.通过详细介绍2MW风力发电机组叶片覆冰的监控现象、状况,得出叶片覆冰的影响,以及如何人为解决自然因素造成的危害.
本试验选取329个葡萄品种(217个鲜食品种,112个酿酒品种),在葡萄成熟期采集果实,对其粒质量、体积、密度、横径、纵径,以及硬度、可溶性固形物含量7项果实性状进行测定,并将其分类为鲜食和酿酒品种、欧美种和欧亚种,以及不同果形的葡萄进行果实性状的相关性分析及变异程度的比较.结果表明,鲜食葡萄与酿酒葡萄的比较分析中,酿酒品种的各个性状总变异程度要高于鲜食品种,粒质量、体积呈偏正态分布,密度、硬度呈正态分布,粒质量、体积、纵横径之间存在显著的正相关关系,密度与硬度之间相关性不显著.欧美种与欧亚种比较中,欧美种葡萄变异系数更高一些.在不同果形的种质资源调查中,共发现有10种果形,分别是扁圆形、圆形、近圆形、椭圆形、卵圆形、倒卵圆形、鸡心形、长椭圆形、圆柱形、束腰形.其中椭圆形果实所占比例最高,达到25.23%;束腰形、扁圆形变异度最高,分别是8.46%、8.09%.
2001~2006年,引种8个山葡萄种内和种间杂交品种,筛选出适宜当地气候和土壤条件、抗寒、产量高、可酿造干红葡萄酒"左优红"、加工果汁饮料的"哈桑"、用于调色和调酸的"双优"和"双红"为当地主栽和推广品种.

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