重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原过程的限制性步骤

考察了重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原(HBsAg)的限制性步骤,发现在对数生长期的中后期,与发酵初期相比,外源质粒的拷贝数下降了40%,此后质粒拷贝数在低水平保持稳定.在发酵过程中添加乙醇胺,抗原基因启动子的转录效率下降了24%,但抗原效价上升了31%,说明HBsAg表达的主要限制步骤在抗原多肽的翻译和颗粒形成的后加工过程.
优质白酒与贮藏有着密不可分的关系,而贮藏容器对白酒的贮藏效果有着很大的影响.通过采用有釉与无釉2种不同陶坛容器贮藏浓香型原酒,比较彼此之间的气相色谱成分和理化指标变化,并结合感官品评结果,研究不同贮藏容器对白酒酒质影响的差异.结果 表明,不同的贮藏容器对原酒中的微量成分有一定的影响,不同贮藏容器所贮藏原酒的醛、醇、酯等含量变化趋势基本相同,但是采用3 kg无釉陶坛贮藏的原酒酒样中醛、酯等含量较0.5 kg有釉陶坛和2.5 kg有釉陶坛2种储藏容器的低,总酸含量及电导率更低,酒体的口感更加醇厚协调.该研究初步揭示了不同陶坛贮藏容器对浓香型原酒贮藏过程的影响,为浓香型白酒的贮藏以及提高白酒的品质提供理论基础.
以菌株EC1118、KD、X16、D254、BO213发酵的无花果酒为研究对象,通过气相色谱对不同商业酵母发酵的无花果酒中高级醇进行分析比较,并对无花果汁及酒中氨基酸的含量进行分析比较,通过聚类分析将不同酵母发酵的酒进行聚类,筛选出较优的菌株.结果表明:5株酵母发酵的无花果酒中主要检测到正丙醇、异丁醇、异戊醇、苯乙醇,各菌株发酵的酒中高级醇总量依次为:EC1118＞ KD＞ X16＞ D254＞ BO213,异戊醇是各菌株发酵酒中主要的高级醇,无花果汁及酒中均检测到17种氨基酸,总游离氨基酸含量依次为:无花果汁＞X16＞BO213＞ EC1118＞ KD＞ D254,各菌株的总游离氨基酸含量存在显著差异(p＜0.05),菌株X16发酵的酒中总游离氨基酸和必需氨基酸含量显著(p＜0.05)高于其他菌株分别为465.72、87.62 mg/L;聚类分析将菌株X16发酵的无花果酒聚为一类.通过对各样品进行分析,最终筛选出较优的酿酒酵母X16.
在采用淀粉酶同工酶方法分析3种汾酒大曲的基础上,结合凝胶成像分析建立了汾酒大曲后火曲定量分析的方法.结果 表明,3种汾酒大曲具有丰富的淀粉酶同工酶酶带,于Rf值为0.28处后火曲有1条特征酶带不同于清茬曲和红心曲.利用该酶带作为后火曲的标记进行同工酶电泳分析,后火曲浓度(mg/ml)在0-1.736范围内与特征条带的峰面积呈良好的线性关系.后火曲酶粗酶液在4℃储存6d稳定.2倍量的清茬曲和红心曲对后火曲测定的干扰率分别为9.85%和10.28%,回收率为96.46%.与自配样理论值相比,相对误差为7.60%,4批生产曲样中后火曲的测定,RSD均小于5%.该法灵敏度高,操作简单,能够用于汾酒酿酒混合大曲中后火曲含量的测定.
为优化红肉蜜柚果酒发酵工艺,以红肉蜜柚果汁为原料,在对发酵温度、二氧化硫添加量、果酒干酵母添加量、发酵时间、初始糖度和初始pH单因素实验基础上,应用Box-behnken中心组合实验设计,并进行响应面分析优化红肉蜜柚果酒发酵工艺.结果表明,红肉蜜柚果酒发酵最佳工艺条件为:发酵温度28℃、二氧化硫添加量61 mg/L、果酒干酵母添加量61 mg/100 mL、发酵时间15 d,在此优化条件下,红肉蜜柚果酒的酒精体积分数为13％,与响应面预测值13.25％拟合性较好,其残留总糖为1 g/L左右、酒呈淡橙红色,澄清透明,气味芳香,酒香浓郁,带有明亮的柚子风味,口感柔和,对实际生产有一定指导意义.
实验基于主要发酵副产物的生成含量评价优选发酵毕赤酵母与酿酒酵母混合发酵对葡萄酒质量的影响.采用优选发酵毕赤酵母Z9Y-3和商业酿酒酵母F33设计同时和顺序两种接种方式启动模拟葡萄汁的酒精发酵,以酿酒酵母和发酵毕赤酵母单菌株发酵为对照.琥珀酸和乳酸利用高效液相色谱法测定,甘油采用高碘酸钠氧化法分析,挥发酸采用水蒸气蒸馏法测定.结果显示,优选菌株参与下的发酵没有显著影响酒精发酵的进程,但在发酵过程中发酵毕赤酵母生长速率低于酿酒酵母.与酿酒酵母纯发酵相比,混合发酵提高了甘油的含量,降低了挥发酸的含量,其中顺序接种的发酵过程中酿酒酵母活菌数最高,发酵毕赤酵母存活期最长(7 d),发酵过程中甘油累积量最高(2.7 g/L),挥发酸含量最低(0.2 g/L).不同发酵处理中,琥珀酸和乳酸含量均呈现先增后降的趋势,但其最终含量变化不显著.综上可得,优选发酵毕赤酵母和酿酒酵母的混合发酵具有应用于葡萄酒酿造的应用潜力.