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拟康氏木霉eg1基因的克隆及在酿酒酵母中的分泌表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2024-07-14 阅读:624
从拟康氏木霉3.3002基因组中克隆了内切葡聚糖酶EGI基因,该基因全长1566 bp,由3个外显子2个内含子组成,编码461个氨基酸.编码蛋白EGI的N端为22aa组成的信号肽,其后依次为催化结构域、连接肽和结合结构域.采用重叠PCR法获得无内含子的内切葡聚糖酶基因eg1,并将其成熟肽编码序列插入酿酒酵母分泌型表达载体pYEα中,构建成pYEα-Peg1重组质粒,转化酿酒酵母.重组转化子经β-半乳糖诱导,检测表达产物的分子大小以及酶活,结果表明,转化子在刚果红平板上可产生明显的水解圈;酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EG I并分泌到胞外;SDS-PAGE电泳显示EGI蛋白分子量比预期目的蛋白稍偏大.
目的:探讨参乌酒治疗痹证的疗效疗效。方法选取痹证209例,随机分为观察组115例和对照组94例。观察组给予参乌酒治疗,对照组给予贝诺酯治疗,1个疗程后可酌加药量,连续治疗1~5个疗程后,比较疗效。结果治疗后,观察组痊愈率61.74%,总有效率90.43%。对照组痊愈率40.43%,总有效率85.11%。观察组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论参乌酒治疗痹证疗效优于贝诺酯片。
采用反相高效液相色谱技术,测定分析新疆玛纳斯55种酿酒葡萄品种中6种有机酸含量.结果表明:酿酒葡萄中的主要有机酸是酒石酸、苹果酸和柠檬酸(相对许多产区含量较高),草酸、琥珀酸和乳酸含量较少;酿酒白葡萄中有机酸总量显著高于酿酒红葡萄,除苹果酸在酿酒红葡萄中的含量高于白葡萄以外,其他5种有机酸在酿酒红葡萄中的含量均较低.不同酿酒葡萄间有机酸含量变化较大;28种酿酒白葡萄中,白比诺(Pinot Blanc)中总有机酸(21.580g/L)、酒石酸(11.790g/L)和苹果酸(9.630g/L)含量最高,白雷司令(White Riesling)中柠檬酸高达5.400g/L,而伏罗西(Bлoщ Vioshi)中总有机酸和苹果酸含量最低(分别为7.250g/L和0).27个酿酒红葡萄中,以巴柯(Bacco nion)的总有机酸和苹果酸含量(分别为22.27g/L和18.210g/L)最高,而酒石酸含量(2.060g/L)最低,黑后(Heihou)柠檬酸含量(2.510g/L)最高,玫瑰香(Muscat Hamburg)中总有机酸含量(4.94g/L)最低.
以酵母AS2.1190为出发菌株,把含有木糖还原酶基因(XYL1)、木糖醇脱氢酶基因(XYL2)以及木酮糖激酶基因(XKS1)的质粒载体pYMIKP-xy127线性化后多拷贝整合进入其基因组,筛选得到基因工程菌株GZ4-127,并对此工程菌株进行葡萄糖、木糖共发酵试验.结果显示GZ4-127比出发菌株的菌体密度提高5%,木糖消耗提高2倍,酒精产率提高12%,说明工程菌已能够有效地利用木糖生产乙醇.
本发明涉及白酒酿造领域,具体提供了一种全新香型,特别是一种泉香型白酒及其生产方法,所述的泉香型白酒为芝浓兼香型白酒,采用了全新的制备工艺采用独特的隔轮堆积发酵、清蒸混烧与混蒸混烧相结合的生产工艺,结合多粮发酵、砖泥混合窖、大麸曲结合、高温堆积、高温发酵、高温馏酒、长期发酵的工艺,所得到的原酒经分级入库、长期储存、精心勾调后得到芝浓兼香型白酒成品,所获得的酒品既有芝麻香幽雅细腻、醇厚丰满、回味留香持久之风格,又有浓香型白酒粮香舒适,醇甜甘冽之特点;其品质典雅高贵,其香气舒适宜人,其味道绵甜爽净,填补了白酒领域中的空白。
本发明提供一种检测白酒的方法,包括如下步骤:配制高锰酸钾、溴酚蓝和混有氢氧化钠的苯酚红溶液作为检测阵列,在阵列的3个位点上分别滴加1mL待测酒进行检测,选择水作为空白样;通过肉眼观察阵列的3个位点颜色变化,判断白酒的类型。经用SPSS?22进行表征,检测四种基酒和九种香型本发明方法准确度较高。本发明仅用三种常见染色剂,就能实现白酒的多功能检测;无需大型仪器,检测成本低廉;样品无需前处理,操作简单;可以肉眼观察出颜色变化。

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